[發(fā)明專利]一種過氧化氫響應(yīng)的比率計納米探針及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710564408.5
• 申請日: 2017-07-12
• 公開（公告）號: CN107543808A
• 公開（公告）日: 2018-01-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李培勇;李純婷;朱新遠(yuǎn)
• 申請（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 上海翼勝專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙)31218
• 代理人: 翟羽

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物領(lǐng)域，更具體地講，涉及一種過氧化氫響應(yīng)的比率計納米探針及其在檢測外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)是從原發(fā)腫瘤脫落下來進(jìn)入外周血循環(huán)的具有特殊性質(zhì)的腫瘤細(xì)胞。在臨床上癌癥的診斷和治療中，CTC被認(rèn)為是一種具有腫瘤診斷特性的生物標(biāo)志物。因而，對CTC的捕獲和分析在對癌癥病人的生物學(xué)分類，采取具體的治療方法，監(jiān)測療效等方面有著很大的應(yīng)用前景。然而，由于CTC在外周血中的數(shù)量極少，對CTC的計數(shù)和鑒定存在很大的挑戰(zhàn)。

目前檢測人外周血中的“循環(huán)腫瘤細(xì)胞”方法很多，有根據(jù)腫瘤細(xì)胞大小、彈性等物理特性檢測的方法；也有根據(jù)腫瘤細(xì)胞表面特異性抗原來檢測的；或檢測腫瘤細(xì)胞內(nèi)多倍染色體的方法。由于腫瘤細(xì)胞的異源性，其在大小、彈性等物理特性上可不一致；同樣的原因，其表達(dá)的特異性抗原也可丟失或減少表達(dá)。因此，現(xiàn)有的檢測方法在靈敏度或特異性上有一定程度的不足。

相比于正常細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞通常代謝旺盛且具有高的細(xì)胞內(nèi)過氧化氫(H₂O₂)水平。而CTC作為一種特殊的腫瘤細(xì)胞具有此相同的特征。因此，我們把高的細(xì)胞內(nèi)過氧化氫水平作為CTC的另一個特點(diǎn)用于CTC的鑒定，從而克服上述提到的方法的缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一個目的在于提供一種適用于循環(huán)腫瘤細(xì)胞鑒定的過氧化氫響應(yīng)的比率計納米探針。

本發(fā)明的第二個目的在于提供一種過氧化氫響應(yīng)的比率計納米探針的制備方法。

本發(fā)明的第三個目的在于提供一種過氧化氫響應(yīng)的比率計納米探針在制備惡性實(shí)體瘤外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測劑中的應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明第一個目的，本發(fā)明公開以下技術(shù)方案：一種過氧化氫響應(yīng)的比率計納米探針，其特征在于，所述探針包括過氧化氫響應(yīng)的熒光分子，過氧化氫惰性的熒光分子和生物相容性良好的聚合物。

作為一個優(yōu)選方案，所述過氧化氫響應(yīng)的熒光分子包括香豆素-苯硼酸頻哪醇酯。

作為一個優(yōu)選方案，所述過氧化氫惰性的熒光分子是指以發(fā)紅光為代表的發(fā)射波長在580-680nm的小分子熒光分子。

作為一個優(yōu)選方案，所述過氧化氫惰性的熒光分子包括羅丹明B、PE、Cy系列染料及水溶性碳點(diǎn)。

作為一個優(yōu)選方案，所述生物相容性良好的聚合物包括含氨基或羧基的聚合物。

作為一個優(yōu)選方案，所述含氨基或羧基的聚合物包括氨基修飾的殼聚糖和羧酸修飾的聚乙烯醇。

為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明第二個目的，本發(fā)明公開以下技術(shù)方案：一種過氧化氫響應(yīng)的比率計納米探針的制備方法，其特征在于，將過氧化氫響應(yīng)的熒光分子和過氧化氫惰性的熒光分子接枝到生物相容性良好的聚合物上，得到具有兩親性特征的聚合物，在水中自組裝形成過氧化氫響應(yīng)的比率計納米探針。

為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明第三個目的，本發(fā)明公開以下技術(shù)方案：一種過氧化氫響應(yīng)的比率計納米探針在制備惡性實(shí)體瘤外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測試劑盒中的應(yīng)用。

作為一個優(yōu)選方案，所述惡性實(shí)體瘤包括胃癌、肺癌、結(jié)腸癌、肝癌、喉癌、食管癌、膀胱癌、口咽癌、乳腺癌、前列腺癌。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：本發(fā)明提供的比率計納米探針具有良好的水溶性，易被細(xì)胞攝取且細(xì)胞毒性低，用于循環(huán)腫瘤細(xì)胞中的過氧化氫的定量成像。該比率計納米探針具有優(yōu)異的熒光性能，對過氧化氫具有很好的靈敏性和特異性，可以檢測不同惡性實(shí)體瘤細(xì)胞中過氧化氫水平的差異和細(xì)胞內(nèi)攝量的不同。

附圖說明

圖1為比率計過氧化氫納米探針。