[發明專利]MON1B在診斷兒童I型糖尿病中的新用途

在審

• 申請號: 201710592868.9
• 申請日: 2017-07-19
• 公開（公告）號: CN107164552A
• 公開（公告）日: 2017-09-15
• 發明（設計）人: 孫錦云;石小峰
• 申請（專利權）人: 北京泱深生物信息技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，涉及用于診斷兒童I型糖尿病的分子標志物。

背景技術

I型糖尿病(T1DM)為在遺傳基礎上由環境因素激發的、自身免疫介導的以胰腺β細胞受損為特征的自身免疫性疾病，是一種由于胰島素缺乏或作用不足引起的能量代謝疾病。通常在兒童、少年、青年時期被診斷，發病風險最高的年齡段是10-14歲，青少年以后，發病率下降。兒童I型糖尿病以往多指小于15歲發生的糖尿病，由于WHO(世界衛生組織)已經兒童定義為0-18歲，因此兒童糖尿病應指小于18歲發生的糖尿病。兒童1型糖尿病的臨床表現為多尿、多飲、多食及消瘦。兒童1型糖尿病比成人糖尿病重，起病較急，不易早期發現，胰島β細胞的功能可出現明顯下降甚至發展為衰竭，早期并發癥即可出現，如糖尿病酮癥甚至酸中毒，如處理不及時或不當，可能危及生命。I型糖尿病確切發病機制尚未完全闡明，目前認為是遺傳、免疫和環境因素共同作用所致。

高通量測序技術(High-throughput sequencing)是指能夠一次并行對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定，每一次序列測定的讀長一般較短的測序技術。高通量測序技術是對傳統測序一次革命性變革，隨著2005年羅氏的454測序儀及2006年Solexa測序儀出現后飛速發展，2009年左右高通量測序技術在國內興起。高通量測序類型分為多種，基因芯片、基因深度測序(genome re-sequencing)、轉錄組深度測序(transcriptome re-sequencing又稱RNA-Seq)等。

細胞的功能是從基因的表達開始的，轉錄組是指某一時間細胞內所有基因轉錄而來的RNA總稱。通過高通量測序技術可獲得基因表達的RNA水平有關信息，可以揭示基因表達與一些生命現象之間的內在聯系。

高通量測序技術的快速發展和應用，為兒童I型糖尿病發病機理的研究提供了更加全面和快速的分析手段，也為兒童I型糖尿病的進一步治療方案提供嶄新思路。深入研究兒童I型糖尿病相關基因的調控機制，有助于了解兒童I型糖尿病的遺傳分子機制，為尋找新的藥物提供理論依據。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于診斷兒童I型糖尿病或者預測兒童I型糖尿病預后的基因標志物。本發明利用芯片和QPCR實驗證明了MON1B基因在兒童I型糖尿病患者的血液中的表達水平顯著高于正常兒童，因此可將MON1B基因作為診斷兒童I型糖尿病或者預測兒童I型糖尿病預后的基因標志物。

根據本發明的一個方面，本發明提供了檢測MON1B基因表達的試劑在制備兒童I型糖尿病輔助診斷或預測預后產品中的應用。

進一步，所述試劑包括檢測MON1B基因mRNA表達水平的試劑，和/或檢測MON1B蛋白表達水平的試劑。

檢測MON1B基因mRNA表達水平的試劑是如PCR、如Southern雜交、Northern雜交、點雜交、熒光原位雜交(FISH)、DNA微陣列、ASO法、高通量測序平臺等定性地、定量地、或半定量地檢測基因mRNA表達水平的方法中使用的任何試劑。

進一步，所述檢測MON1B基因mRNA表達水平的試劑包括QPCR中使用的引物，和/或探針。

在本發明的具體實施方案中，所述檢測MON1B基因mRNA表達水平的試劑包括QPCR中使用的引物，所述引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

上面所述的引物可以通過化學合成來制備，使用本領域技術人員知道的方法參考已知信息來適當地設計，并通過化學合成來制備。

前面所述的探針可以通過化學合成來制備，通過使用本領域技術人員知道的方法參考已知信息來恰當設計，并通過化學合成來制備，或者可以通過從生物材料制備含有期望核酸序列的基因，并使用設計用于擴增期望核酸序列的引物擴增它來制備。

檢測MON1B蛋白表達水平的試劑是如ELISA、放射免疫測定法、免疫組織化學法、Western印跡等能夠檢測蛋白表達水平的方法中使用的任何試劑。

本發明可用于檢測MON1B蛋白表達水平的試劑包括針對MON1B蛋白的抗體，所述抗體可以是單克隆抗體、多克隆抗體、多特異性抗體(例如雙特異性抗體)。

前面所述的本發明的所述產品檢測的樣本不受特別限制，只要它適于本發明的測定；例如，它可以包括組織、血液、血漿、血清、淋巴液、尿液、漿膜腔液、脊髓液、滑液、房水、淚液、唾液、或其級分或經過處理的材料。在本發明的具體實施方案中，所述樣本來自受試者的血液。