[發明專利]一種基于CD10的嵌合抗原受體及其應用

有效

• 申請號: 201710587264.5
• 申請日: 2017-07-18
• 公開（公告）號: CN107245106B
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發明（設計）人: 李俊芳;何晉元
• 申請（專利權）人: 深圳市免疫基因治療研究院
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N7/01;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

本發明涉及一種基于CD10的嵌合抗原受體及其應用，具體為以腫瘤特異靶點CD10為基礎的嵌合抗原受體T(CAR?T)細胞技術的構建方法及其在抗腫瘤治療中的應用，所述嵌合抗原受體包括抗原結合結構域、跨膜結構域、共刺激信號傳導區和CD3ζ信號傳導結構域串聯而成；其中，所述抗原結合結構域結合腫瘤表面抗原，所述腫瘤表面抗原為CD10。本發明的嵌合抗原受體通過對所述針對腫瘤表面抗原CD10的單鏈抗體進行特定的基因改造，改造后的抗體能夠使抗原?抗體結合力更強，不容易發生突變，且相比于其他嵌合抗原受體和其他腫瘤抗原有更好的效果，靶點的表達量高，使得CAR?T細胞的免疫效果增強，增強了CAR?T細胞的治療效果。

技術領域

本發明涉及腫瘤的細胞免疫治療領域，尤其涉及一種基于CD10的嵌合抗原受體及其應用，具體為以腫瘤特異靶點CD10為基礎的嵌合抗原受體T(CAR-T)細胞技術的構建方法及其在抗腫瘤治療中的應用。

背景技術

隨著腫瘤免疫學理論和臨床技術的發展，嵌合抗原受體T細胞療法(Chimericantigen receptor T-cell immunotherapy，CAR-T)成為目前最有發展前景的腫瘤免疫療法之一。一般，嵌合抗原受體CAR由一個腫瘤相關抗原結合區、胞外鉸鏈區、跨膜區域以及胞內信號轉導區組成。通常，CAR包含抗體的單鏈片段可變(Single chain fragmentvariable，scFv)區或對腫瘤相關抗原(tumor associated antigen,TAA)具有特異性的結合結構域，其通過鉸鏈和跨膜區與T細胞信號傳導分子的胞質結構域偶聯。最常見的淋巴細胞活化部分包括與T細胞效應物功能觸發(例如CD3ζ)部分串聯的T細胞共刺激結構域。CAR介導的過繼性免疫療法允許CAR-移植的T細胞以非HLA限制性方式直接識別靶腫瘤細胞上的TAA。

大多數患有B細胞惡性腫瘤(包括B細胞急性淋巴細胞性白血病(B cell acutelymphocytic leukemia,leukemia,B-ALL)和慢性淋巴細胞性白血病(chroniclymphocytic leukemia,CLL))的患者將由于其疾病而死亡。治療這些患者的一種方法是通過CAR的表達，對T細胞進行遺傳修飾以靶向在腫瘤細胞上表達的抗原。CAR是經設計以人白細胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)非依賴性方式識別細胞表面抗原的抗原受體。嘗試使用表達CAR的遺傳修飾細胞來治療這些類型的患者已經取得了有前景的成功。

CD19分子是治療B淋巴細胞系腫瘤潛在的靶點，也是CAR研究中的熱點，CD19的表達局限于正常和惡性B細胞，是廣泛接受的用來安全測試的CAR靶標。靶向CD19分子的嵌合抗原受體基因修飾的T細胞(CD19 CAR-T)在治療多發性、難治性的急性B淋巴細胞白血病上取得巨大成功，而在難治性、復發性慢性B淋巴細胞白血病和B淋巴細胞系淋巴瘤的治療中療效明顯較差。

CN 104788573 A公開了了一種嵌合抗原受體hCD19scFv-CD8α-CD28-CD3ζ及其用途，該嵌合抗原受體由抗人CD19單克隆抗體HI19a輕鏈和重鏈可變區(hCD19scFv)、人CD8α鉸鏈區、人CD28跨膜區和胞內區、以及人CD3ζ胞內區結構串聯構成，該專利中的CD19在進行一次CAR-T細胞回輸后，CD19的表達量會降低，容易逃過免疫機制。

因此，制備一種嵌合抗原受體能夠解決CD19存在的易突變和表達量降低的問題顯得尤為重要。

發明內容

針對目前CAR-T技術治療腫瘤中靶向不十分理想，以及腫瘤微環境影響CAR-T技術治療效果的情況，本發明提供一種基于CD10的嵌合抗原受體及其應用，本發明制備的嵌合抗原受體通過將CD10靶點進行基因改造，從而提高了靶點的免疫效果，增強了CAR-T細胞的治療效果。

為達此目的，本發明采用以下技術方案：