[發(fā)明專利]一種茶葉中外源摻雜蔗糖的抗干擾快速檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710595014.6
• 申請日: 2017-07-20
• 公開（公告）號: CN107589081B
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郝振霞;金莉莉;劉新;魯成銀
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/78
• 代理公司: 浙江千克知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33246
• 代理人: 王曉普

1.一種茶葉中外源摻雜蔗糖的抗干擾快速檢測方法，其特征在于所述方法為：

(1)待測茶葉樣品用水提取或沖泡，除去茶葉渣得到待測茶湯樣品；

(2)抗干擾處理：將待測茶湯樣品中加入吸附劑，混勻后常溫下反應(yīng)或水浴加熱3～30min，離心，取上清液作為待測樣品溶液；

(3)待測樣品溶液利用間苯二酚顯色試劑進(jìn)行定性判定或定量檢測；所述吸附劑為交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮與活性炭質(zhì)量比1:0.1～0.5的混合；吸附劑的加入量是以待測茶湯樣品的體積計(jì)為10～50mg/mL。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述吸附劑為交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮與活性炭質(zhì)量比1:0.2的混合。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，待測茶湯樣品按以下三種方案之一制備：

(1-A)對于單純定性判定，將待測茶葉樣品，按照茶、水的質(zhì)量比為1：20～100加入沸水沖泡2～10min，瀝出茶湯作為待測茶湯樣品，然后進(jìn)行步驟(2)的抗干擾處理和步驟(3)的定性判定；

(1-B)對于定量檢測，準(zhǔn)確稱取待測茶葉樣品，按照茶、水的質(zhì)量比為1:10～50，加入煮沸的去離子水，超聲提取2次，每次超聲提取5～10min，合并濾液，定容后得到待測樣品溶液，然后進(jìn)行步驟(2)的抗干擾處理和步驟(3)的定量檢測；

(1-C)對于既要定性判定又需進(jìn)一步定量檢測的樣品，或需先行定性判定根據(jù)定性判定結(jié)果決定是否需定量檢測的樣品，優(yōu)先選用(1-B)方法制備待測茶湯樣品。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(2)中，待測茶湯樣品中加入吸附劑后，50℃水浴，加熱10min，然后離心、取上清液作為待測樣品溶液。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(3)中，定性判定的步驟為：

(3-A1)配制顯色試劑：將間苯二酚溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)7～25％的鹽酸，配成間苯二酚濃度0.1～2.0g/L的溶液；

(3-A2)定性判定：取兩只試管，分別為試管a、b，分別加入等體積的顯色試劑，然后取相同體積的去離子水和待測樣品溶液分別加入試管a、b，去離子水或待測茶湯樣品與顯色試劑的體積比為1：5～50，然后將兩試管同時(shí)浸入開水浴中，反應(yīng)2～10min后取出試管，用水沖洗冷卻后對比兩試管內(nèi)液體顏色，以試管a顏色為參照，若試管b內(nèi)出現(xiàn)明顯紅色，則判定為陽性，即所測茶葉中摻雜了蔗糖；

若試管b內(nèi)未出現(xiàn)明顯紅色，則判定為陰性，茶葉中未添加蔗糖。

6.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述步驟(3)中，定量檢測的步驟為：

(3-B1)配制顯色試劑：間苯二酚溶于質(zhì)量分?jǐn)?shù)7～25％的鹽酸，配成間苯二酚濃度0.1～2.0g/L的溶液；

(3-B2)配制蔗糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：以去離子水溶解分析純蔗糖樣品，分別配制3種以上不同濃度的蔗糖水溶液作為標(biāo)準(zhǔn)溶液，蔗糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度范圍0.01～5g/L；

(3-B3)繪制工作曲線：根據(jù)前述所配制蔗糖標(biāo)準(zhǔn)溶液個(gè)數(shù)取相應(yīng)數(shù)量的試管，編號記錄；分別將去離子水以及蔗糖標(biāo)準(zhǔn)溶液與顯色試劑按照體積比1：10～100加入對應(yīng)編號的試管，并分別混合搖勻，80～100℃水浴加熱1～10min后取出，立即用水沖洗冷卻至室溫，在400～500nm波長條件下，以前述去離子水所在試管溶液為參比溶液，使用分光光度計(jì)測定各試管中蔗糖溶液的吸光度；然后以蔗糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)、相應(yīng)的吸光度數(shù)值為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線并擬和得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程；

(3-B4)實(shí)際樣品測定：按照待測樣品數(shù)量，取相應(yīng)數(shù)量的試管并編號記錄，試管中分別加入相應(yīng)樣品編號的、與步驟(3-B3)中試管中蔗糖標(biāo)準(zhǔn)溶液相同體積的待測樣品溶液，并加入與步驟(3-B3)中各試管中相同體積的顯色試劑，混勻后按照步驟(3-B3)相同的方法水浴加熱、分光光度計(jì)檢測，仍以步驟(3-B3)所用參比溶液作為此次檢測的參比溶液，使用分光光度計(jì)測定各試管中溶液的吸光度，然后根據(jù)步驟(3-B3)的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，換算得到相應(yīng)待測樣品溶液中的蔗糖濃度，并結(jié)合前述前處理步驟中的樣品質(zhì)量和定容后的提取液體積關(guān)系，計(jì)算得到相應(yīng)待測茶葉中摻雜蔗糖的含量。