[發明專利]阿膠在制備促細胞分裂繁殖、抗凋亡的細胞培養物中的應用

有效

• 申請號: 201710606024.5
• 申請日: 2017-07-24
• 公開（公告）號: CN109294970B
• 公開（公告）日: 2021-12-07
• 發明（設計）人: 韓晶;郝向慧;楊澤;劉磊;郭尚偉;周祥山
• 申請（專利權）人: 東阿阿膠股份有限公司;北京醫院
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 天津欣達睿誠知識產權代理事務所(普通合伙) 12216
• 代理人: 李欣

本發明涉及阿膠在制備促細胞分裂繁殖、抗凋亡的細胞培養物中的應用，屬于生物試劑領域。阿膠在制備促細胞分裂繁殖、抗凋亡的細胞培養物中的應用。本發明證明了阿膠在未知的生物領域的應用價值和應用前景及潛在的抗凋亡作用，它也能替代胎牛血清為體外培養的細胞提供分裂繁殖所需要的營養物質。本發明解決了細胞培養過程中的常見問題，改善體外培養的細胞狀態同時降低了昂貴胎牛血清使用量，從產業角度解決胎牛血清的生產壓力，為體外細胞培養提供新的培養思路。

技術領域

本發明涉及阿膠在制備促細胞分裂繁殖、抗凋亡的細胞培養物中的應用，屬于生物試劑領域。

背景技術

阿膠是一味傳統中藥，味甘，性平，質潤無毒，兩千多年來一直被公認為補血圣藥，具有滋陰補血，潤燥止血的功效。阿膠主要由黑驢皮熬制而成，基本成分為膠原蛋白的降解產物，含有18種氨基酸總量可達75％，其中包括8種人體必需氨基酸。在人體消化道內阿膠中的各種蛋白短肽及氨基酸，與微量元素相互結合，相互作用能產生多種酶，激素，維生素等功能性分子，最終起到獨特的滋補和保鍵作用。阿膠的成份十分復雜，主要活性成份未知，因此采用科學有效的方法來證明阿膠的藥用功能及作用機制具有十分重大的意義。

目前，在生物領域的科學研究都要進行大量的細胞實驗，而細胞的生長狀態決定了細胞各項實驗數據的質量以及實驗的精確性，因為不同的細胞狀態下得到的實驗結果會有較大偏差。所以在進行細胞實驗時首先要保證細胞的生長狀態，尤其一些體外比較難養的細胞及一些易分化的細胞。例如，生物科研領域經常分離原代細胞進行實驗，而離體的原代細胞在體外的培養條件下生長緩慢且細胞狀態很差，又如像RAW264.7細胞(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)這樣的免疫細胞在體外培養的條件下隨著傳代次數的增加極易分化。

細胞培養基是人工模擬細胞在體內生長的營養環境，是提供細胞營養和促進細胞生長增殖的物質基礎。粉劑時，多稱為培養基，而將粉劑配成液體后，多稱為培養液。培養液中常常補加血清、抗生素等成分。培養基主要包括天然細胞培養基、合成細胞培養基和無血清細胞培養基等。天然細胞培養基是人們早期采用的細胞培養基，直接取自于動物組織提取液或體液，如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。營養價值高，但成分復雜，差異大、不穩定，來源也受到限制。合成細胞培養基是用化學成分明確的試劑配制的培養基，組分穩定，主要包括糖類、必需氨基酸、維生素、無機鹽類等。自1950年199細胞培養基問世以來，合成細胞培養基發展至今已有幾十種，除了沿用半個世紀的基礎合成細胞培養基之外，近年來還出現了營養成分更加豐富的低血清細胞培養基。但由于天然培養基的一些營養成分不能被合成細胞培養基完全代替，因此一般需在合成細胞培養基中添加5％～10％的胎牛血清。胎牛血清的加入對細胞培養非常有效，但胎牛血清的成分復雜，這對培養產物的分離純化和檢測會帶來一定的不便，為減少胎牛血清的影響，本發明將阿膠用于細胞體外培養的研究，開發一種新型的低血清或無血清細胞培養基。

發明內容

本發明要解決的第一個技術問題是提供阿膠在制備促細胞分裂繁殖、抗凋亡的細胞培養物中的應用。

本發明要解決的第二個技術問題是提供一種新型的低血清或無血清培養基。

為是實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

阿膠在制備促細胞分裂繁殖、抗凋亡的細胞培養物中的應用。

阿膠在制備促細胞分裂繁殖的細胞培養物中的應用。

阿膠在制備抗凋亡的細胞培養物中的應用。

本發明首次發現了阿膠具備抗細胞凋亡的作用。阿膠能提供細胞抵抗外界不良環境的能力，即在有H₂O₂凋亡誘導劑的存在下能為細胞提供保護作用，極大降低細胞的死亡數。