[發(fā)明專利]鞘氨醇單胞菌、其胞外產(chǎn)物及其制備方法和應用

有效

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• 申請日: 2017-07-10
• 公開（公告）號: CN109234180B
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發(fā)明（設計）人: 齊佩瑾;吳越;宋肖潔;周春霞;王宇;史曉婷
• 申請（專利權(quán)）人: 伽藍（集團）股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P1/04;A61Q19/08;C12R1/01
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦;朱水平

本發(fā)明公開了一種鞘氨醇單胞菌、其胞外產(chǎn)物及其制備方法。所述鞘氨醇單胞菌(Sphingomonas sp.)，其是保藏編號為CCTCC NO：M 2017211的鞘氨醇單胞菌JA?MS?001?A?04菌株。本發(fā)明還公開了鞘氨醇單胞菌的胞外產(chǎn)物在皮膚細胞增殖、修復及延緩衰老方面的應用，以及包含鞘氨醇單胞菌胞外產(chǎn)物的抗衰老、促進細胞增殖和/或遷移制劑。

技術(shù)領域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領域，具體涉及一種鞘氨醇單胞菌、其胞外產(chǎn)物及其胞外產(chǎn)物的制備，以及胞外產(chǎn)物在皮膚細胞增殖、修復及延緩衰老方面的應用。

背景技術(shù)

鞘氨醇單胞菌1990年才被科學家分離鑒定，直至2001年，其于分類學上因物理特性、系統(tǒng)發(fā)育等特點區(qū)別劃分為4個屬：鞘氨醇單胞菌屬(Sphingomonas)、鞘氨醇菌屬(Sphingobium)、新型鞘氨醇菌屬(Novosphingobium)、鞘翅菌屬(Sphigopyxis)。鞘氨醇單胞菌(Sphingomonas)是革蘭氏陰性細菌，桿狀、典型的好氧型、化學異養(yǎng)，具有獨特的呼吸代謝途徑-輔酶Q10，細胞膜組成中主要含有糖鞘脂而非脂多糖，通常分泌色素而使菌落呈黃色。鞘氨醇單胞菌屬在環(huán)境微生物學領域受到越來越多的關注，其中，從污染環(huán)境中分離出來具有生物降解能力的菌株，可以降解多種化合物，尤其是芳烴類化合物。除此之外，鞘氨醇單胞菌屬還具有生物合成能力，分泌胞外多聚物如結(jié)冷膠(Gellan Gum)、韋蘭膠(Welan Gum)、鼠李糖膠(Rhamnose Gum)等，廣泛應用于食品行業(yè)，主要依賴于多糖的化學特性及物理特性如粘性、凝膠性等和生物活性如抗腫瘤、抗氧化、降血脂血糖等。

皮膚組織從結(jié)構(gòu)上由表皮層、真皮層、皮下組織及附屬器官等構(gòu)成。表皮層有大量角質(zhì)形成細胞(keratinocytes，KC)，表皮層最外一層是由5～20層已老化的角質(zhì)細胞組成的角質(zhì)層，具有對機械性刺激、物理、化學等因素的防護作用。正常情況下約30％的基底層細胞處于核分裂期新生的角質(zhì)形成細胞有次序地逐漸向上移動由基底層移行至顆粒層約需14d,再移行至角質(zhì)層表面并脫落又需14d,共約28d，稱之皮膚細胞周期。角質(zhì)形成細胞作為表皮重建的主要參與者，對皮膚的結(jié)構(gòu)和功能起重要作用，與皮膚病變、創(chuàng)面愈合關系密切。膠原是真皮的主要成分，也是人體中含量最豐富的蛋白質(zhì)，為皮膚提供強度和支撐。隨著時間的流逝，這種皮膚的結(jié)構(gòu)蛋白和主要組成成分逐漸退化，使皮膚呈現(xiàn)衰老的表現(xiàn)，Ⅰ型膠原是皮膚中含量最豐富、最重要的膠原類型。

近年來，有許多關于鞘氨醇單胞菌在皮膚上的應用，例如專利(US6,348,201)利用少動鞘氨醇單胞菌(Sphingomonas paucimobilis)IAM12576突變成白色菌株Sphingomonaspaucimobilis KFC-W-1,Sphingomonas paucimobilis MK-253W,Sphingomonaspaucimobilis MK-254W,Sphingomonas paucimobilis MK-332W等，經(jīng)過培養(yǎng)，分離得到菌體，再通過甲醇、丙酮等具有揮發(fā)性的有機試劑提取菌體，得到含有鞘糖脂(sphingoglycolipid)的成分。該成分可以外用于皮膚，具有保濕或改善皮膚粗糙的功效。該提取方法限定了其活性成分來自于菌體，活性成分的效果較低，而且提取的過程中需要使用有機試劑，對工作人員和消費者都有一定的健康風險。

發(fā)明內(nèi)容

因此本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是：提供一種鞘氨醇單胞菌，其胞外產(chǎn)物能促進皮膚細胞增殖、遷移，以及延緩細胞的衰老。還提供了該鞘氨醇單胞菌的制備方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采取的技術(shù)方案之一為：一種鞘氨醇單胞菌(Sphingomonas sp.)，其是保藏編號為CCTCC NO：M 2017211的鞘氨醇單胞菌JA-MS-001-A-04菌株。

本發(fā)明采取的技術(shù)方案之一為：提供了一種本發(fā)明生產(chǎn)鞘氨醇單胞菌胞外產(chǎn)物的制備方法，其包括以下步驟：

(1)將鞘氨醇單胞菌接種入細菌常規(guī)培養(yǎng)基進行發(fā)酵培養(yǎng)；

(2)隨后將發(fā)酵所得產(chǎn)物離心取上清液，即得；