[發明專利]一種用于實時熒光定量PCR的裝置及方法

有效

• 申請號: 201710600147.8
• 申請日: 2017-07-21
• 公開（公告）號: CN107356576B
• 公開（公告）日: 2020-09-08
• 發明（設計）人: 吳文明;李淵明;穆全全
• 申請（專利權）人: 中國科學院長春光學精密機械與物理研究所
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 李海建

本發明提供了一種用于實時熒光定量PCR的裝置及方法，該裝置包括加壓器(1)、樣品容器(3)、微管道(4)、導熱片(5)和恒溫器(6)，多個導熱片(5)位于恒溫器(6)上，恒溫器(6)加熱導熱片(5)并使導熱片(5)的表面的溫度分布包括高溫部和低溫部，高溫部的溫度包括PCR擴增的高溫變性溫度，低溫部的溫度包括PCR擴增的低溫復性溫度；與導熱片(5)一一對應的微管道(4)以預設次數循環往復地經過導熱片(5)的高溫部和低溫部；加壓器(1)用于向多個樣品容器(3)和多個微管道(4)組成的系統內充氣加壓。本發明提供的裝置體積小、成本低，且操作方便。

技術領域

本發明涉及PCR定量技術領域，特別是涉及一種用于實時熒光定量PCR的裝置及方法。

背景技術

聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，實時熒光定量PCR的原理為：將標記有熒光素的探針與模板DNA混合后，模板DNA完成高溫變性，低溫復性，適溫延伸的熱循環，隨著循環次數的增加，被擴增的目的基因片段呈指數規律增長，通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化的熒光信號強度，求得Ct值(熒光信號強度到達設定閾值時所經歷的循環數)，同時利用數個已知模板濃度的標準品作對照，即可得出待測標本目的基因的拷貝數。

目前，進行實時熒光定量PCR通常需要用到復雜的溫度控制系統來實現熱循環，溫度控制系統普遍體積較大、成本較高、操作復雜，因此，如何提供一種體積小、成本低、易操作的用于實時熒光定量PCR的裝置，成為了本領域技術人員亟待解決的技術問題。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種用于實時熒光定量PCR的裝置及方法，該裝置體積小、成本低，且操作方便。

為了達到上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種用于實時熒光定量PCR的裝置，包括：

恒溫器；

位于所述恒溫器上的多個導熱片，所述恒溫器用于加熱所述導熱片，所述導熱片的表面的溫度分布包括高溫部和低溫部，所述高溫部的溫度包括PCR擴增的高溫變性溫度，所述低溫部的溫度包括PCR擴增的低溫復性溫度；

與所述導熱片的數量對應的多個微管道，所述微管道與所述導熱片的表面接觸，且所述微管道以預設次數循環往復地經過所述導熱片的高溫部和低溫部；

與所述導熱片的數量對應的多個樣品容器，所述樣品容器與所述微管道一一對應連通；

與多個所述樣品容器連通的加壓器，所述加壓器用于向多個所述樣品容器和多個所述微管道組成的系統內充氣加壓。

優選地，在上述裝置中，所述預設次數為20次～80次。

優選地，在上述裝置中，所述微管道纏繞布設在所述導熱片上，且所述微管道循環往復地經過所述導熱片的上表面和下表面；

所述導熱片的上表面為所述高溫部，下表面為所述低溫部，或者所述導熱片的上表面為所述低溫部，下表面為所述高溫部。

優選地，在上述裝置中，所述導熱片的一部分搭接在所述恒溫器上，其余部分懸在所述恒溫器之外，所述微管道布設在所述導熱片的相對所述恒溫器的另一面上，且所述微管道循環往復地經過所述導熱片與所述恒溫器搭接的部分和懸在所述恒溫器之外的部分。

優選地，在上述裝置中，所述微管道的出口一端連通有收集器，所述收集器上安裝有排氣閥。

優選地，在上述裝置中，所述樣品容器為滴管。

優選地，在上述裝置中，所述加壓器為注射器。

優選地，在上述裝置中，所述加壓器與所述樣品容器之間設置有通氣閥。