[發明專利]一種離子交換樹脂固定化轉氨酶的制備及其應用

在審

• 申請號: 201710575802.9
• 申請日: 2017-07-14
• 公開（公告）號: CN109251925A
• 公開（公告）日: 2019-01-22
• 發明（設計）人: 田振華;郭峰;丁少南;孫傳民
• 申請（專利權）人: 上海藍木化工有限公司
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C12N11/08;C12P17/18
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 崔佳佳;馬莉華

1.一種固定化轉氨酶，其特征在于，所述的固定化轉氨酶含有：

組分(a)：陰離子交換樹脂；和

組分(b)：固定于所述陰離子交換樹脂上的轉氨酶；

其中，所述的組分(a)通過離子交換作用吸附于所述的組分(b)上；

并且，所述的陰離子交換樹脂以聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)為骨架。

2.如權利要求1所述的固定化轉氨酶，其特征在于，所述的陰離子交換樹脂選自下組：季銨鹽型陰離子交換樹脂、伯胺鹽型陰離子交換樹脂、仲胺鹽型陰離子交換樹脂、和叔胺鹽型陰離子交換樹脂。

3.如權利要求2所述的固定化轉氨酶，其特征在于，所述的季銨鹽型陰離子交換樹脂選自下組：三甲基取代的季銨鹽型陰離子交換樹脂、三乙基取代的季銨鹽型陰離子交換樹脂、甲基和乙基共同取代的季銨鹽型陰離子交換樹脂。

4.如權利要求1所述的固定化轉氨酶，其特征在于，所述的組分(a)和組分(b)的重量之和占固定化轉氨酶重量的30-80wt％，較佳地50-70wt％。

5.如權利要求1所述的固定化轉氨酶，其特征在于，所述固定化轉氨酶還含有組分(c)水。

6.一種反應體系，其特征在于，所述的反應體系包含：(a)權利要求1所述的固定化轉氨酶，(b)有機溶劑，和(c)氨基供體。

7.如權利要求6所述的反應體系，其特征在于，所述的有機溶劑選自下組：甲基叔丁基醚(MTBE)、甲苯、異丙醇、乙酸異丙酯、乙酸正丁酯、或其組合。

8.如權利要求6所述的反應體系，其特征在于，所述的氨基供體為異丙胺。

9.一種制備權利要求1所述的固定化轉氨酶的方法，其特征在于，所述的方法包括步驟：

(i)提供包含轉氨酶的第一溶液；

(ii)向所述的第一溶液中加入陰離子交換樹脂，進行固定化反應，從而形成權利要求1所述的固定化轉氨酶；

并且，所述的陰離子交換樹脂以聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)為骨架。

10.一種制備(3R)-3-氨基-1-[3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基]-4-(2,4,5-三氟苯基)丁-1-酮的方法，其特征在于，其包括步驟：

(1)在有機溶劑中，在權利要求1所述的固定化轉氨酶存在下，將1-(3-(三氟甲基)-5,6-二氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)-4-(2,4,5-三氟苯基)丁-1,3-二酮與氨基供體進行轉氨反應，從而形成(3R)-3-氨基-1-[3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基]-4-(2,4,5-三氟苯基)丁-1-酮。