[發(fā)明專利]lncRNA作為生物標志物在肝癌診療中的用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710547948.2
• 申請日: 2017-07-06
• 公開（公告）號: CN107267625B
• 公開（公告）日: 2020-04-10
• 發(fā)明（設計）人: 王冬國;陳佳玉;楊林軍
• 申請（專利權(quán)）人: 臺州市立醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;A61K31/7105;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京預立生科知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11736
• 代理人: 高倩倩

技術領域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領域，涉及l(fā)ncRNA作為生物標志物在肝癌診療中的用途，具體的涉及生物標志物LOC101927480。

背景技術

原發(fā)性肝癌是世界范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率居所有癌癥的第六位，死亡率居所有癌癥的第二位。根據(jù)病理分型，原發(fā)性肝癌可分為肝細胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)、肝內(nèi)膽管細胞癌、肝細胞癌-肝內(nèi)膽管細胞癌混合型等不同類型。原發(fā)性肝癌中超過90％為肝細胞癌。肝癌的發(fā)生是一個多步驟、復雜的過程，多是在肝臟既有慢性炎癥及其改變了的肝臟微環(huán)境基礎上，眾多癌基因或抑癌基因發(fā)生突變，特別是其表達逐漸發(fā)生改變，最終誘發(fā)肝癌的發(fā)生。由于在肝癌的早期，患者多沒有典型臨床癥狀和體征，臨床上難以發(fā)現(xiàn)，而一旦出現(xiàn)典型癥狀，多已是中、晚期肝癌，此時往往伴隨著肝癌的肝內(nèi)外轉(zhuǎn)移，由于肝癌細胞對化療的不敏感性，目前對全身播散的肝癌細胞尚無有效治療方法。隨著現(xiàn)代細胞分子生物學的進展，現(xiàn)已證明肝癌的形成多伴隨一系列分子及信號通路的異常。因此，從分子水平探索肝癌發(fā)生發(fā)展的機制，并將特征性分子作為抗腫瘤靶點，可為臨床預防和治療肝癌開辟新的途徑。

隨著高通量測序技術的發(fā)展，對肝癌全基因組及轉(zhuǎn)錄組測序的結(jié)果表明肝癌具有顯著的分子特征異質(zhì)性，如有些肝癌樣本中只存在少至5個基因的突變，也有些肝癌樣本中存在多至121個基因的突變，但是肝癌中尚沒有發(fā)現(xiàn)普遍存在的的基因突變。因此基因的表達調(diào)控，特別是表觀遺傳修飾，如DNA甲基化、組蛋白修飾及非編碼RNA表達的異常，對肝癌中眾多差異表達基因的調(diào)控作用值得深入探討。

長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA,1ncRNA)是一類轉(zhuǎn)錄本長度超過200nt的，不具有蛋白質(zhì)編碼能力的RNA分子。相對于蛋白編碼序列及microRNA，lncRNA的研究還處于起步階段，其功能有待進一步闡明。最近有研究表明在許多病理情況下，包括腫瘤中，lncRNAs的表達水平發(fā)生改變，并且在生理及病理情況下lncRNAs可有多種功能，如調(diào)節(jié)細胞增殖、凋亡、細胞周期、細胞遷移等。lncRNAs參與基因組印記、染色質(zhì)修飾、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、mRNA穩(wěn)定性、蛋白質(zhì)翻譯調(diào)節(jié)、microRNA功能調(diào)節(jié)、蛋白質(zhì)功能調(diào)節(jié)等多種重要的信號轉(zhuǎn)導調(diào)控過程。因此研究lncRNA在肝癌中的作用，對于揭示肝癌發(fā)病的分子機制以及肝癌的治療具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

為了彌補現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明的目的之一，提供一種診斷早期肝癌的產(chǎn)品，使患者在早期就得以治療，進而提高生存率和生活質(zhì)量。

本發(fā)明的目的之二，提供一種治療手段和藥物組合物，實現(xiàn)肝癌的精準分子治療。

本發(fā)明的目的之三，提供一種篩選預防或治療肝癌潛在物質(zhì)的方法。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案：

本發(fā)明提供了檢測LOC101927480的試劑在制備診斷肝癌的產(chǎn)品中的應用。所述試劑包括RT-PCR、實時定量PCR、原位雜交、northern blotting、芯片或高通量測序平臺檢測LOC101927480表達水平用試劑。

進一步，所述試劑選自：

特異性識別LOC101927480的探針；或

特異性擴增LOC101927480的引物。

進一步，所述特異性擴增LOC101927480的引物序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。

本發(fā)明提供了一種診斷肝癌的產(chǎn)品，所述產(chǎn)品所述產(chǎn)品包括檢測樣本中LOC101927480表達水平的試劑。所述“樣本”包括(但不限于)細胞、組織、臟器、體液(血液、淋巴液等)、消化液、咳痰、肺胞支氣管清洗液、尿、糞便等。優(yōu)選的，所述樣本為組織、血液。

進一步，所述產(chǎn)品包括芯片、制劑或試劑盒；其中，所述芯片包括固相載體以及固定在固相載體的寡核苷酸探針，所述寡核苷酸探針包括用于檢測LOC101927480轉(zhuǎn)錄水平的針對LOC101927480的寡核苷酸探針；所述試劑盒包括用于檢測LOC101927480轉(zhuǎn)錄水平的引物或芯片。

固相載體可采用基因芯片領域的各種常用材料，例如但不限于尼龍膜，經(jīng)活性基團(如醛基、氨基等)修飾的玻片或硅片、未修飾的玻片、塑料片等。