[發明專利]一種基于量子點的蛋白質印跡聚合物微球及其制備和應用

有效

• 申請號: 201710610059.6
• 申請日: 2017-07-25
• 公開（公告）號: CN107383371B
• 公開（公告）日: 2019-09-27
• 發明（設計）人: 李金花;王曉艷;陳令新;于佳洛
• 申請（專利權）人: 中國科學院煙臺海岸帶研究所
• 主分類號: C08G73/06
• 分類號: C08G73/06;C08J9/26;C08K9/04;C08K3/30;G01N21/64;C09K11/88;C09K11/02
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎;周秀梅

1.一種基于熒光量子點的蛋白質印跡聚合物微球，其特征在于：聚合物微球以巰基乙酸（TGA）和谷胱甘肽（GSH）共同作為穩定劑的CdTe量子點直接作為功能單體，蛋白質為模板分子，多巴胺為交聯劑，通過多巴胺的自聚合得聚合物微球。

2.按權利要求1所述的基于熒光量子點的蛋白質印跡聚合物微球，其特征在于：所述蛋白質為藻藍蛋白（PC）或牛血紅蛋白（BHb）。

3.按權利要求1或2所述的基于熒光量子點的蛋白質印跡聚合物微球，其特征在于：所述巰基乙酸和谷胱甘肽共同穩定的CdTe量子點的制備方法：

1）碲粉和硼氫化鈉混合后加入乙醇和水的混合液，而后在30-50 ℃水浴中加熱反應至黑色的碲粉完全消失，上清液變為淡紫色為止；

2）硝酸鎘加入至過量的水中，然后加入巰基乙酸和谷胱甘肽，而后調節體系pH至8-10，調節后加入步驟1）獲得碲粉產物的上清液，氮氣保護下回流，得到綠色巰基乙酸和谷胱甘肽共同穩定的CdTe量子點液。

4.一種權利要求1所述的基于熒光量子點的蛋白質印跡聚合物微球的制備方法，其特征在于：以巰基乙酸（TGA）和谷胱甘肽（GSH）共同作為穩定劑的CdTe量子點直接作為功能單體，蛋白質為模板分子，多巴胺為交聯劑，通過多巴胺的自聚合得到的蛋白質印跡聚合物微球即為熒光納米印跡傳感器；

具體為

a. 巰基乙酸和谷胱甘肽（TGA-GSH）共同穩定的CdTe量子點的制備：

1）碲粉和硼氫化鈉混合后加入乙醇和水的混合液，而后在水浴中30-50 ℃恒溫反應至黑色的碲粉完全消失，上清液變為淡紫色為止；

2）硝酸鎘加入至過量的水中，然后加入巰基乙酸和谷胱甘肽，而后調節體系pH至8-10，調節后加入步驟1）獲得碲粉產物的上清液，氮氣保護下回流，得到綠色巰基乙酸和谷胱甘肽共同穩定的CdTe量子點液；待用；

b. 蛋白質納米印跡聚合物的制備：取上述TGA-GSH共同穩定的量子點溶液，加入到含有蛋白質的磷酸緩沖（PBS）溶液中，攪拌后加入多巴胺，加入過硫酸鉀（KPS），水浴中反應過夜；將所得的聚合物用洗脫液乙醇/乙腈洗滌，以去除模板蛋白質，即為蛋白質印跡聚合物。

5.按權利要求4所述的基于熒光量子點的蛋白質印跡聚合物微球的制備方法，其特征在于：所述步驟a. 巰基乙酸和谷胱甘肽共同穩定的CdTe量子點的制備：1）稱取25-45 mg碲粉和30-50 mg的硼氫化鈉，加入0.5-2.5 mL的乙醇和0.1-1.5 mL的水，在30-50 ℃的水浴中加熱反應至黑色的碲粉完全消失，上清液變為淡紫色為止；

2）稱取80-100 mg的硝酸鎘加入到65-85 mL水，然后加入15-35 μL的巰基乙酸和100-120 mg谷胱甘肽，用0.5-1.5 M的氫氧化鈉溶液調節溶液的pH，用氮氣吹20-40 min，然后取步驟1）制備的淡紫色上清液0.5-2 mL加入到硝酸鎘溶液中，氮氣保護下，回流1-3小時，得到綠色巰基乙酸和谷胱甘肽共同穩定的CdTe量子點液。

6.按權利要求4所述的基于熒光量子點的蛋白質印跡聚合物微球的制備方法，其特征在于：所述步驟b. 蛋白質熒光納米印跡聚合物的制備：

a) 取4-6 mL TGA-GSH共同穩定的量子點溶液，加入到含有20-40 mg藻藍蛋白的5-20mL pH=6.5-8.5, 5-20 mM PBS溶液中，攪拌2-6小時后，加入20-40 mg多巴胺，氮吹10-30min后，加入3-7 mg KPS，30-50 ℃水溶中反應過夜，將所得的聚合物用洗脫液乙醇/乙腈為v/v =8:2,洗滌2-5次，以去除模板藻藍蛋白，將制得藻藍蛋白印跡聚合物；

b) 取4-6 mL TGA-GSH共同穩定的量子點溶液，加入到含有5-20 mg牛血紅蛋白的5-20mL pH=6.5-8.5, 5-20 mM PBS溶液中，攪拌2-6小時后，加入5-20 mg多巴胺，氮吹10-30min后，加入3-7 mg KPS，30-50 ℃水溶液中反應過夜，將所得的聚合物用洗脫液乙醇/乙腈為v/v =8:2,洗滌2-5次，以去除模板牛血紅蛋白，將制得牛血紅蛋白印跡聚合物。