[發(fā)明專利]一種基于DNA折紙術(shù)的精確識別靶向納米載體的構(gòu)建方法及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710615442.0 | 申請日： | 2017-07-26 |
| 公開（公告）號： | CN107469088B | 公開（公告）日： | 2020-04-03 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 趙永星;張楠;華海嬰;唐亞芳 | 申請（專利權(quán)）人： | 鄭州大學(xué) |
| 主分類號： | A61K47/54 | 分類號： | A61K47/54;A61K47/55;A61K31/704;A61K31/136;A61K31/7088;A61K45/06;A61P35/00;B82Y5/00 |
| 代理公司： | 鄭州優(yōu)盾知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 41125 | 代理人： | 孫詩雨 |
| 地址： | 450001 河南*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 基于 dna 折紙 精確 識別 靶向 納米 載體 構(gòu)建 方法 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種基于DNA折紙術(shù)的精確識別靶向納米載體的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟如下：
（1）制備訂書釘單鏈DNA、特殊訂書釘單鏈DNA、核酸適配體DNA及腳手架DNA；
（2）將步驟（1）得到的訂書釘單鏈DNA、特殊訂書釘單鏈DNA和腳手架DNA溶于1×TAE/Mg2+溶液中得反應(yīng)溶液，進(jìn)行自組裝，得到DNA折紙溶液；
（3）向步驟（1）得到的DNA折紙溶液中加入核酸適配體DNA，得到核酸適配體精確定位定量修飾的DNA折紙靶向載體溶液；
（4）向步驟（3）得到核酸適配體精確定位定量修飾的DNA折紙靶向載體溶液中加入蒽環(huán)類抗腫瘤藥物溶液，避光孵育2-6h后離心去上清，沉淀即為精確識別的靶向納米載藥分子；
所述步驟（1）中，核酸適配體DNA的序列如SEQ ID NO：1所示，核酸適配體DNA與特殊訂書釘單鏈DNA之間設(shè)有連接體，連接體為訂書釘單鏈DNA上特異性的寡核苷酸序列與核酸適配體DNA通過堿基互補(bǔ)配對原則形成的結(jié)構(gòu)。
2.如權(quán)利要求1所述的基于DNA折紙術(shù)的精確識別靶向納米載體的構(gòu)建方法，其特征在于：所述步驟（2）中，腳手架DNA：訂書釘單鏈DNA：特殊訂書釘單鏈DNA的物質(zhì)的量比為1：（5-10）：（5-10）；自組裝的操作為：將反應(yīng)溶液置于PCR儀中，以0.01-0.17℃/s，從95℃退火至20℃。
3.如權(quán)利要求1所述的基于DNA折紙術(shù)的精確識別靶向納米載體的構(gòu)建方法，其特征在于：所述步驟（2）中，1×TAE/Mg2+溶液含Tris base 40Mm、乙酸鎂 12.5mM、EDTA-2Na 2mM，pH為8.0。
4.如權(quán)利要求1所述的基于DNA折紙術(shù)的精確識別靶向納米載體的構(gòu)建方法，其特征在于：所述步驟（3）中，核酸適配體DNA：DNA折紙的物質(zhì)的量比為1：（1-32）。
5.如權(quán)利要求1所述的基于DNA折紙術(shù)的精確識別靶向納米載體的構(gòu)建方法，其特征在于：所述步驟（4）中，DNA折紙靶向載體：蒽環(huán)類抗腫瘤藥物的物質(zhì)的量比為1：（12500-50000），蒽環(huán)類抗腫瘤藥物為柔紅霉素、阿霉素、表阿霉素、伊達(dá)比星、戊柔比星或米托蔥酮中的一種或多種。
6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)方法所構(gòu)建的精確識別靶向納米載體，其特征在于：所述靶向納米載體在制備用于腫瘤精準(zhǔn)生物治療和化學(xué)治療的藥物中的應(yīng)用。
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