[發明專利]維生素C在制備培養基中的用途有效
| 申請號： | 201710576758.3 | 申請日： | 2017-07-14 |
| 公開（公告）號： | CN107460169B | 公開（公告）日： | 2020-12-11 |
| 發明（設計）人： | 潘光錦;黃可;張田;李宇航;廖寶劍;薛燕婷 | 申請（專利權）人： | 中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院 |
| 主分類號： | C12N5/0789 | 分類號： | C12N5/0789 |
| 代理公司： | 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 趙天月 |
| 地址： | 510530 廣東省*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 維生素 制備 培養基 中的 用途 | ||
1.一種促進胚胎干細胞或誘導多能干細胞造血分化的方法，其特征在于，包括：利用培養基培養所述胚胎干細胞或誘導多能干細胞，
其中，在培養的第0天，所述培養是在含有DMEM/F12、ITS、維生素C、BMP4以及ACTIVIN A的培養基中培養的；
在培養的第1天，所述培養是在含有DMEM/F12、ITS、維生素C、BMP4以及ACTIVIN A的培養基中培養的；
在培養的第2天和第3天，所述培養是在含有DMEM/F12、ITS、維生素C、bFGF以及VEGF的培養基中培養的；
在培養的第4天，所述培養是在含有DMEM/F12、ITS、維生素C、bFGF、VEGF以及SB431542的培養基中培養的；
基于100mL的所述DMEM/F12，所述ITS的用量為1mL，所述維生素C的用量不低于1mg。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述胚胎干細胞為H1。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述維生素C的用量為7mg。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述BMP4在所述培養基中的終濃度為50ng/mL，
任選地，所述ACTIVIN A在所述培養基中的終濃度為50ng/mL，
任選地，所述bFGF在所述培養基中的終濃度為50ng/mL，
任選地，所述VEGF在所述培養基中的終濃度為50ng/mL，
任選地，所述SB431542在所述培養基中的終濃度為10μM。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，預先將所述胚胎干細胞或誘導多能干細胞接種在12-well培養板中，所述胚胎干細胞或誘導多能干細胞的接種密度為1.5*105個/孔。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述12-well培養板預先鋪有GrowthFactor Reduced Matrigel。
7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述接種后的胚胎干細胞或誘導多能干細胞預先在mTeSR1培養基培養過夜。
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