[發明專利]一種臧酋猴血型的鑒定方法

在審

• 申請號: 201710557796.4
• 申請日: 2017-07-10
• 公開（公告）號: CN107202899A
• 公開（公告）日: 2017-09-26
• 發明（設計）人: 楊鋒;謝曉娟;曾代文
• 申請（專利權）人: 四川省醫學科學院·四川省人民醫院實驗動物研究所
• 主分類號: G01N33/80
• 分類號: G01N33/80
• 代理公司: 成都正華專利代理事務所(普通合伙)51229
• 代理人: 李林合,李蕊

1.一種臧酋猴血型的鑒定方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)采集臧酋猴后肢靜脈血置于含多孔棉的容器中，以120-130r/min的轉速震蕩10-15min；

(2)吸取步驟(1)處理后的血液置于紅頭采血管中，室溫靜置40-60min，然后置于4℃過夜，再室溫放置30-40min，于3500-6000r/min離心10-15min，吸取上清液；

(3)吸取新鮮的正常人O型血于離心管中，加入9-10倍體積，濃度為0.9％的生理鹽水，輕微搖勻，于1500-2000r/min離心15-20min，棄去上清液，然后用0.9％的生理鹽水清洗沉淀物3-4次；

(4)將步驟(2)所得上清液與步驟(3)所得物按體積比為1:1混合，并于37℃孵育30-40min，再于1300-1500r/min離心8-10min，取上清液；

(5)步驟(4)所得上清液與保護液按體積比為3-4:1-2混合；其中，保護液包括5％牛血清蛋白、5％蔗糖、5％PVP和含5％小牛血清的磷酸鹽緩沖液，磷酸鹽緩沖液濃度為5mM，pH值為7.4；

(6)將步驟(5)所得物分別與正常人的A型血紅細胞和B型血紅細胞按體積比為1:1混合，輕微搖勻后于1000r/min離心1min，觀察凝集現象。

2.根據權利要求1所述的臧酋猴血型的鑒定方法，其特征在于，步驟(1)中離心轉速為120r/min，離心時間為15min。

3.根據權利要求1所述的臧酋猴血型的鑒定方法，其特征在于，步驟(2)中室溫靜置60min，然后置于4℃過夜，再室溫放置30min，于3800r/min離心10min。

4.根據權利要求1所述的臧酋猴血型的鑒定方法，其特征在于，步驟(3)中向正常人O型血紅細胞中加入9倍體積，濃度為0.9％的生理鹽水，輕微搖勻，于1500r/min離心15min。

5.根據權利要求1所述的臧酋猴血型的鑒定方法，其特征在于，步驟(4)中孵育時間為30min，離心速度為1372r/min，離心時間為10min。

6.根據權利要求1所述的臧酋猴血型的鑒定方法，其特征在于，步驟(4)所得上清液與保護液按體積比為3:1混合。