[發明專利]心肌梗死診斷標志物組合物

在審

• 申請號: 201710592045.6
• 申請日: 2017-07-19
• 公開（公告）號: CN107312852A
• 公開（公告）日: 2017-11-03
• 發明（設計）人: 李曙光;孫錦云
• 申請（專利權）人: 北京泱深生物信息技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及疾病診斷領域，具體涉及心肌梗死診斷標志物組合物，更具體的涉及miR-1468-5p和miR-892b作為分子標志物組合物在制備心肌梗死診斷試劑中的應用。

背景技術

急性心肌梗死(AMI)是最嚴重的一種心血管疾病，早期、準確的診斷可以保證再灌注治療的立即開始可能減少死亡率。一些生物標志物如心肌肌鈣蛋白I已應用與診斷AMI，可提高目前診斷，為急性心肌梗死的新方法。然而，miRNA在急性心肌梗死的表達和可能的作用是研究較少，以往的研究表明miR-30a是與心肌肥厚相關，miR-195的靶基因調節細胞凋亡，細胞增殖和細胞周期，他們可作為診斷急性心肌梗死生物標志物的潛在臨床價值，但是這些還遠遠不夠，臨床的精準診斷和治療需要更多候選分子標志物。

現有研究顯示miR-1468和膠質瘤顯著相關(MicroRNA-1468-5p inhibits glioma cell proliferation and induces cell cycle arrest by targeting RRM1，Am J Cancer Res.2017，7(4))，miR-892b和乳腺癌相關(miR-892b Silencing Activates NF-κB and Promotes Aggressiveness in Breast Cancer，Molecular and Cellular Pathobiology，March 2016)。本發明基于高通量測序方法，獲得心肌梗死miRNA的表達數據，同時，結合GEO數據庫中心肌梗死相關miRNA數據，進行生物信息學分析驗證，從候選的miRNA中挑選出miR-1468-5p和miR-892b進行分子生物學驗證，結果顯示，miR-1468-5p和miR-892b與心肌梗死密切相關。可單獨或合并用于心肌梗死的臨床診斷及預防檢測，為臨床上相關診斷試劑研發奠定基礎。

發明內容

檢測miRNA的制劑在制備診斷心肌梗死試劑中的應用，所述miRNA選自下列中的一種或幾種：miR-1468-5p、miR-892b。

所述miR-1468-5p的序列見序列表SEQ ID NO 1。

所述miR-892b的序列見序列表SEQ ID NO 2。

優選的，聯合檢測miR-1468-5p和miR-892b的制劑在制備診斷心肌梗死試劑中的應用。

進一步，診斷心肌梗死試劑包括基于高通量測序方法和/或基于定量PCR方法和/或基于探針雜交方法檢測樣本中miR-1468-5p和/或miR-892b。

優選采用northern雜交方法、miRNA表達譜芯片、核酶保護分析技術、RAKE法、原位雜交、基于微球的流式細胞術檢測樣本中miR-1468-5p和/或miR-892b的轉錄。

所述的樣本為外周血。

進一步，樣本中miR-1468-5p和/或miR-892b高表達顯示患心肌梗死風險增加。

優選的，基于定量PCR方法包括特異性擴增miR-1468-5p和/或miR-892b的引物，進一步優選，特異性擴增miR-1468-5p的引物序列為SEQ ID NO 3，特異性擴增miR-1468-5p的引物序列為SEQ ID NO 4；基于探針雜交方法包括與miR-1468-5p和/或miR-892b的核酸序列雜交的探針。

進一步，所述miRNA為miR-1468-5p和/或miR-892b的前體，前體序列為SEQ ID NO 5和SEQ ID NO 6。

本發明的目的在于提供下調miR-1468-5p和/或miR-892b的轉錄和/或抑制miR-1468-5p和/或miR-892b的活性的試劑在制備防治心肌梗死制劑中的應用。

優選的，采用反義寡核苷酸、antagomiRs、miRNA海綿、miRNA Erasers、Target Masking和/或多靶點反義寡核苷酸的方法下調miR-1468-5p和/或miR-892b的轉錄和/或阻斷miR-1468-5p和/或miR-892b的活性。

本發明的目的在于提供檢測miR-1468-5p和/或miR-892b的靶基因制劑在制備診斷心肌梗死制劑中的應用。

所述靶基因為DIANA-MICROT、MICRORNA.ORG、MIRDB、RNA22-HAS、TARGETMINER、TARGETSCAN-VERT數據庫表明miR-1468-5p和/或miR-892b的靶基因。

定義：