日韩在线一区二区三区,日本午夜一区二区三区,国产伦精品一区二区三区四区视频,欧美日韩在线观看视频一区二区三区 ,一区二区视频在线,国产精品18久久久久久首页狼,日本天堂在线观看视频,综合av一区

[發(fā)明專利]利用pspG基因缺失菌株通過發(fā)酵生產(chǎn)L?氨基酸的方法在審

專利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 201710598635.X 申請(qǐng)日: 2017-07-21
公開(公告)號(hào): CN107267567A 公開(公告)日: 2017-10-20
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 孫會(huì)剛;李同祥;崔玨;張傳麗;高兆建 申請(qǐng)(專利權(quán))人: 徐州工程學(xué)院
主分類號(hào): C12P13/04 分類號(hào): C12P13/04;C12P13/08;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19
代理公司: 南京瑞弘專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙)32249 代理人: 陳國(guó)強(qiáng)
地址: 221002 江蘇省徐州市泉山區(qū)南三環(huán)*** 國(guó)省代碼: 江蘇;32
權(quán)利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 利用 pspg 基因 缺失 菌株 通過 發(fā)酵 生產(chǎn) 氨基酸 方法
【說明書】:

技術(shù)領(lǐng)域

發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域,特別涉及一種通過發(fā)酵生產(chǎn)L-氨基酸的方法。

背景技術(shù)

在工業(yè)上,目前L-氨基酸的生產(chǎn)方法主要為生物發(fā)酵法,即通過具有L-氨基酸生產(chǎn)能力的各種微生物的發(fā)酵來生產(chǎn)L-氨基酸,因此具有L-氨基酸生產(chǎn)能力菌株的獲得是L氨基酸生產(chǎn)方法的核心。目前獲得L氨基酸生產(chǎn)菌株的方法主要有兩種,一種是通過對(duì)野生型微生物(野生型菌株)進(jìn)行誘變的方法,使其具有營(yíng)養(yǎng)缺陷,并使其對(duì)某些代謝物產(chǎn)生拮抗作用,從而獲得優(yōu)良的工業(yè)生產(chǎn)菌株。

近年來隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展,重組DNA技術(shù)已經(jīng)開始普遍應(yīng)用于微生物代謝工程改造方面,使其成為另外一種重要的獲得L-氨基酸生產(chǎn)菌株的方法。比如,通過提高目標(biāo)產(chǎn)品合成途徑中關(guān)鍵酶的表達(dá),來達(dá)到提高微生物L(fēng)-氨基酸生產(chǎn)能力(CN1305002A);再比如,通過提高目標(biāo)產(chǎn)品的分泌蛋白的表達(dá),來達(dá)到提高微生物L(fēng)-氨基酸生產(chǎn)能力(CN1260393A);或者,通過降低某些基因的表達(dá),來達(dá)到提高微生物L(fēng)-氨基酸生產(chǎn)能力(CN1607246A);在或者,通過敲除某些基因,使其失活,來達(dá)到提高微生物L(fēng)-氨基酸生產(chǎn)能力(CN1466630A)。

pspG的表達(dá)產(chǎn)物是一個(gè)內(nèi)膜蛋白,表達(dá)受到西格瑪(54)-RNA聚合酶的調(diào)控,并受到噬菌體休克蛋白PspF的激活作用和噬菌體休克蛋白PspA的抑制作用。相關(guān)研究表明其過表達(dá)會(huì)造成細(xì)胞的移動(dòng)性能變慢。目前,對(duì)于其對(duì)于L氨基酸合成是否有影響還沒有相關(guān)的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種利用pspG基因缺失菌株通過發(fā)酵生產(chǎn)L-氨基酸的方法,以提高L-氨基酸產(chǎn)量和轉(zhuǎn)化率。

為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案為:

一種利用pspG基因缺失菌株通過發(fā)酵生產(chǎn)L-氨基酸的方法,通過在培養(yǎng)基中培養(yǎng)屬于腸桿菌科,并具有L-氨基酸生產(chǎn)能力的細(xì)菌,該細(xì)菌于培養(yǎng)前進(jìn)行了修飾,使得pspG基因缺失,并從細(xì)菌的培養(yǎng)基或細(xì)胞收集L-氨基酸,來生產(chǎn)L-氨基酸。

進(jìn)一步的,采用pspG基因缺失的菌株ATCC21151ΔpspG,通過發(fā)酵的方法生產(chǎn)得到L-蘇氨酸。

所述pspG基因缺失的菌株ATCC21151ΔpspG通過下述方法構(gòu)建得到:

首先,制備菌株ATCC21151的感受態(tài)細(xì)胞;利用質(zhì)粒pKD46進(jìn)行轉(zhuǎn)化,獲得ATCC21151/pKD46菌株;然后,利用基因片段pspGknock1轉(zhuǎn)化ATCC21151/pKD46菌株的感受態(tài)細(xì)胞,獲得的轉(zhuǎn)化子利用引物pspG1-F/pspG1-R進(jìn)行驗(yàn)證,驗(yàn)證正確的菌株命名為ATCC21151ΔpspG::SacBCm;最后,利用基因片段pspGknock2轉(zhuǎn)化ATCC21151ΔpspG::SacBCm菌株的感受態(tài)細(xì)胞,獲得的轉(zhuǎn)化子利用引物pspG2-F/pspG2-R進(jìn)行驗(yàn)證,驗(yàn)證正確的菌株命名為ATCC21151ΔpspG,至此L-蘇氨酸生產(chǎn)所用的pspG基因缺失的菌株ATCC21151ΔpspG構(gòu)建完畢。

進(jìn)一步的,采用pspG基因缺失的菌株MG1655/pwsk-lysC*-dapA*ΔpspG,通過發(fā)酵的方法生產(chǎn)得到L-賴氨酸。

所述pspG基因缺失的菌株MG1655/pwsk-lysC*-dapA*ΔpspG通過下述方法構(gòu)建得到:

首先,制備菌株ATCC21151的感受態(tài)細(xì)胞;利用質(zhì)粒pKD46進(jìn)行轉(zhuǎn)化,獲得MG1655/pwsk-lysC*-dapA*(pKD46)菌株;然后,利用基因片段pspGknock2轉(zhuǎn)化MG1655/pwsk-lysC*-dapA*(pKD46)菌株的感受態(tài)細(xì)胞,獲得的轉(zhuǎn)化子利用引物pspG2-F/pspG2-R進(jìn)行驗(yàn)證,驗(yàn)證正確的菌株命名為MG1655/pwsk-lysC*-dapA*ΔpspG::SacBCm;最后,利用基因片段pspGknock2轉(zhuǎn)化MG1655/pwsk-lysC*-dapA*ΔpspG::SacBCm菌株的感受態(tài)細(xì)胞,獲得的轉(zhuǎn)化子利用引物pspG2-F/pspG2-R進(jìn)行驗(yàn)證,驗(yàn)證正確的菌株命名為MG1655/pwsk-lysC*-dapA*ΔpspG,至此L-賴氨酸生產(chǎn)所用的pspG基因缺失的菌株MG1655/pwsk-lysC*-dapA*ΔpspG構(gòu)建完畢。

所述菌株MG1655/pwsk-lysC*-dapA*通過下述方法構(gòu)建得到:

利用多片段重組的方法構(gòu)建以低拷貝質(zhì)粒pWSK29為出發(fā)載體,包含dapA基因表達(dá)框和lysC基因表達(dá)框的質(zhì)粒pwsk-lysC-dapA;

下載完整專利技術(shù)內(nèi)容需要扣除積分,VIP會(huì)員可以免費(fèi)下載。

該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息,商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于徐州工程學(xué)院,未經(jīng)徐州工程學(xué)院許可,擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購(gòu)買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作,請(qǐng)聯(lián)系【客服

本文鏈接:http://www.szxzyx.cn/pat/books/201710598635.X/2.html,轉(zhuǎn)載請(qǐng)聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。

×

專利文獻(xiàn)下載

說明:

1、專利原文基于中國(guó)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局專利說明書;

2、支持發(fā)明專利 、實(shí)用新型專利、外觀設(shè)計(jì)專利(升級(jí)中);

3、專利數(shù)據(jù)每周兩次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、內(nèi)容包括專利技術(shù)的結(jié)構(gòu)示意圖流程工藝圖技術(shù)構(gòu)造圖

5、已全新升級(jí)為極速版,下載速度顯著提升!歡迎使用!

請(qǐng)您登陸后,進(jìn)行下載,點(diǎn)擊【登陸】 【注冊(cè)】

關(guān)于我們 尋求報(bào)道 投稿須知 廣告合作 版權(quán)聲明 網(wǎng)站地圖 友情鏈接 企業(yè)標(biāo)識(shí) 聯(lián)系我們

鉆瓜專利網(wǎng)在線咨詢

周一至周五 9:00-18:00

咨詢?cè)诰€客服咨詢?cè)诰€客服
tel code back_top
主站蜘蛛池模板: 91一区二区三区在线| 国产精品无码专区在线观看| 91精品国产综合久久婷婷香| 国产日韩欧美在线影视| 日本精品一区二区三区在线观看视频 | 午夜影皖精品av在线播放| 夜夜爽av福利精品导航| 久久久久国产精品嫩草影院| 国产伦理久久精品久久久久| 国产精品色婷婷99久久精品| 青苹果av| 精品国产一区二区三| 窝窝午夜理伦免费影院| 91精品一区| 国产精品久久久久激情影院| 狠狠色噜噜狠狠狠四色米奇| 国产女人与拘做受免费视频| 日韩欧美高清一区二区| 68精品国产免费久久久久久婷婷 | 久爱精品视频在线播放| 97人人模人人爽人人喊小说| 99久久婷婷国产精品综合| 国产三级国产精品国产专区50| 国产欧美www| 97人人澡人人爽人人模亚洲| 国产精品日韩视频| 国产精品69久久久| 性精品18videosex欧美| 午夜情所理论片| 国产精品1区2区| 免费看欧美中韩毛片影院| 亚洲乱强伦| 国产精品一区二区人人爽| 欧美一级免费在线视频| 91偷拍网站| 欧美日韩中文国产一区发布| 午夜wwww| 少妇高潮一区二区三区99小说| 亚洲午夜精品一区二区三区电影院| 国产精品久久久久久亚洲调教| 97国产精品久久| 亚洲国产一区二| 午夜大片网| 国产一区二区黄| 日韩精品中文字幕一区| 一区二区欧美精品| 欧美大成色www永久网站婷| 午夜精品999| 久久国产这里只有精品| 在线精品国产一区二区三区88| 夜夜躁人人爽天天天天大学生| 日韩欧美一区二区久久婷婷| 国产欧美日韩中文字幕| 国产91麻豆视频| 99国产精品99久久久久| 欧美乱大交xxxxx古装| 综合在线一区| 日韩精品一区中文字幕| 日本精品一区二区三区在线观看视频| 男女午夜影院| 精品久久二区| 少妇中文字幕乱码亚洲影视| 久久一区二| 男女午夜影院| 日本一级中文字幕久久久久久| 久久久综合亚洲91久久98| 欧美日本三级少妇三级久久| 日本护士hd高潮护士| 亚洲精品国产一区二区三区| 99精品欧美一区二区三区美图| 欧美一区二区三区艳史| 国产suv精品一区二区4| 国产一区二区三级| 国产足控福利视频一区| 日韩av在线一区| 亚洲高清乱码午夜电影网| 国产欧美亚洲精品| 男女无遮挡xx00动态图120秒| 日韩精品免费一区二区中文字幕 | 精品久久久综合| 欧美一区二区三区久久久久久桃花| 6080日韩午夜伦伦午夜伦| 亚洲乱亚洲乱妇28p| 91看黄网站| 国产精品视频久久| 色婷婷精品久久二区二区6| 免费视频拗女稀缺一区二区| 国产二区三区视频| 国产精品亚洲а∨天堂123bt| 欧美一区二区三区免费视频| 亚洲区在线| 99精品视频免费看| xoxoxo亚洲国产精品| 91精品一区在线观看| 欧美一区二区三区不卡视频| 国产国产精品久久久久| 中文字幕一区二区三区乱码| 国产在线播放一区二区| 91精品婷婷国产综合久久竹菊 | 日韩欧美高清一区二区| 国产欧美二区| 丰满岳乱妇在线观看中字| 日韩一区二区三区福利视频| 精品国产一区二| 欧美日韩国产123| 亚洲精品性| 97人人揉人人捏人人添| 国产精品二区一区| 中文字幕二区在线观看| 国产欧美一区二区在线| 亚洲欧美一区二区三区1000 | 国产精品亚州| 国产一区二区精品在线| freexxxx性| **毛片免费| 欧美日韩中文不卡| 中文字幕一二三四五区| 国产欧美一区二区三区在线看 | 26uuu色噜噜精品一区二区| 久久精品国产亚洲一区二区| 国产福利一区在线观看| 玖玖国产精品视频| 综合色婷婷一区二区亚洲欧美国产| 欧美精品国产精品| 日本高清二区| 国产精品久久久久久久久久不蜜臀| 精品国产一区二| 国产一区二区精华| 日韩三区三区一区区欧69国产| 亚洲乱玛2021| 强制中出し~大桥未久在线播放| 国产毛片精品一区二区| 少妇厨房与子伦免费观看| 国产精品无码专区在线观看| 亚洲自拍偷拍一区二区三区| 午夜av免费观看| 黑人巨大精品欧美黑寡妇| 欧美hdfree性xxxx| 国产精品一区一区三区| 欧美乱战大交xxxxx| 97久久精品人人做人人爽| 欧美日韩久久一区| 午夜影院一区| 日本一区二区高清| 日本看片一区二区三区高清| 国产欧美一区二区三区视频| 野花社区不卡一卡二| 天堂av一区二区三区| 欧美一区二区三区不卡视频| 高清国产一区二区| 国产精品高潮呻吟视频| 欧美一区二区三区在线免费观看| 国产免费一区二区三区网站免费 | 91精品国产91热久久久做人人| 国产麻豆91视频| 欧美日韩一区电影| 黑人巨大精品欧美黑寡妇| 国产天堂一区二区三区| 狠狠躁日日躁狂躁夜夜躁av | 日韩精品中文字| 亚洲国产欧美一区二区三区丁香婷 | 午夜影院你懂的| 国产精品日韩一区二区| 国内少妇偷人精品视频免费| 亚洲美女在线一区| 四虎国产精品永久在线国在线| 欧美资源一区| 欧美午夜精品一区二区三区| 久久精品com| 日韩一区二区精品| 色综合欧美亚洲国产| 久久久精品99久久精品36亚| 91黄在线看| 97欧美精品| 丰满岳乱妇在线观看中字| 性夜影院在线观看| 久久国产精品网站| 久久国产欧美一区二区免费| 999亚洲国产精| 午夜国内精品a一区二区桃色| 国产一区二区播放| 国产精品6699| 国产一区二区视频免费在线观看| 久久精品国语| 欧美精品在线不卡| 99国产精品| 综合国产一区| 国产女人和拘做受在线视频| 在线亚洲精品| 国内久久精品视频| 精品亚洲午夜久久久久91| 国产日韩欧美不卡| 久久人人97超碰婷婷开心情五月| 99久久国产综合精品麻豆| 日本丰满岳妇伦3在线观看| 香蕉久久国产| 国产午夜一级片| 99re热精品视频国产免费| 国产在线视频二区| 99久久免费精品视频| 国产欧美亚洲一区二区| 91视频一区二区三区| 国产精品欧美一区乱破| 91精品免费观看| 销魂美女一区二区| 亚洲码在线| 91香蕉一区二区三区在线观看| 国产激情视频一区二区| 欧美精选一区二区三区| 人人澡超碰碰97碰碰碰| 亚洲精品一区二区另类图片| 日韩精品免费播放| 午夜片在线| 91麻豆精品一区二区三区| 国产精品精品视频一区二区三区 | 性生交片免费看片| 小萝莉av| 色噜噜狠狠色综合影视| 国产一级片一区| 91久久一区二区| 91亚洲精品国偷拍| 国产欧美一区二区三区不卡高清| 久久免费精品国产| 国产无套精品久久久久久| 国产日韩欧美亚洲综合| 精品一区二区三区中文字幕| 久久精品国产亚| 91麻豆精品国产91久久| 久久国产精品视频一区| 狠狠色噜噜狠狠狠狠2021天天| 亚洲无人区码一码二码三码| 中文字幕日本精品一区二区三区| 亚洲一区二区福利视频| 少妇性色午夜淫片aaa播放5| 一本一道久久a久久精品综合蜜臀 国产三级在线视频一区二区三区 日韩欧美中文字幕一区 | 国产欧美一区二区三区视频| 国产一区二区二| 狠狠色丁香久久婷婷综| 97视频一区| 久久五月精品| 国产激情二区| 6080日韩午夜伦伦午夜伦| 国产精品女同一区二区免费站| 妖精视频一区二区三区| 亚洲乱码一区二区三区三上悠亚 | 91视频国产一区|