[發(fā)明專利]一株枯草芽孢桿菌BBD012及防治番茄病害中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710562201.4
• 申請(qǐng)日: 2017-07-11
• 公開（公告）號(hào): CN107164285B
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李永麗;周洲;崔林開;胡艷紅;閆作炳;王少博;林乾坤;王亞紅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河南科技大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A01N63/22;A01P3/00;A01G13/00;C12R1/125
• 代理公司: 洛陽公信知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所(普通合伙) 41120
• 代理人: 程茗

本發(fā)明涉及一株枯草芽孢桿菌BBD012，分類命名為Bacillus subtilis，保藏編號(hào)：M 2017097；所述枯草芽孢桿菌BBD012可用于抑制番茄灰霉病菌和/或番茄葉霉病菌。該制劑為枯草芽孢桿菌BBD012培養(yǎng)液，制備方法為，接種枯草芽孢桿菌BBD012單菌落于LB液體培養(yǎng)基中，28℃的恒溫振蕩培養(yǎng)箱中160 r·min^?1培養(yǎng)24 h，采用無菌水將培養(yǎng)后所得菌液的菌落稀釋至4×10⁸ cfu·mL^–1，防治方法為，采用枯草芽孢桿菌BBD012培養(yǎng)液對(duì)番茄植株進(jìn)行噴霧。枯草芽孢桿菌BBD012對(duì)番茄灰霉病菌和葉霉病菌具有良好拮抗效果，對(duì)番茄灰霉病和葉霉病的的防治效果分別達(dá)到64.9%和58.0%，具有很好的防病效果。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體的說是一種枯草芽孢桿菌BBD012及防治番茄病害中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

番茄灰霉病是番茄上危害較重且常見的病害，各菜區(qū)都發(fā)生。除危害番茄外，還可危害害茄子、辣椒、黃瓜、瓠瓜等20多種作物。低溫、連續(xù)陰雨天氣多的年份危害嚴(yán)重。發(fā)病嚴(yán)重時(shí)造成莖葉枯死和大量的爛花、爛果，直接影響產(chǎn)量。番茄灰霉病已成為我國保護(hù)地番茄生產(chǎn)的主要病害，灰霉病是由半知菌亞門真菌灰葡萄孢( Botrytis cinerea) 侵染所致。

番茄葉霉病由番茄葉霉病菌（Fulvia fulva）侵染所致，在番茄的葉、莖、花、果實(shí)上，都會(huì)出現(xiàn)癥狀，但是常見癥狀是發(fā)生在葉片上，初期在葉片背面出現(xiàn)一些退綠斑，后期變?yōu)榛疑蚝谧仙牟灰?guī)則形霉層，葉片正面在相應(yīng)的部位退綠變黃，嚴(yán)重時(shí)，葉片常出現(xiàn)干枯卷縮。從發(fā)病的順序看，經(jīng)常從植株下部向上蔓延、溫度從9℃到34℃之間，病原都能生長發(fā)育，發(fā)育的最適溫度是20～25℃。在最適溫度且濕度較大(相對(duì)濕度在80%以上)時(shí)，僅需10天到半月就可普遍發(fā)病。

目前番茄抗病育種還沒有突破性進(jìn)展，國內(nèi)防治番茄灰霉病和葉霉病主要依靠化學(xué)藥劑。然而，長期、連續(xù)用藥使灰霉病菌和葉霉病產(chǎn)生了抗藥性，導(dǎo)致化學(xué)藥劑防治效果逐年下降，并且化學(xué)藥劑殘留嚴(yán)重污染農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境，危及人畜健康。生物防治已經(jīng)成為控制病害的重要手段，而植物內(nèi)生細(xì)菌作為植物病害生物防治的潛在資源菌具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，并且已經(jīng)顯示出很好的利用前景。枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)是一種嗜溫性的好氧產(chǎn)芽孢的革蘭氏陽性桿狀細(xì)菌，能夠產(chǎn)生耐熱、耐旱、抗紫外線和有機(jī)溶劑的內(nèi)生孢子，其抑制植物病原菌的范圍很廣，包括根部病害、枝干病害、葉、花部病害和收獲后果品病害，是一種理想的生防微生物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一株枯草芽孢桿菌BBD012，分類命名為枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）BBD012，保藏編號(hào)為CCTCC NO：M 2017097。

本發(fā)明的另一目的是提供一種防治番茄灰霉病和/或葉霉病制劑。

所述枯草芽孢桿菌BBD012可用于抑制番茄灰霉病菌和番茄葉霉病菌。

所述防治番茄灰霉病和/或葉霉病制劑為枯草芽孢桿菌BBD012培養(yǎng)液。

所述枯草芽孢桿菌BBD012培養(yǎng)液中含有菌落4×10⁸ cfu·mL^{– 1}。

所述枯草芽孢桿菌BBD012培養(yǎng)液的制備方法為：接種枯草芽孢桿菌BBD012單菌落于LB液體培養(yǎng)基中，28℃的恒溫振蕩培養(yǎng)箱中160 r·min^-1培養(yǎng)24 h，采用無菌水將培養(yǎng)后所得菌液的菌落稀釋至4×10⁸ cfu·mL^{– 1}。

所述制劑治療和預(yù)防番茄灰霉病和/或葉霉病的方法，采用枯草芽孢桿菌BBD012培養(yǎng)液對(duì)番茄植株進(jìn)行噴霧，即將枯草芽孢桿菌BBD012培養(yǎng)液噴在番茄葉片的正反面。