[發(fā)明專利]胃泌素釋放肽前體檢測試劑盒用抗體及試劑盒有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710559357.7 | 申請(qǐng)日： | 2017-07-11 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN109239348B | 公開（公告）日： | 2022-03-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王保君;湯雙雙;李明剛 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 北京科衛(wèi)臨床診斷試劑有限公司 |
| 主分類號(hào)： | G01N33/68 | 分類號(hào)： | G01N33/68;G01N33/577;G01N33/533;G01N33/535 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 100027 北京市懷*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 胃泌素 釋放 體檢 測試 劑盒用 抗體 試劑盒 | ||
一種胃泌素釋放肽前體檢測試劑盒用抗體及試劑盒，其包括含熒光素標(biāo)記鼠源性胃泌素釋放肽前體單克隆抗體，還包括含辣根過氧化物酶標(biāo)記鼠源性胃泌素釋放肽前體單克隆抗體；含熒光素標(biāo)記鼠源性胃泌素釋放肽前體單克隆抗體簡稱結(jié)合物1，含辣根過氧化物酶標(biāo)記鼠源性胃泌素釋放肽前體單克隆抗體簡稱結(jié)合物2。其目的是提供一種特異性強(qiáng)，靈敏度高，獲得檢測結(jié)果的時(shí)間短，操作方式簡便，檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的胃泌素釋放肽前體檢測試劑盒用抗體及胃泌素釋放肽前體檢測試劑盒。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種胃泌素釋放肽前體檢測試劑盒用抗體及胃泌素釋放肽前體檢測試劑盒。
背景技術(shù)
現(xiàn)有的用于定量檢測人血清中的胃泌素釋放肽前體（ProGRP）的胃泌素釋放肽前體檢測試劑盒的靈敏度較低，并且其獲得檢測結(jié)果的時(shí)間較長，操作方式較為復(fù)雜。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種特異性強(qiáng)，靈敏度高，獲得檢測結(jié)果的時(shí)間短，操作方式簡便，檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的胃泌素釋放肽前體檢測試劑盒用抗體及試劑盒。
本發(fā)明的胃泌素釋放肽前體檢測試劑盒用抗體，包括含熒光素標(biāo)記鼠源性胃泌素釋放肽前體單克隆抗體，或稱含熒光素FITC標(biāo)記的胃泌素釋放肽前體ProGRP抗體，還包括含辣根過氧化物酶標(biāo)記鼠源性胃泌素釋放肽前體單克隆抗體，或稱含辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記的胃泌素釋放肽前體ProGRP抗體；
含熒光素標(biāo)記鼠源性胃泌素釋放肽前體單克隆抗體簡稱結(jié)合物1，含辣根過氧化物酶標(biāo)記鼠源性胃泌素釋放肽前體單克隆抗體簡稱結(jié)合物2；
所述結(jié)合物1采用以下方法制成：
1、稱取設(shè)定重量的熒光素FITC，加入10-20倍重量的二甲基甲酰胺DMF溶解熒光素FITC，得到熒光素FITC溶液；
2、將設(shè)定重量的鼠源性胃泌素釋放肽前體單克隆抗體保存在5-10倍重量的交聯(lián)緩沖液中，向保存有鼠源性胃泌素釋放肽前體單克隆抗體的交聯(lián)緩沖液中加入摩爾比為15-20倍的步驟1得到的熒光素FITC溶液，立刻混勻；
3、將步驟2得到的混勻液室溫避光反應(yīng)1小時(shí)，得到純化交聯(lián)物；
4、將步驟3得到的純化交聯(lián)物進(jìn)行透析、脫鹽處理，得到液態(tài)的結(jié)合物1；
所述結(jié)合物2采用以下方法制成：
1、稱取設(shè)定重量的含辣根過氧化物酶HRP，加入10-20倍重量的二甲基甲酰胺DMF溶解含辣根過氧化物酶HRP，得到含辣根過氧化物酶HRP溶液；
2、用過量的NaIO4溶液氧化步驟1得到的含辣根過氧化物酶HRP溶液2—3小時(shí)，然后用乙二醇終止反應(yīng)；
3、將設(shè)定重量的鼠源性胃泌素釋放肽前體單克隆抗體保存在5-10倍重量的交聯(lián)緩沖液中，向保存有鼠源性胃泌素釋放肽前體單克隆抗體的交聯(lián)緩沖液中加入摩爾比為10-15倍的步驟2得到的溶液，立刻混勻；
4、將步驟3得到的混勻液在2℃—8℃下攪拌反應(yīng)6—12小時(shí)，然后用NaBH4終止反應(yīng)；
5、用飽和硫酸銨溶液純化交聯(lián)物，沉淀復(fù)溶后得到液態(tài)的結(jié)合物2。
本發(fā)明的胃泌素釋放肽前體檢測試劑盒用抗體，其中所述結(jié)合物1用結(jié)合物1稀釋液稀釋到適宜濃度，配制成試劑盒用結(jié)合物1，結(jié)合物1稀釋液為含0.5%酶水解明膠的0.02mol/L pH 6.5磷酸鹽稀釋液；
所述結(jié)合物2用結(jié)合物2稀釋液稀釋到適宜濃度，配制成試劑盒用結(jié)合物2，結(jié)合物2稀釋液為含0.5%酶水解明膠的0.02mol/L pH 6.5磷酸鹽稀釋液。
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