[發明專利]一種利用鏈霉菌發酵生產奈馬菌素的培養基

在審

• 申請號: 201710609340.8
• 申請日: 2017-07-25
• 公開（公告）號: CN107267569A
• 公開（公告）日: 2017-10-20
• 發明（設計）人: 任勇;徐淑芬
• 申請（專利權）人: 寧夏泰瑞制藥股份有限公司
• 主分類號: C12P17/18
• 分類號: C12P17/18;C12N1/20;C12R1/465
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于發酵技術領域，特別是涉及一種利用鏈霉菌發酵生產奈馬菌素的培養基。

背景技術

奈馬菌素是鏈霉素發酵產生的次級代謝產物，其用途是化學合成莫西菌素的主要初始原料。莫西菌素屬于阿維菌素類藥物。20世紀80年代中期，莫西菌素開始作為獸用驅蟲藥使用。在國外，同伊維菌素(Ivermectin，IVM)一樣，MXD是一種目前廣泛用于獸醫臨床的廣譜、高效、新型大環內酯類驅蟲抗生素。

目前，國內奈馬菌素的發酵生產采用二級發酵模式，該方式存在的主要問題有以下幾點：

1 國內針對奈馬菌素發酵生產工藝報道的文獻資料較少。

2 國內奈馬菌素發酵水平較低，其發酵單位一般在3000-4000u/ml。國內企業申報了奈馬菌素發酵生產工藝專利（專利名稱： 一種鏈霉菌發酵生產奈馬菌素的培養基和培養方法；專利號：CN201410433214.8），該專利中詳細闡述了奈馬菌素培養基配方和生產工藝，但其存在的問題是發酵技術水平較低，生產成本較高，產品市場競爭力弱。

發明內容

本發明的目的就在于克服上述現有技術的缺陷，提供一種有效提高發酵單位，同時最大限度的降低原輔料對發酵單位的影響，降低生產成本，且原輔料來源不受環境影響，保證其供應充足，實現奈馬菌素穩定、高效生產的利用鏈霉菌發酵生產奈馬菌素的培養基。

為實現上述目的所采取的技術方案為：

一種利用鏈霉菌發酵生產奈馬菌素的培養基，其特征在于包括種子培養基和發酵培養基，其中所述種子培養基組成為：燕麥粉8～12g/L、甜菜糖蜜7～11ml/L、蠶蛹粉12～16g/L、菌體蛋白9～13g/L、麩皮水解液8～12ml/L、醋酸銨0.3～0.7g/L、輕質碳酸鈣1～5g/L；

所述發酵培養基組成為：丙三醇3～7ml/L、燕麥粉10～14g/L、甜菜糖蜜11～15ml/L、蠶蛹粉14～18g/L、菌體蛋白11～15g/L、麩皮水解液12～16ml/L、魚蛋白胨1～5g/L、醋酸銨0.5～0.9g/L、輕質碳酸鈣1～5g/L、磷酸二氫鉀0.2～0.6g/L、硫酸鎂0.03～0.07g/L、硫酸亞鐵0.01～0.05g/L、美國陶氏DOWFAX 20A64抑泡劑0.02～0.06ml/L。

本發明的技術優勢體現在：

本發明明確了種子培養、發酵培養的配方及原材料的配伍比例，其中種子培養基中的碳源和碳源不僅保證了發酵培養基中菌種的數量，有利于提高其產素能力，而且避免了從搖瓶培養基直接轉到發酵培養基因環境變化太大，相關合成生物酶難以適應周圍發酵環境，導致發酵時間延長，而且會出現各種不利發酵情況。采用本發明的培養基配方發酵生產奈馬菌素，最終使得發酵單位達到5500u/ml以上，生產周期控制在220h左右，同國內技術相比，發酵單位提高了20%以上，生產周期減少了20h以上，同時降低了能耗和生產成本，提高了產品市場競爭力。

本發明適用于規模化發酵生產奈馬菌素，能夠滿足年產100噸奈馬菌素的生產需求。

具體實施方法

下面用實例予以說明本發明，應該理解的是，實例是用于說明本發明而不是對本發明的限制。本發明的范圍與核心內容依據權利要求書加以確定。

下述實施例的菌種選用肉桂地鏈霉菌：生產使用的菌種來源為母瓶發酵液。母瓶發酵液質量要求為：pH6～7；菌體濃度20～30%；鏡檢無雜菌；發酵單位500～2000u/ml。

奈馬菌素發酵生產工藝步驟為：

1） 種子培養：將已經培養好的鏈霉菌母瓶發酵液按照0.1～0.3L/m³的接種量接入種子培養基中進行種子培養，至菌體濃度30～35%、pH值6～7、培養時間48-50h時移種，移種比例控制在10-11%。

2） 發酵培養：將培養好的種子液移入已滅菌的發酵培養基進行發酵培養，至菌體濃度35～40%、化學效價＞5500u/mL、pH6～8、培養時間220h時終止發酵。

3） 種子培養條件為：罐壓0.03～0.05MPa；罐溫28～30℃；空氣流量：40～60m³/h；攪拌轉速60～80r/min。

4） 所述發酵培養條件為：

a 培養基初始pH：發酵培養基滅菌后pH控制在6～7。

b 溫度： 28～30℃。

c 攪拌轉速：攪拌轉速60～100r/min。

d 壓力控制：罐壓0.05～0.06MPa。

e pH控制：發酵過程中pH控制在6～8。