[發明專利]雙特異性抗體及其制備方法與用途

有效

• 申請號: 201710599601.2
• 申請日: 2016-08-19
• 公開（公告）號: CN107759694B
• 公開（公告）日: 2023-01-13
• 發明（設計）人: 李強;李媛麗;陳思;王著;董炤;李子瑞;馬心魯;楊璐;高永娟;鄭云程;孫乃超
• 申請（專利權）人: 安源醫藥科技（上海）有限公司
• 主分類號: C07K16/46
• 分類號: C07K16/46;C12N15/85;A61K39/395;A61P35/00
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1.一種雙特異性抗體，其結構通式表示為K1-L-K2，所述雙特異性抗體包含完整雙鏈抗體K1、單鏈抗體K2以及連接肽L，且組成所述雙特異性抗體的各部分自N端至C端首尾依次相連，雙鏈抗體K1的重鏈通過連接肽L與單鏈抗體K2相連，其特征在于，所述連接肽L由柔性肽和剛性肽組成，所述連接肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示，所述完整雙鏈抗體K1重鏈的氨基酸序列如SEQ ID NO：18所示，其輕鏈的氨基酸序列如SEQ ID NO：19所示，且單鏈抗體K2的氨基酸序列如SEQ ID NO：20所示。

2.如權利要求1所述的雙特異性抗體在制備用于抑制腫瘤生長的藥物中的用途，其中所述腫瘤為淋巴瘤。

3.制備如權利要求1所述雙特異性抗體的方法，其特征在于，所述方法包括使所述完整雙鏈抗體K1和單鏈抗體K2通過所述連接肽L連接的步驟。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

(a)將編碼所述雙特異性抗體的完整雙鏈抗體K1和單鏈抗體K2的DNA序列通過連接肽L的DNA序列連接組成融合基因；

(b)將步驟(a)中獲得的融合基因引入DHFR酶缺陷型CHO宿主細胞；

(c)培養步驟(b)篩選到的高產量表達宿主細胞，表達雙特異性抗體；

(d)收獲步驟(c)得到的發酵液，并分離純化雙特異性抗體。