[發明專利]一種具有雙功能的白蛋白納米球的制備方法

在審

• 申請號: 201710607762.1
• 申請日: 2017-07-24
• 公開（公告）號: CN107441510A
• 公開（公告）日: 2017-12-08
• 發明（設計）人: 陳道楨;安艷麗;唐秋莎;韓勇;陳萱;楊蕊
• 申請（專利權）人: 無錫市婦幼保健院
• 主分類號: A61K49/08
• 分類號: A61K49/08;A61K49/14;A61K49/18;A61K49/00;C09K11/85;C09K11/02;C01G49/08;B82Y5/00
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標事務所(普通合伙)32249
• 代理人: 沈廉

技術領域

本發明涉及一種既可進行磁共振成像又可進行光學成像的載上轉換發光納米材料和納米級四氧化三鐵的白蛋白納米球。

背景技術

氧化鐵納米粒子具有超順磁性、良好的生物相容性和高靈敏性，被認為是一種良好的磁共振成像造影劑。納米級四氧化三鐵是一種新型MRI(磁共振成像)對比劑，主要產生T₂負性對比效應。由于其適中的納米尺度和腫瘤組織透過性增強及滯留效應，氧化鐵納米粒子能夠在腫瘤組織富集，因而在磁共振腫瘤成像領域具有巨大的應用前景。然而，作為納米材料，氧化鐵納米粒子在血液循環系統中容易被血漿中的調理素非特異性吸附，進而被網狀內皮系統快速識別和攝取，大量的滯留在肝脾等器官。這會降低氧化鐵納米粒子在腫瘤部位的富集，從而影響腫瘤成像的效果。與巨噬細胞被動靶向的葡聚糖包被的四氧化三鐵納米顆粒比較，本發明所用的載納米級四氧化三鐵的白蛋白納米球具有能夠降低血漿蛋白結合率，減少網狀內皮系統清除率，增加循環時間的優點，因而更適用于腫瘤的的分子影像學研究。

近年來，上轉換發光納米材料作為新一代生物熒光探針，受到了人們的廣泛關注，對它的研究逐漸成為生命科學研究領域的熱點和前沿。上轉換發光是指稀土離子吸收兩個或兩個以上低能光子而輻射一個高能光子的發光現象，通常是指近紅外光轉換為可見光。相對于有機染料和量子點而言，上轉換發光納米材料具有光穩定性好、化學穩定性高、吸收和發射帶很窄、發光壽命長、潛在生物毒性小等優點；另外，采用近紅外連續激光作為激發光源，具有較深的光穿透深度、對生物組織幾乎無損傷、無生物背景熒光干擾等顯著優勢。盡管稀土上轉換發光材料己有多年的研究歷史，并取得了許多的研究成果，但是相對于有機染料和量子點而言，它們在生物體標記方面的應用研究還是很少的，目前還處于研究的初步階段。將抗腫瘤藥物連接到上轉換發光納米材料上用于腫瘤細胞的成像最近被陸續報道。說明上轉換發光納米材料可以很好地應用于動物體內成像和標記，證實了上轉換發光納米材料在生物活體標記中的潛在應用價值。

任何一種醫學影像技術都有其不足，多種影像技術融合在一起，將能夠實現優勢互補，充分發揮各種影像技術在疾病診斷、治療決策與療效監測、預后評估等方面的作用。磁共振/光學雙模式成像技術融合磁共振成像的高時空分辨率和穿透能力以及光學成像的高度靈敏性于一體，成為近年來影像醫學研究領域中頗受關注的研究方向。將磁共振和光學成像技術融合在一起，兩種技術的特點相互補充，根據構成的磁性光學探針材料的不同，將能夠實現MRI和光學的雙重顯像、顯像與治療的雙重作用以及檢測/標記/磁靶向等功能的結合。在磁共振/光學雙模式成像技術研究中，具有優良性能的影像探針研究是最具挑戰性任務之一。

發明內容

技術問題：本發明的目的是提供一種具有雙功能的白蛋白納米球的制備方法。將上轉換發光納米材料和納米級四氧化三鐵包覆在同一納米結構中，同時實現MRI和光學的雙重顯像，為臨床應用研究提供可靠的實驗研究數據及理論基礎。

技術方案：本發明的一種具有雙功能的白蛋白納米球的組成為：

NaYF₄:Yb,Er-Fe₃O₄@BSA，其中BSA為牛血清白蛋白，NaYF₄:Yb,Er-Fe₃O₄與BSA是核殼結構，BSA包覆NaYF₄:Yb,Er-Fe₃O₄。

本發明的具有雙功能的白蛋白納米球的制備方法采用去溶劑化-交聯法制備具有上轉換發光和磁共振成像雙功能的納米級四氧化三鐵的白蛋白納米球，具體包括以下步驟：

步驟1.稱量牛血清白蛋白、上轉換發光納米材料溶液和納米級四氧化三鐵溶液轉移至反應器，再加入去離子水，充分攪拌；

步驟2.加入NaOH，在攪拌狀態下緩慢滴入無水乙醇直至溶液出現渾濁，再向反應體系滴入戊二醛溶液，密閉攪拌；

步驟3.將反應液倒入離心管內超高速離心，用去離子水洗滌后即得到具有上轉換發光和磁共振成像雙功能的納米級四氧化三鐵的白蛋白納米球。

其中：

所述步驟1中稱量牛血清白蛋白、上轉換發光納米材料和納米級四氧化三鐵，是按照質量比(250～400):(40～80):(3.878～7.756)分別稱量。

所述上轉換發光納米材料溶液中，上轉換發光納米材料含量為20mg/mL～50mg/mL。