[發明專利]一種應用植物膠瓊脂固化而快速簡便檢測毒性物質的方法

有效

• 申請號: 201710595975.7
• 申請日: 2017-07-20
• 公開（公告）號: CN109283210B
• 公開（公告）日: 2021-02-09
• 發明（設計）人: 郭俊成
• 申請（專利權）人: 郭俊成
• 主分類號: G01N25/06
• 分類號: G01N25/06
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所(普通合伙) 11308
• 代理人: 葉凡

本發明是有關于一種快速檢測毒性的方法，包括準備一植物膠瓊脂及一樣品；混合瓊脂與樣品以形成混合物；以及測定混合物的凝固時間，進而確認樣品的細胞毒性。

技術領域

本發明是有關于一種快速檢測毒性的方法，尤其是指一種通過植物膠瓊脂凝固時間測定樣品是否具有毒性的方法，其可降低使用動物或細胞實驗，不僅達到保護動物的目的，亦可降低藥物、食品或化妝品的毒性測試的成本。

背景技術

依現有國內、國外法規規定，舉凡健康食品、新原料、含藥的化妝品、醫療器材及醫藥品，基于人體的安全性，須依據產品原料的不同進行不同的毒理學評估，包含如急性毒性實驗、眼睛刺激實驗、皮膚刺激實驗等，前述實驗不僅需支出大量費用進行動物實驗，同時也要犧牲許多動物的寶貴生命。

再者，歐盟已從2009年3月起禁止利用動物進行化妝品的測試，并且歐盟化妝品銷售的法規從2013年起更規定禁止販賣以利用動物作為毒性安全實驗的化妝品，因此各大化妝品公司及學術單位都積極地投入非動物型妝品毒性的安全檢測方法，而目前已發展的方法，主要是以細胞毒性檢測作為化妝品安全的指標。

前述以細胞毒性作為化妝品檢驗指標，雖已避免以動物做為化妝品毒性安全實驗目標的缺失，然而培養細胞仍需使用大量的血清，同時也要消耗大量時間觀察毒性測試結果。對一般廠商而言，仍有研發成本高，制造成本大幅提升的劣勢。

據此，如何發展出一套簡易快速的毒性測試方法，以減少動物及細胞毒性試驗，解決現有技術的缺失，實為相關技術領域者目前所迫切需要解決的問題。

發明內容

一般而言，凝膠化(gelation)是指大分子鏈的支鏈透過逐漸增大的支鏈形成非液態膠狀物，其過程取決于起始材料的結構和構象。而這樣的聚合物材料因具多分枝水溶性支鏈所以被稱為“溶膠(sol)”。凝膠化的鏈接過程中會伴隨著分支聚合物的尺寸逐漸增加與溶解度下降，這樣的“無限的聚合”的結構被稱為“膠(gel)”或“網絡(network)”。而從有限的支鏈聚合物轉化為無限的聚合結構的轉變被稱為“溶膠-凝膠(sol-gel)轉變”(或“凝膠化”)。不同類型的凝膠化機制的發生可通過物理鏈接(物理膠凝)或通過化學連接(化學凝膠化)產生。其中物理性水膠形成是藉由分子間的靜電力(離子性作用)、氫鍵及疏水性相互作用產生，具有像變化(可逆性)的特性。

有鑒于此，本發明提供一種應用植物膠固化而快速簡便檢測毒性物質的方法，是一種通過測定膠體凝固時間長短以測定樣品是否影響化學鍵結的方法，進一步得知樣品是否具有生物毒性。藉此，可避免動物或細胞實驗的使用量，不僅達到保護動物的目的，亦可降低藥物、食品或化妝品于毒性測試的成本

因此，本發明一種應用植物膠固化而快速簡便檢測毒性物質的方法，其包括步驟一(S101)：準備植物凝膠材料及待檢測樣品，其中植物凝膠濃度可例如為1％～6％；步驟二(S102)：混合植物凝膠材料以及樣品，以形成混合物；以及步驟三(S103)：測定混合物的凝固時間，以測定樣品所引起的生物毒性及刺激性，進而導致生物體組織結構傷害。

所述「刺激性」的定義為造成細胞膜、細胞質、細胞器產生劇烈變化而導致細胞崩解、壞死，這種崩解壞死通常又以外來物質而造成的整體細胞結構的破壞有關，例如與組成細胞化學成分的結構破壞有關。

于本發明實施例中，植物凝膠材料是選自瓊脂(agar)。

較佳地，于本發明之一的實施例中，樣品可例如為藥物、食品或化妝品。

換句話說，因生命的基本單位是細胞，而細胞中含有種種生命分子系經各種化學鍵結組成，故藉由觀察化學鍵結破壞程度來取代觀察生命分子瓦解受傷的程度亦可當作一種毒性判斷的指標

藉此，本發明的方法可快速檢測樣品是否為影響細胞或生物體的毒性物質，即使是不易穿過細胞膜的毒性物質或需長期觀察才可以偵測到的細胞毒性，皆能在極短時間內觀察出來。再者，本發明的方法不需使用細胞或動物實驗，故可大幅降低毒性測試的成本。