[發明專利]一種檢測禽白細胞介素17a含量的方法及其專用試劑盒

有效

• 申請號: 201710556090.6
• 申請日: 2017-07-10
• 公開（公告）號: CN107389920B
• 公開（公告）日: 2019-07-12
• 發明（設計）人: 鄭世軍;趙明亮;王永強;李曉齊;曹紅
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C07K16/24
• 分類號: C07K16/24;G01N33/535
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種檢測或輔助檢測待測樣品中chIL-17a含量的方法，所述方法為非疾病診斷方法，所述方法包括如下步驟：

（1）用碳酸鹽緩沖液將抗chIL-17a的單克隆抗體1稀釋為8 μg/mL包被到酶標板上；所述包被的條件為4 ℃包被12 h；所述碳酸鹽緩沖液的濃度為0.05 M，pH為9.6；所述抗chIL-17a的單克隆抗體1是由保藏號為CGMCC No.13830的雜交瘤細胞株ZML-1分泌的；

（2）用質量分數為5%的脫脂奶溶液封閉（1）得到的酶標板，洗滌；所述封閉的條件為4℃封閉12 h；

（3）用BSA溶液將chIL-17a標準品或待測樣品稀釋后加入（2）得到的酶標板中，孵育，洗滌；

（4）用BSA溶液將生物素化的抗chIL-17a的單克隆抗體2稀釋至1.0 μg/mL后加入（3）得到的酶標板中，孵育，洗滌；抗chIL-17a的單克隆抗體2是由保藏號為CGMCC No.13831的雜交瘤細胞株ZML-2分泌的；

（5）向（4）得到的酶標板中加入HRP標記的鏈霉親和素，孵育，洗滌；

（6）向（5）得到的酶標板中加入底物顯色，顯色后加入終止液終止反應；

（7）用酶標儀檢測加入chIL-17a標準品的各孔的吸光度值，以chIL-17a標準品濃度為橫坐標、以酶標儀的讀數為縱坐標繪制標準曲線；

（8）用酶標儀檢測加入待測樣品的孔的吸光度值，將吸光度值代入所述標準曲線，即得待測樣品中chIL-17a的濃度；

所述BSA溶液的質量分數為1%。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：

所述步驟（3）中，所述孵育時間為1 h；

所述步驟（4）中，所述孵育時間為1 h；

所述步驟（5）中，所述孵育時間為30 min；

所述用酶標儀檢測吸光度值時的波長為450 nm；

所述洗滌的次數為5次。