[發明專利]一種灰毛豆內生真菌發酵制備(R)-4-芐基-2-噁唑烷酮化合物的方法

有效

• 申請號: 201710580901.6
• 申請日: 2017-07-17
• 公開（公告）號: CN107354182B
• 公開（公告）日: 2018-05-25
• 發明（設計）人: 丁文兵;李葉;李有志;劉勝
• 申請（專利權）人: 湖南農業大學
• 主分類號: C12P17/14
• 分類號: C12P17/14;C07D263/22;C12R1/645
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 何為;袁穎華

1.一種灰毛豆內生真菌發酵制備(R)-4-芐基-2-噁唑烷酮化合物的方法，其特征在于，該方法步驟如下：

A、以保藏號為CCTCC NO：M 2017408的灰毛豆內生真菌淡紫擬青霉菌(Purpureocilliumlilacinum)TPL04作為發酵菌株，制備該菌株的發酵液；

其中，該發酵液是將斜面保藏的灰毛豆內生真菌淡紫擬青霉菌TPL04進行活化，再接種至PDB液體培養基中進行搖瓶發酵培養，過濾，取濾液得到；發酵培養條件為：接種量5％～10％、搖瓶轉速100～300r/min，溫度15～28℃、時間1～30天；

B、按體積比1:1采用萃取溶劑萃取發酵液3次，合并萃取液，減壓濃縮，得浸膏；

C、將浸膏上硅膠柱進行層析，以石油醚/丙酮作為洗脫劑，按體積比9:1、8:2、7:3進行梯度洗脫，收集石油醚：丙酮的體積比為7:3的梯度洗脫下來的流份；將此流份再上葡聚糖凝膠柱進行層析，以純甲醇進行洗脫，收集并合并紫外和碘氧化均能顯色的組份；將該組分進一步用高效液相色譜進行純化，即得白色固體狀化合物(R)-4-芐基-2-噁唑烷酮。

2.如權利要求1所述的一種灰毛豆內生真菌發酵制備(R)-4-芐基-2-噁唑烷酮化合物的方法，其特征在于，所述步驟B中的萃取溶劑選用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮或正丁醇。

3.如權利要求1所述的一種灰毛豆內生真菌發酵制備(R)-4-芐基-2-噁唑烷酮化合物的方法，其特征在于，所述步驟A中斜面保藏的灰毛豆內生真菌淡紫擬青霉菌TPL04活化時的培養基為PDA平板，活化條件為15～30℃培養1～30天。