[發(fā)明專利]一種紫蘇葉油組分含量分析方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710558656.9
• 申請(qǐng)日: 2017-07-10
• 公開（公告）號(hào): CN107300595A
• 公開（公告）日: 2017-10-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 萬(wàn)丹;唐代鳳;唐純玉;沈冰冰;李震;邱云芳;朱湘
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖南時(shí)代陽(yáng)光藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06
• 代理公司: 北京科家知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11427
• 代理人: 陳娟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及化學(xué)分析技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種紫蘇葉油組分含量分析方法。

背景技術(shù)

紫蘇葉油來(lái)源于唇形科植物紫蘇(Perilla frutescens(L.)Britt.)的干燥葉(或帶嫩枝葉)，為具有強(qiáng)揮發(fā)性的淺黃色或黃色澄清液體，帶有紫蘇特異香氣，味微辛辣。露置空氣中或貯存日久，色漸變深，質(zhì)漸濃稠。在乙醇、乙醚或石油醚中易溶，在水中幾乎不溶。

紫蘇葉油是評(píng)價(jià)紫蘇葉質(zhì)量?jī)?yōu)劣的重要物質(zhì)之一，同時(shí)其具有解表散寒、行氣和胃的功效，常添加于多種中藥復(fù)方制劑如藿香正氣系列藥品中，具有很強(qiáng)的分析價(jià)值。在傳統(tǒng)分析方法中，紫蘇葉油通常由干燥紫蘇葉經(jīng)水蒸氣蒸餾法提取而得。該提取方法雖經(jīng)典簡(jiǎn)單，但也表現(xiàn)有諸多不足，主要體現(xiàn)在：1.耗時(shí)：提取時(shí)間在在2小時(shí)以上；2.藥材用量大：平均一次提取需用藥材至少100g。此外，紫蘇種質(zhì)資源豐富，不同紫蘇葉間揮發(fā)油含量差異大，低出油率的紫蘇葉甚至無(wú)法采用水蒸氣蒸餾法獲得足夠的紫蘇葉油進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析。另一方面，傳統(tǒng)分析方法多采用GC檢測(cè)，以對(duì)照品和紫蘇葉油樣品保留時(shí)間一致作為組分峰的判別與測(cè)定方式，既可能出現(xiàn)組分判定不準(zhǔn)確的情況，也在組分認(rèn)知與測(cè)定上存在受限于對(duì)照品種類的問(wèn)題。

目前，紫蘇葉油的組分分析測(cè)定方法主要參照2015年版《中國(guó)藥典》一部關(guān)于藿香正氣口服液項(xiàng)下所附紫蘇葉油質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。該標(biāo)準(zhǔn)采用紫蘇葉油對(duì)照提取物及紫蘇烯、紫蘇醛對(duì)照品作為雙重對(duì)照，從紫蘇葉油指紋圖譜與指標(biāo)性成分兩個(gè)方面對(duì)紫蘇葉油進(jìn)行分析測(cè)定。而我國(guó)紫蘇的化學(xué)型有PK型(主要成分為紫蘇酮)、PA型(主要含紫蘇醛和檸檬烯)、EK型主含香薷酮(elsho-ltziaketone) 等單萜)、PP型(以芹菜腦主要成分的PP-a型；以肉豆蔻醚為主要成分的PP-m 型；以欖香素為主要成分的PP-e型；以細(xì)辛腦為主要成分的PP-as型)及PL型(主含紫蘇烯(perillene)等單萜)5個(gè)化學(xué)型，其中紫蘇烯型是極為稀有的化學(xué)類型。故該標(biāo)準(zhǔn)在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中有一定的使用限制，以至于本領(lǐng)域的技術(shù)人員無(wú)法采用該方法實(shí)現(xiàn)不同種質(zhì)來(lái)源(不同化學(xué)型)的紫蘇葉(油)組分分析，從而無(wú)法更進(jìn)一步評(píng)價(jià)紫蘇葉(油)的質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容

基于背景技術(shù)存在的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明目的在于提供一種紫蘇葉油組分含量分析方法。

一種紫蘇葉油組分含量分析方法，方法步驟如下：

1)供試品的制備：稱取紫蘇干燥藥材50g，粉粹，以備用，精密稱取藥材粉末0.1000g，于15mL專用采樣瓶中，置于溫度為65-75℃的水浴鍋中，插入已老化的裝有萃取頭的手動(dòng)進(jìn)樣器，推出針頭，萃取25-35min后取出，立即插入氣相進(jìn)樣口，脫附5min；

2)標(biāo)準(zhǔn)品的的制備：取正十七烷50mg于250mL的容量瓶中，正己烷-無(wú)水乙醇體積比1:1；

3)GC測(cè)試；

4)MS測(cè)試。

所述步驟1)中的脫附溫度為100-250℃。

所述步驟1)中GC測(cè)試條件：彈性石英毛細(xì)管柱，升溫程序：初始溫度60℃，保持8min，以8℃/min升到115℃，保持30min，再以10℃/min升到195℃，保持5min，最后以20℃/min升到235℃；進(jìn)樣口溫度250℃；載氣為氦氣；柱流量1mL/min；進(jìn)樣分流比50:1。

所述步驟1)中MS測(cè)試條件：電子電離源；電子能量70eV；離子源溫度 200℃；接口溫度250℃；四極桿溫度200℃；全掃描模式；掃描質(zhì)量范圍0～ 1000μ。

所述彈性石英毛細(xì)的型號(hào)Rxi-5MS，30m×0.25mm，0.25μm。

所述氦氣的純度99.999％。

所述步驟1)中老化手動(dòng)進(jìn)樣器萃取頭老化條件：250℃下活化5min。

與已有技術(shù)相比，本發(fā)明有益效果體現(xiàn)在：

固相微萃取，相比傳統(tǒng)的揮發(fā)油提取法，是一種新型的無(wú)溶劑化的樣品前處理技術(shù)。SPME將帶有特殊涂層石英纖維作為固相提取器將其頂空提取，然后直接進(jìn)行GC-MS分析，操作簡(jiǎn)單，應(yīng)用廣泛，是一種集樣品采集，萃取，進(jìn)樣和分析于一體的快速檢測(cè)方法。該技術(shù)適用于揮發(fā)性和不揮發(fā)性成分，重現(xiàn)性好，靈敏度高，非常適合中藥分析方面的應(yīng)用。

而傳統(tǒng)檢測(cè)方法，需通過(guò)提取紫蘇中揮發(fā)油后(時(shí)間5～8小時(shí))，將揮發(fā)油溶解到適宜的溶劑中進(jìn)行檢測(cè).

表1傳統(tǒng)提取與固相微萃取比較