[發明專利]一個煙草陽離子/氯離子共轉運基因及其應用

有效

• 申請號: 201710547704.4
• 申請日: 2017-07-06
• 公開（公告）號: CN107287211B
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 張慧;金立鋒;徐國云;周會娜;李鋒;翟妞;劉萍萍;陳霞;陳千思;鄭慶霞;申曉曄
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司鄭州煙草研究院
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82;A01B79/02
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時立新

1.一種用于沉默煙草陽離子/氯離子共轉運基因NtCCC的瞬時沉默載體，其特征在于，

所述煙草陽離子/氯離子共轉運基因NtCCC，包括1113bp個堿基，該基因與氯離子轉運相關，其堿基序列如SEQ ID NO.1所示；其中第5位-477位核苷酸為特異性核酸片段；

所述瞬時沉默載體，通過如下構建方法獲得：

將所述煙草陽離子/氯離子共轉運基因NtCCC的特異性核苷酸片段連接到瞬時表達載體TRV上，轉化大腸桿菌DH5α，從而構建獲得瞬時表達載體TRV-NtCCC。

2.如權利要求1所述用于沉默煙草陽離子/氯離子共轉運基因NtCCC的瞬時沉默載體，其特征在于，VIGS瞬時沉默載體構建時引物序列設計如下：

NtCCC-F：5’- CGACGACAAGACCCTCCTGCAATAAACATCCAAT-3’，

NtCCC-R：5’- GAGGAGAAGAGCCCTTACTGCCTTGTTTGCAAC-3’。

3.利用權利要求1所述用于沉默煙草陽離子/氯離子共轉運基因NtCCC的瞬時沉默載體所構建的NtCCC瞬時沉默植物新品種的方法，其特征在于，利用病毒誘導的基因沉默技術，將瞬時沉默載體TRV-NtCCC轉化植物后，篩選、鑒定獲得陽離子/氯離子共轉運基因NtCCC瞬時沉默植株，相較于未沉默植株，NtCCC基因沉默植株中氯離子含量得到明顯富集。