[發(fā)明專利]一種促血小板聚集的多肽8496

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710558287.3
• 申請(qǐng)日: 2017-07-10
• 公開（公告）號(hào): CN108503694B
• 公開（公告）日: 2019-12-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孟照輝;葉雨佳;王華煒;萬(wàn)雯;王靜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院
• 主分類號(hào): C07K7/08
• 分類號(hào): C07K7/08;A61K38/10;A61P7/04;A61P9/00;A61P9/10;A61P17/02;A61P17/00
• 代理公司: 53115 昆明今威專利商標(biāo)代理有限公司
• 代理人: 趙云

一種促血小板聚集的多肽8496。本發(fā)明屬于醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有促進(jìn)血小板聚集作用的多肽。本制劑為具有促進(jìn)凝血酶誘導(dǎo)的人血小板聚集的多肽8496，其序列為Ile?Gly?Thr?Gln?Gln?Ala?Thr?Pro?Gly?Pro?Ala?Asn?Ser，合成多肽后的底物為完整的氨基酸序列。本發(fā)明所述多肽對(duì)膠原誘導(dǎo)的血小板聚集有顯著的促進(jìn)作用，可用于開發(fā)臨床有效的新的一代促進(jìn)血小板聚集以及止血藥物，可用于探索其與其它血小板激活劑對(duì)血小板的作用及相關(guān)功能的影響等。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有促進(jìn)血小板聚集作用的多肽。

背景技術(shù)

心腦血管疾病主要包括急性心肌梗死、腦梗死、肺梗死、缺血性心臟病、腦卒中等常見病，嚴(yán)重威脅人類健康及生命，為我國(guó)居民首位死因[1]。血小板活化是心腦血管疾病發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中重要的始動(dòng)因子，而血小板激活、粘附及聚集直至血栓形成是一系列的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，不僅在生理性止血過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，同時(shí)也參與血栓形成、組織修復(fù)等病理過(guò)程[2,3]。血小板聚集對(duì)于血栓的形成起著核心作用。血小板聚集的誘導(dǎo)劑主要包括：膠原、花生四烯酸、ADP、凝血酶等。

1、膠原引起的血小板活化

當(dāng)血管內(nèi)皮細(xì)胞受損或斑塊破裂使膠原蛋白暴露時(shí)，血小板膜蛋白和暴露的膠原蛋白或活化的vWF結(jié)合，是啟動(dòng)血栓形成的關(guān)鍵步驟。血小板表面擁有膜蛋白GPVI和整合素-α2β1兩個(gè)識(shí)別膠原蛋白的特定序列，從而牢固結(jié)合膠原蛋白。其中GPVI是膠原信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受體，參與整合素-α2β1調(diào)節(jié)的血小板粘附后的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和血小板活化與聚集[4-7]。膠原與兩種膜蛋白的共同作用下，最終激活整合素αⅡbβ3活化途徑，引起血小板聚集、釋放[8,9]。

2、花生四烯酸引起的血小板活化

血小板胞內(nèi)Ca 2+水平升高可引起磷脂酶A2活化，繼而花生四烯酸從磷脂膜中游離出來(lái)。花生四烯酸在環(huán)氧合酶-1作用下合成血栓素A2(TXA2)，TXA2與血小板膜上的TXA2受體結(jié)合后[10]，與特異性的G蛋白偶聯(lián)受體Gq和G13結(jié)合使血小板活化。TXA2不僅是血小板活化和血管平滑肌收縮的強(qiáng)激動(dòng)劑，它還可以放大由低劑量凝血酶和ADP等引起的血小板活化信號(hào)。TXA2與受體結(jié)合后激活其下游的PLCβ，引起IP3、DAG、G13以及與這些蛋白相關(guān)的信號(hào)通路的活化[11]，最終引起血小板變形和血小板內(nèi)顆粒體的釋放[12]。

2、ADP引起的血小板活化

ADP是活化血小板中致密顆粒釋放的主要成分，其在血小板活化和聚集過(guò)程中起著非常重要的作用。ADP受體主要有P2Y1,P2Y12和P2X1。其中，P2Y1是一種G蛋白偶聯(lián)的跨膜受體,ADP與P2Y1受體結(jié)合后,P2Y1受體與Gq蛋白偶聯(lián)激活磷酯酶C從而導(dǎo)致Ca2+從細(xì)胞外流入細(xì)胞內(nèi),細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的升高激活了蛋白激酶C引起血小板變形和聚集[13]。P2Y12是一類G蛋白偶聯(lián)的受體[14],不僅對(duì)ADP引起的血小板不可逆聚集非常重要,而且對(duì)ADP介導(dǎo)的TXA2的產(chǎn)生至關(guān)重要。P2X1蛋白受體為配體門控性離子通道,主要負(fù)責(zé)由ADP引起的快速鈣內(nèi)流，在血小板聚集中所起的作用比較微弱[15]。

4、凝血酶引起的血小板活化

凝血酶是最有效的血小板激動(dòng)劑，其通過(guò)與血小板膜表面蛋白酶活化受體(PARs)結(jié)合后激活血小板。人的血小板表達(dá)PAR-1和PAR-4[16]，其中任何一個(gè)活化都可引起血小板聚集和顆粒釋放[17]。研究發(fā)現(xiàn)，PAR-1對(duì)低濃度的凝血酶敏感，而PAR-4僅在高濃度凝血酶環(huán)境下觸發(fā)血小板的活化和聚集；并且凝血酶對(duì)PAR-4的裂解作用比PAR-1慢20至70倍，因此，PAR-1是凝血酶引起血小板活化最重要的受體[18,19]。研究表明，PAR-1和Gq、G13、Gi/z偶聯(lián)，PAR-4只和Gq、G13偶聯(lián)從而使凝血信號(hào)與胞內(nèi)信號(hào)通路鏈接起來(lái)，導(dǎo)致PLCβ、PI3K和Ras相似物Rho激酶的活化，引起IP3水解，鈣動(dòng)員以及PKC活化[17,20]。