[發明專利]一種含有螯合鈣的土壤改良劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201710559813.8
• 申請日: 2017-07-11
• 公開（公告）號: CN107245503B
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發明（設計）人: 劉海明
• 申請（專利權）人: 北京航天恒豐科技股份有限公司
• 主分類號: C12P7/56
• 分類號: C12P7/56;C12P7/58;C12N1/20;C09K17/14;C12R1/125
• 代理公司: 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司 11471
• 代理人: 趙芳

1.一種含有螯合鈣的土壤改良劑，其特征在于，所述土壤改良劑由包括以下步驟的方法制備：

A、激活枯草芽孢桿菌：將枯草芽孢桿菌接種在固體培養基上，在35-37℃的條件下靜置培養4-6天，得到激活的枯草芽孢桿菌；

所述固體培養基由以下重量百分數的組分制成：紅薯渣7-9％、牛肉膏0.2-0.3％、酵母浸出物0.35-0.45％、蛋白胨0.3-1.2％、氯化鈉0.3-0.5％、硫酸鎂0.3-0.4％、瓊脂3-4％，余量為水，pH值為7.1-7.5；

B、培養種子菌液：將步驟A得到的激活的枯草芽孢桿菌接種至滅菌培養基中，在35-37℃、發酵壓力為0.03-0.04MPa、攪拌轉速為160-240rpm的條件下培養10-12小時，得到種子菌液；

所述滅菌培養基由以下重量百分數的組分制成：豆粕粉6-9％、紅薯渣21-24％、牛肉膏0.25-0.45％、酵母浸出物0.35-0.45％、蛋白胨0.3-1.2％、磷酸氫二鉀0.022-0.028％、磷酸二氫鉀0.022-0.028％、氯化鈉0.2-0.5％、硫酸亞鐵0.3-0.8％，余量為水，pH值為7.0-7.5；

C、發酵培養：將步驟B得到的種子菌液接種至發酵培養基中，在35-37℃、攪拌轉速為180-220rpm的條件下培養20-36小時，發酵培養過程中，鏡檢發酵物料，當發酵物料中枯草芽孢桿菌90％以上形成芽孢，且發酵物料中活菌數達到270億/克以上時，收集發酵培養后得到的枯草芽孢桿菌菌液，在進風溫度為75-82℃的沸騰床中干燥至水分≤8％，然后過0.8-1.2mm的篩網，得到粉末狀物質，得到土壤改良劑；

所述發酵培養基由以下重量百分數的組分制成：紅薯渣18-22％、碳酸鈣8.5-9.5％、酵母浸出物0.35-0.45％、蛋白胨0.3-1.2％、磷酸氫二鉀0.022-0.028％、磷酸二氫鉀0.022-0.028％、氯化鈉0.2-0.5％、硫酸亞鐵0.3-0.8％、硫酸鎂0.3-0.7％、硫酸錳0.3-0.7％、消泡劑0.15-0.25％、黃芪粉0.65-0.75％，余量為水，pH值為7.0-7.5；所述發酵培養基中碳酸鈣的粒徑為20-80um，所述黃芪粉的粒徑為1-75um；

使用16SrDNA序列檢測對枯草芽孢桿菌進行鑒定的步驟，所使用的引物為：

63F:CAGGCCTAACACATGCAAGTC

和1387R:GGGCGGWGTGTACAAGGC；

所述固體培養基、滅菌培養基和發酵培養基在使用前均需經過殺菌處理，所述殺菌處理為：將培養基在121-123℃滅菌12-14分鐘，然后冷卻至35-40℃。