[發明專利]一種基于DNA折紙術的精確識別靶向納米載體的構建方法及其應用

有效

• 申請號: 201710615442.0
• 申請日: 2017-07-26
• 公開（公告）號: CN107469088B
• 公開（公告）日: 2020-04-03
• 發明（設計）人: 趙永星;張楠;華海嬰;唐亞芳
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: A61K47/54
• 分類號: A61K47/54;A61K47/55;A61K31/704;A61K31/136;A61K31/7088;A61K45/06;A61P35/00;B82Y5/00
• 代理公司: 鄭州優盾知識產權代理有限公司 41125
• 代理人: 孫詩雨

1.一種基于DNA折紙術的精確識別靶向納米載體的構建方法，其特征在于，步驟如下：

（1）制備訂書釘單鏈DNA、特殊訂書釘單鏈DNA、核酸適配體DNA及腳手架DNA；

（2）將步驟（1）得到的訂書釘單鏈DNA、特殊訂書釘單鏈DNA和腳手架DNA溶于1×TAE/Mg²⁺溶液中得反應溶液，進行自組裝，得到DNA折紙溶液；

（3）向步驟（1）得到的DNA折紙溶液中加入核酸適配體DNA，得到核酸適配體精確定位定量修飾的DNA折紙靶向載體溶液；

（4）向步驟（3）得到核酸適配體精確定位定量修飾的DNA折紙靶向載體溶液中加入蒽環類抗腫瘤藥物溶液，避光孵育2-6h后離心去上清，沉淀即為精確識別的靶向納米載藥分子；

所述步驟（1）中，核酸適配體DNA的序列如SEQ ID NO：1所示，核酸適配體DNA與特殊訂書釘單鏈DNA之間設有連接體，連接體為訂書釘單鏈DNA上特異性的寡核苷酸序列與核酸適配體DNA通過堿基互補配對原則形成的結構。

2.如權利要求1所述的基于DNA折紙術的精確識別靶向納米載體的構建方法，其特征在于：所述步驟（2）中，腳手架DNA：訂書釘單鏈DNA：特殊訂書釘單鏈DNA的物質的量比為1：（5-10）：（5-10）；自組裝的操作為：將反應溶液置于PCR儀中，以0.01-0.17℃/s，從95℃退火至20℃。

3.如權利要求1所述的基于DNA折紙術的精確識別靶向納米載體的構建方法，其特征在于：所述步驟（2）中，1×TAE/Mg²⁺溶液含Tris base 40Mm、乙酸鎂 12.5mM、EDTA-2Na 2mM，pH為8.0。

4.如權利要求1所述的基于DNA折紙術的精確識別靶向納米載體的構建方法，其特征在于：所述步驟（3）中，核酸適配體DNA：DNA折紙的物質的量比為1：（1-32）。

5.如權利要求1所述的基于DNA折紙術的精確識別靶向納米載體的構建方法，其特征在于：所述步驟（4）中，DNA折紙靶向載體：蒽環類抗腫瘤藥物的物質的量比為1：（12500-50000），蒽環類抗腫瘤藥物為柔紅霉素、阿霉素、表阿霉素、伊達比星、戊柔比星或米托蔥酮中的一種或多種。

6.權利要求1-5任一項方法所構建的精確識別靶向納米載體，其特征在于：所述靶向納米載體在制備用于腫瘤精準生物治療和化學治療的藥物中的應用。