[發(fā)明專利]快速無(wú)標(biāo)記的區(qū)分正常血紅蛋白和含鐵血黃素的成像方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710548472.4
• 申請(qǐng)日: 2017-07-07
• 公開（公告）號(hào): CN107478637B
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 季敏標(biāo);張莉麗;鄒翔;陳亮;毛穎
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué);復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院
• 主分類號(hào): G01N21/65
• 分類號(hào): G01N21/65
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 陸飛;陸尤

1.一種快速無(wú)標(biāo)記的區(qū)分正常血紅蛋白和含鐵血黃素的成像方法，其特征在于，具體步驟如下：

（1）利用基于飛秒時(shí)間分辨的泵浦-探測(cè)光譜成像系統(tǒng)研究正常血紅蛋白和含鐵血黃素在不同探測(cè)波長(zhǎng)下的泵浦-探測(cè)光譜特征和差異：

泵浦光波長(zhǎng)固定為1040 nm，探測(cè)光的波長(zhǎng)680-1030 nm可調(diào)；

用泵浦-探測(cè)光譜成像系統(tǒng)研究血紅蛋白和含鐵血黃素的標(biāo)準(zhǔn)樣品，得到不同探測(cè)波長(zhǎng)下的血紅蛋白和含鐵血黃素的衰減曲線；其中，含鐵血黃素在不同的探測(cè)波長(zhǎng)下的衰減曲線無(wú)明顯差異：都表現(xiàn)為正信號(hào)，且有一個(gè)長(zhǎng)達(dá)6ps以上的長(zhǎng)的衰減拖尾；血紅蛋白隨著探測(cè)波長(zhǎng)的紅移表現(xiàn)出：在短波長(zhǎng)探測(cè)即800nm時(shí)全為正信號(hào)且呈現(xiàn)雙指數(shù)衰減，衰減時(shí)間分別為0.5ps和2ps；過渡到長(zhǎng)波探測(cè)即850nm時(shí)，在極短時(shí)間內(nèi)表現(xiàn)為正信號(hào)，之后迅速衰減為負(fù)信號(hào)且有較長(zhǎng)的衰減時(shí)間；

（2）選擇合適的探測(cè)波長(zhǎng)，同時(shí)對(duì)正常血紅蛋白和含鐵血黃素進(jìn)行成像：

鑒于正常血紅蛋白在大于800nm的探測(cè)波長(zhǎng)下開始表現(xiàn)出負(fù)信號(hào)且隨著探測(cè)波長(zhǎng)的紅移負(fù)信號(hào)不斷增強(qiáng)，而含鐵血黃素始終表現(xiàn)為正信號(hào)；故選擇大于800nm的探測(cè)波長(zhǎng)，在正常血紅蛋白負(fù)信號(hào)對(duì)應(yīng)的脈沖時(shí)間延遲下即1ps附近，同時(shí)對(duì)正常血紅蛋白和含鐵血黃素進(jìn)行成像，且分別提取圖像中的負(fù)信號(hào)/正信號(hào)重構(gòu)出正常血紅蛋白和含鐵血黃素的圖像；

（3）結(jié)合受激拉曼散射技術(shù)和泵浦-探測(cè)光技術(shù)，有選擇性的對(duì)組織、正常血紅蛋白和含鐵血黃素進(jìn)行三通道成像：

受激拉曼散射技術(shù)和泵浦-探測(cè)光技術(shù)共用相同的成像系統(tǒng)，組織的主要組成成分脂和蛋白的受激拉曼散射峰剛好對(duì)應(yīng)800nm的泵浦光和1040nm的斯托克斯光，且受激拉曼散射只發(fā)生在泵浦光脈沖和探測(cè)光脈沖完全重合的時(shí)間尺度內(nèi)即0.5ps以內(nèi)；正常血紅蛋白在800nm探測(cè)波長(zhǎng)下2 ps左右就快速衰減到0；含鐵血黃素在800 nm探測(cè)波長(zhǎng)下一直到6ps都沒有衰減到0；因此選擇800nm的探測(cè)波長(zhǎng)，分別掃描時(shí)間延遲線到0ps、0.7ps、3ps即可有選擇性的探測(cè)組織、正常血紅蛋白和含鐵血黃素的圖像，三通道疊加即得到正常血紅蛋白和含鐵血黃素在組織中的分布。