[發明專利]基于DNA水凝膠的功能性核酸保護性載體及其制備方法、應用

有效

• 申請號: 201710557313.0
• 申請日: 2017-07-10
• 公開（公告）號: CN107281497B
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發明（設計）人: 張川;丁飛;牟全兵
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: A61K47/59
• 分類號: A61K47/59;A61K47/64;A61K47/69;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司 31236
• 代理人: 葉龍飛;胡晶

1.一種基于DNA水凝膠的功能性核酸保護性載體，其特征在于，由包括側鏈修飾DNA 的可降解高分子聚合物、功能性核酸和交聯劑自組裝所得；所述的功能性核酸為siRNA、mRNA、質粒、非編碼RNA、反義寡核苷酸或Cas9-sgRNA中的一種。

2.根據權利要求1所述的基于DNA水凝膠的功能性核酸保護性載體，其特征在于，所述的側鏈修飾DNA 的可降解高分子聚合物由側鏈帶有疊氮基團的可降解高分子與二苯基環辛炔修飾的DNA連接所得。

3.根據權利要求2所述的基于DNA水凝膠的功能性核酸保護性載體，其特征在于，可降解高分子聚合物為聚己內酯、聚磷酸酯、聚乳酸、聚乳酸-羥基乙酸共聚物或聚肽中的一種。

4.根據權利要求1所述的基于DNA水凝膠的功能性核酸保護性載體，其特征在于，所述的側鏈修飾DNA 的可降解高分子聚合物中DNA的堿基隨機選取，但堿基個數大于8個；所述的交聯劑由兩條部分互補DNA鏈組成，其中，互補部分的堿基序列是隨機的，但堿基個數大于12個，非互補部分的DNA能夠與可降解高分子聚合物側鏈的DNA 相互配對。

5.根據權利要求1所述的基于DNA水凝膠的功能性核酸保護性載體，其特征在于，當功能性核酸為siRNA時，siRNA既為功能性核酸，又是交聯劑，其中，siRNA的反義鏈與正義鏈的一端分別多出一段能夠與可降解高分子聚合物側鏈的DNA 相互配對的核酸序列。

6.根據權利要求1所述的基于DNA水凝膠的功能性核酸保護性載體，其特征在于，當功能性核酸不是siRNA時，該功能性核酸一端多出一段能夠與可降解高分子聚合物側鏈的DNA相互配對的核酸序列。

7.一種根據權利要求1~6任一所述的基于DNA水凝膠的功能性核酸保護性載體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）以開環聚合的方式合成側鏈帶有疊氮基團的可降解高分子，然后該可降解高分子與二苯基環辛炔修飾的DNA反應，得到側鏈修飾DNA 的可降解高分子聚合物；

（2）再將側鏈修飾DNA 的可降解高分子聚合物溶解在水中，加入功能性核酸反應，使得功能性核酸與側鏈修飾DNA 的可降解高分子聚合物完全相互配對，配對完成后，還加入交聯劑與側鏈修飾DNA 的可降解高分子聚合物完全相互配對，即制得DNA水凝膠水溶液。

8.根據權利要求7所述的基于DNA水凝膠的功能性核酸保護性載體的制備方法，其特征在于，所述的側鏈修飾DNA 的可降解高分子聚合物中的DNA與交聯劑的摩爾比為8：1~2：1時，所制得的DNA水凝膠的尺寸為70nm-1.3μm。

9.權利要求1~6任一所述的基于DNA水凝膠的功能性核酸保護性載體或權利要求7、8任一所述的制備方法制得的基于DNA水凝膠的功能性核酸保護性載體在制備基于基因療法治療疾病的核酸類藥物的用途。