[發(fā)明專利]一種聯(lián)合檢測(cè)石油污水中硫酸鹽還原菌和硝酸鹽還原菌的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710585695.8
• 申請(qǐng)日: 2017-07-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107130012B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-11-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 于亮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津億利科能源科技發(fā)展股份有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/06
• 分類號(hào): C12Q1/06
• 代理公司: 天津市尚文知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12222
• 代理人: 王曉明

本發(fā)明屬于細(xì)菌檢測(cè)領(lǐng)域，涉及聯(lián)合檢測(cè)石油污水中硫酸鹽還原菌和硝酸鹽還原菌的方法，包括以下步驟：（1）對(duì)采集的石油污水水樣進(jìn)行濃度梯度稀釋；（2）將稀釋后的石油污水樣置于檢測(cè)瓶?jī)?nèi)恒溫培養(yǎng)后，分別對(duì)硫酸鹽還原菌和硝酸鹽還原菌進(jìn)行計(jì)數(shù)檢測(cè)；培養(yǎng)液成分為：乳酸鈉、酵母粉、氯化鈉、磷酸二氫鉀/磷酸氫二鉀、氯化銨、硝酸鉀/鈉、硫酸鎂、抗壞血酸、乙二胺四乙酸、谷胱甘肽；本發(fā)明的聯(lián)合檢測(cè)石油污水中硫酸鹽還原菌和硝酸鹽還原菌的方法，解決現(xiàn)有SRB和NRB細(xì)菌計(jì)數(shù)檢測(cè)技術(shù)的局限性、適用范圍小、操作復(fù)雜等問(wèn)題，該方法可以準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單、快速地進(jìn)行SRB和NRB細(xì)菌計(jì)數(shù)檢測(cè)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于細(xì)菌檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種聯(lián)合檢測(cè)石油污水中硫酸鹽還原菌和硝酸鹽還原菌的方法。

背景技術(shù)

硫酸鹽還原菌(SRB)是利用污水中的硫酸鹽或者其它氧化態(tài)硫化物作為電子受體來(lái)異化有機(jī)物質(zhì)的微生物，它將SO₄^2-還原成H₂S，進(jìn)而改變水質(zhì)的pH和金屬的腐蝕狀態(tài)，使金屬腐蝕速度顯著增加的重要因素，對(duì)石油管道帶來(lái)腐蝕、堵塞等諸多有害作用。

硝酸鹽還原菌(NRB)是存在于石油污水系統(tǒng)中具有競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)的拮抗菌，在生活習(xí)性、生長(zhǎng)環(huán)境等方面與SRB非常相似，但不產(chǎn)生H₂S及其它有害物質(zhì)。因此，可以應(yīng)用NRB通過(guò)生物競(jìng)爭(zhēng)抑制(Bio-Competitive Exclusion，BCX)作用達(dá)到抑制SRB生長(zhǎng)繁殖及其腐蝕金屬管道的目的。

目前，只有單一的檢測(cè)SRB或NRB的細(xì)菌計(jì)數(shù)檢測(cè)瓶，不便于細(xì)菌檢測(cè)工作的大量展開(kāi)。同時(shí)，對(duì)這兩種細(xì)菌的檢測(cè)分別進(jìn)行，不能指導(dǎo)現(xiàn)場(chǎng)對(duì)于兩種細(xì)菌菌群結(jié)構(gòu)的研究和分析。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種聯(lián)合檢測(cè)石油污水中硫酸鹽還原菌和硝酸鹽還原菌的方法。本發(fā)明的聯(lián)合檢測(cè)石油污水中硫酸鹽還原菌和硝酸鹽還原菌的方法，解決現(xiàn)有SRB和NRB細(xì)菌計(jì)數(shù)檢測(cè)技術(shù)的局限性、適用范圍小、操作復(fù)雜等問(wèn)題，該方法可以準(zhǔn)確、簡(jiǎn)單、快速地進(jìn)行SRB和NRB細(xì)菌計(jì)數(shù)檢測(cè)。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種聯(lián)合檢測(cè)石油污水中硫酸鹽還原菌和硝酸鹽還原菌的方法，包括以下步驟：

(1)對(duì)采集的石油污水水樣進(jìn)行濃度梯度稀釋；

(2)將步驟(1)中稀釋后的石油污水水樣置于檢測(cè)瓶?jī)?nèi)恒溫培養(yǎng)7～14天后，分別對(duì)硫酸鹽還原菌和硝酸鹽還原菌進(jìn)行計(jì)數(shù)檢測(cè)；

恒溫培養(yǎng)時(shí)采用的聯(lián)合培養(yǎng)液成分為：乳酸鈉2～10g/L、酵母粉0.1～1g/L、氯化鈉3～8g/L、磷酸二氫鉀/磷酸氫二鉀0.2～0.8g/L、氯化銨0.1～0.8g/L、硝酸鉀/鈉0.5～5g/L、硫酸鎂0.5～3g/L、抗壞血酸0.05～0.5g/L、乙二胺四乙酸0.05～0.1g/L、谷胱甘肽0.01～0.05g/L；

恒溫培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為石油污水采樣點(diǎn)的水樣所處流程環(huán)境溫度；

計(jì)數(shù)檢測(cè)時(shí)參照SY/T 0532-2012《油田注入水細(xì)菌分析方法絕跡稀釋法》分別對(duì)硫酸鹽還原菌和硝酸鹽還原菌進(jìn)行計(jì)數(shù)檢測(cè)。

作為優(yōu)選的技術(shù)方案：

優(yōu)選的，采用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH值為7～8，所述pH調(diào)節(jié)劑為摩爾濃度為0.05～0.5mol/L氫氧化鈉水溶液。

優(yōu)選的，采用亞鐵鹽溶液對(duì)硫酸鹽還原菌進(jìn)行計(jì)數(shù)檢測(cè)，所述亞鐵鹽溶液中亞鐵離子的質(zhì)量濃度為0.01～1％。

優(yōu)選的，硝酸鹽還原菌的檢測(cè)液分為硝酸根檢測(cè)液和亞硝酸根檢測(cè)液。

優(yōu)選的，采用二苯胺試劑對(duì)硝酸鹽還原菌中的硝酸根進(jìn)行計(jì)數(shù)檢測(cè)；所述二苯胺試劑的體積濃度為0.5％；所述二苯胺試劑的溶劑為濃硫酸；