[發(fā)明專利]一種鑒別大黃魚遺傳性別的分子標(biāo)記及其應(yīng)用

有效

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• 申請日: 2017-07-14
• 公開（公告）號: CN107236814B
• 公開（公告）日: 2020-02-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王志勇;林愛強(qiáng);肖世俊
• 申請（專利權(quán)）人: 集美大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/6879
• 分類號: C12Q1/6879;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 廈門市精誠新創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 35218
• 代理人: 方惠春

本發(fā)明公開了一種鑒別大黃魚遺傳性別的分子標(biāo)記及其應(yīng)用。所述分子標(biāo)記表現(xiàn)為SEEID NO:1所示核苷酸序列的插入/缺失長度多態(tài)性。該分子標(biāo)記與大黃魚的性別緊密相關(guān)，能夠用于大黃魚的輔助育種。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及水產(chǎn)生物技術(shù)領(lǐng)域中的魚類遺傳性別鑒定和性別控制技術(shù)，具體涉及一種鑒別大黃魚遺傳性別的分子標(biāo)記及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

在生命科學(xué)研究領(lǐng)域，性別研究一直是一個熱點(diǎn)命題，吸引著眾多研究者的關(guān)注。魚類在動物進(jìn)化中處于承前啟后的地位，且物種數(shù)量豐富。同大多數(shù)脊椎動物類似，不少魚類也是雌雄異體，具有性別二態(tài)性，即在形態(tài)和生理上表現(xiàn)出顯著的雌雄兩性差異。而且，一些魚類物種的個體生長等重要經(jīng)濟(jì)性狀及經(jīng)濟(jì)價值與性別密切相關(guān)。因此，開發(fā)這些魚類的單性育種與養(yǎng)殖技術(shù)在魚類養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)上具有重大的意義。許多魚類盡管在生長上存在性別二態(tài)性，但在外部形態(tài)上雌雄魚卻沒有顯著差異，尤其是在性腺尚未發(fā)育成熟時，其性別往往難以從外部形態(tài)上區(qū)分；甚至有一些魚類存在天然的性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象，在不同的環(huán)境或者通過人工誘導(dǎo)可以改變其生理性別，但性別改變前后沒有形態(tài)上的差異，無法通過外部形態(tài)識別其遺傳性別。這些問題的存在給單性育種、養(yǎng)殖及相關(guān)的遺傳學(xué)基礎(chǔ)研究帶來很大的困擾，尤其是性別決定分子機(jī)制研究。因此，針對這些魚類物種開發(fā)可以準(zhǔn)確鑒定其遺傳性別的分子標(biāo)記，不僅對這些魚類遺傳學(xué)相關(guān)的研究，而且對開展單性育種與養(yǎng)殖從而提高魚產(chǎn)量、增加水產(chǎn)養(yǎng)殖收益都有著非常重要的意義。

大黃魚(Larimichthys crocea)隸屬脊索動物門、脊椎動物亞門、硬骨魚綱、鱸形目、石首魚科、黃魚屬，分布于東亞沿海，兼具食用和藥用價值。大黃魚具有顯著的雌雄生長二態(tài)性，同時期的大黃魚雌魚生長速度顯著快于雄魚，且達(dá)到成熟時的雌魚個體較雄魚個體大，開發(fā)大黃魚單性育種及單性養(yǎng)殖技術(shù)具有重要的產(chǎn)業(yè)意義。但在性腺發(fā)育成熟之前，很難從外部形態(tài)上加以區(qū)分雌魚和雄魚，胚胎和幼體階段雌雄魚形態(tài)上幾乎沒有區(qū)別；據(jù)已有的研究表明，大黃魚不存在異形性染色體，也無法從細(xì)胞學(xué)角度鑒定其遺傳性別；這給其單性育種技術(shù)的開發(fā)帶來了很大困難。因此，開發(fā)一種可以準(zhǔn)確鑒別其遺傳性別的分子標(biāo)記用于大黃魚性別控制育種具有極大的生產(chǎn)應(yīng)用價值。

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，目前已有多種類型的DNA分子標(biāo)記技術(shù)，其中主要包括：(1)限制性片段長度多態(tài)性(Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP)；(2)隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplification Polymorphism DNA，RAPD)；(3)擴(kuò)增片段長度多態(tài)性(Amplified Fragment Length polymorphism，AFLP)；(4)微衛(wèi)星標(biāo)記(microsatellite)，又稱為短串聯(lián)重復(fù)序列(Short Tandem Repeats，STRs)或簡單重復(fù)序列(Simple Sequence Repeat，SSR)；(5)單核苷酸多態(tài)性(Single NucleotidePolymorphism，SNP)。利用上述DNA分子標(biāo)記技術(shù)，已經(jīng)有許多物種的性別特異的分子標(biāo)記被開發(fā)出來，但不同物種其基因組DNA序列結(jié)構(gòu)不同，沒有一個物種的性別特異分子標(biāo)記可以被用于對其他物種的遺傳性別進(jìn)行鑒定，只能針對不同物種分別進(jìn)行開發(fā)。可以識別與鑒定(鑒別)大黃魚遺傳性別的分子標(biāo)記迄今為止國內(nèi)外都還沒有見到報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種鑒別大黃魚遺傳性別的分子標(biāo)記。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種大黃魚遺傳性別相關(guān)的分子標(biāo)記，其特征在于，所述分子標(biāo)記表現(xiàn)為SEE ID NO:1所示核苷酸序列的插入/缺失長度多態(tài)性。

進(jìn)一步，具有SEE ID NO:1所示核苷酸序列的個體，表現(xiàn)為雌性大黃魚；缺失SEQID NO:1所示核苷酸序列的個體，表現(xiàn)為雄性大黃魚。

進(jìn)一步，所述引物對具有SEQ ID NO:2-3或SEQ ID NO:4-5所示的核苷酸序列。