[發(fā)明專利]酸性及脂肪酶雙重敏感納米容器及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710599769.3
• 申請日: 2017-07-21
• 公開（公告）號: CN107456580A
• 公開（公告）日: 2017-12-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫艷輝;魏萌萌;王婷;傅佳駿
• 申請（專利權(quán)）人: 南京理工大學(xué)
• 主分類號: A61K47/40
• 分類號: A61K47/40;A61K47/04;A61K31/7068;A61K31/352;A61P35/00
• 代理公司: 南京理工大學(xué)專利中心32203
• 代理人: 劉海霞

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于材料技術(shù)領(lǐng)域，涉及酸性及脂肪酶雙重敏感納米容器及其制備方法。

背景技術(shù)

隨著人類工作生活方式的改變，出現(xiàn)環(huán)境惡化與食品安全等問題，全球患癌人數(shù)已超1400萬。目前治療癌癥的方法主要有外科手術(shù)、放療、生物療法、化療等。每種方法都各有優(yōu)缺點(diǎn)，臨床中一般會相互配合治療。其中外科手術(shù)法理論上可以痊愈，但對人體創(chuàng)傷極大。放療是使用輻射線殺死癌細(xì)胞，縮小腫瘤，但放射線也會破壞正常細(xì)胞，使人體淋巴細(xì)胞數(shù)量和活性降低。生物療法相對副作用小，但一般用于輔助治療。以上三種方法屬于局部治療，只對治療部位的腫瘤有效，對于潛在的轉(zhuǎn)移病灶和已經(jīng)發(fā)生臨床轉(zhuǎn)移的癌癥就難以發(fā)揮有效治療。而化學(xué)療法是一種全身治療的手段，無論采用什么途徑給藥，化療藥物都會隨著血液循環(huán)遍布全身的絕大部分器官和組織。因此它最主要的缺點(diǎn)是沒有專一性，在殺傷惡性細(xì)胞的同時，也會殺死正常組織細(xì)胞。

為了解決上述問題，可以選擇性釋放藥物的智能納米容器應(yīng)運(yùn)而生。現(xiàn)階段的納米容器如pH-刺激響應(yīng)型智能納米容器(Wang,T.,et al.(2014).Chemical Communications,50(83),12469-12472.)、酶刺激響應(yīng)型智能納米容器均是單重響應(yīng)，刺激源響應(yīng)時間長，過程繁瑣復(fù)雜，靈敏度低，應(yīng)用范圍具有局限性，限制了納米容器在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種靈敏度高、生物相容性好、可重復(fù)利用的酸性及脂肪酶雙重敏感納米容器及其制備方法。

實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)解決方案為：

酸性及脂肪酶雙重敏感納米容器，其分子結(jié)構(gòu)如下：

其中，介孔二氧化硅微球通過酯鏈連接苯并咪唑基團(tuán)修飾的環(huán)糊精分子，羅丹明或吉西他濱經(jīng)吸附貯存在介孔二氧化硅微球內(nèi)部。

酸性及脂肪酶雙重敏感納米容器的制備方法，通過對介孔二氧化硅微球以及環(huán)糊精分子進(jìn)行表面改性，使其具有釋放酸性及酶雙重刺激響應(yīng)特性，從而釋放藥物分子，具體步驟如下：

步驟1，將介孔二氧化硅微球與硅烷偶聯(lián)劑3-氨丙基三乙氧基硅烷加入到無水甲苯中，加熱回流，進(jìn)行無水無氧縮醇反應(yīng)，得到表面氨基化的介孔二氧化硅微球MSNs-NH₂；

步驟2，將MSNs-NH₂與丁二酸酐、三乙胺加入到二甲基亞砜中，30～50℃下進(jìn)行反應(yīng)，得到羧基化的介孔二氧化硅微球MSNs-COOH；

步驟3，將MSNs-COOH與2-(2-丙炔氧基)乙醇、N，N-二異丙基碳二亞胺和4-二甲氨基吡啶加入到二甲亞砜中，35～45℃下反應(yīng)24～36h，得到炔基化的介孔二氧化硅微球MSNs-Alkyne；

步驟4，將2-O-單炔丙基-β-環(huán)糊精和1H-咪唑-1-磺酰疊氮溶于無水N,N-二甲基甲酰胺中，在亞磷酸三乙酯碘化亞銅催化下進(jìn)行點(diǎn)擊反應(yīng)，得到2-O-單{1-(1H-咪唑-1-磺酰)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-β-環(huán)糊精；

步驟5，在三苯基膦的催化下，將2-O-單{1-(1H-咪唑-1-磺酰)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-β-環(huán)糊精與碘加入到無水N,N-二甲基甲酰胺中，70～90℃下反應(yīng)18～20h，得到2-O-單{1-(1H-咪唑-1-磺酰)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-碘-6-脫氧-β-環(huán)糊精；

步驟6，將2-O-單{1-(1H-咪唑-1-磺酰)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-碘-6-脫氧-β-環(huán)糊精與疊氮化鈉溶于無水N,N-二甲基甲酰胺中，70～90℃攪拌反應(yīng)18～20h，得到2-O-單{1-(1H-咪唑-1-磺酰)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-疊氮-6-脫氧-β-環(huán)糊精；

步驟7，將2-O-單{1-(1H-咪唑-1-磺酰)-1H-[1,2,3]三唑-4-亞甲基}-七-6-疊氮-6-脫氧-β-環(huán)糊精、MSNs-Alkyne、無水硫酸銅和抗壞血酸鈉溶于N,N-二甲基甲酰胺中，產(chǎn)物用水洗后得到智能納米容器MSNs-CD；

步驟8，將真空干燥后的MSNs-CD分散在含有吸附分子的pH＝1的鹽酸溶液中，吸附結(jié)束后，調(diào)節(jié)pH至中性，得到酸性及脂肪酶雙重敏感納米容器。

優(yōu)選地，步驟1中，所述的介孔二氧化硅微球?yàn)镸CM-41。

優(yōu)選地，步驟1中，所述的介孔二氧化硅微球與硅烷偶聯(lián)劑的摩爾比為1:1～1.2:1。

優(yōu)選地，步驟8中，所述的吸附分子為羅丹明或吉西他濱。