[發明專利]融合蛋白及其應用

在審

• 申請號: 201710547683.6
• 申請日: 2017-07-06
• 公開（公告）號: CN107893052A
• 公開（公告）日: 2018-04-10
• 發明（設計）人: 李宗海;吳秀奇;王華茂;蔣華;石必枝
• 申請（專利權）人: 科濟生物醫藥（上海）有限公司;上海市腫瘤研究所
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C07K19/00;C12N15/62;G01N33/569;C07K16/28;C07K16/30;C07K16/32;A61K47/68
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司31266
• 代理人: 崔佳佳,馬莉華

1.一種在表面表達嵌合抗原受體的免疫效應細胞，其特征在于，所述免疫細胞還表達式I所示的融合蛋白，

Z-A-L-B

I

其中，Z是任選的信號肽；

A是抗體結合區；

L是任選的接頭部分；

B是內吞功能區。

2.一種表達嵌合抗原受體的免疫效應細胞，其特征在于，所述免疫細胞還表達一融合蛋白，該融合蛋白含有抗體結合區和內吞功能區。

3.如權利要求1或2所述的免疫效應細胞，其特征在于，所述的抗體結合區選自以下抗原或其片段：EGFRvIII、EGFR、CD20、CD22、CD19、BCMA、proBDNF前體蛋白、GPC3、CLD18.2、CLD6、間皮素、PD-L1、PD-1、WT-1、IL13Ra2、Her-2、Her-1、Her-3；

優選的，所述的抗體結合區含有以下任一氨基酸序列或者含有與以下氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％同一性的氨基酸序列：SEQ ID NO:28、29、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43；

更優的，所述的抗體結合區含有以下任一氨基酸序列的活性片段：SEQ ID NO:28、29、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43。

4.如權利要求3所述的免疫效應細胞，其特征在于，所述抗體結合區與EGFR抗體特異性結合。

5.如權利要求1或2所述的免疫效應細胞，其特征在于，所述內吞功能區衍生自葉酸受體、LDL、CD30、CD33、CD3、EGFR、TFR1；優選衍生自葉酸受體和CD30；更優地，所述內吞功能區具有SEQ ID NO：32或44所示氨基酸序列，或者與SEQ ID NO：32或44具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％同一性的氨基酸序列，或者為SEQ ID NO:32或44所示的氨基酸序列的活性片段。

6.如權利要求1所述的免疫效應細胞，其特征在于，所述信號肽為葉酸受體信號肽。

7.如權利要求6所述的免疫效應細胞，其特征在于，所述融合蛋白具有SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列或者含有與SEQ ID NO:10具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％同一性的氨基酸序列。

8.如權利要求1或2所述的免疫效應細胞，其特征在于，所述融合蛋白與嵌合抗原受體在免疫效應細胞表面單獨表達或融合表達，優選單獨表達。

9.一種表達嵌合抗原受體的免疫效應細胞，其特征在于，所述細胞還表達內吞功能區，所述的內吞功能區能將與所述內吞功能區結合的物質轉運入所述的免疫效應細胞內。

10.如權利要求9所述的免疫效應細胞，其特征在于，所述內吞功能區衍生自葉酸受體、LDL、CD30、CD33、CD3、EGFR、TFR1；優選衍生自葉酸受體和CD30；更優地，所述內吞功能區具有SEQ ID NO:32或44所示氨基酸序列，或者與SEQ ID NO:32或44具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％同一性的氨基酸序列，或者為SEQ ID NO:32或44所示的氨基酸序列的活性片段。

11.如權利要求9或者10所述的免疫效應細胞，其特征在于，所述內吞功能區與嵌合抗原受體在免疫效應細胞表面單獨表達或融合表達，優選單獨表達。

12.式I所示的融合蛋白，

Z-A-L-B

I

其中，Z是任選的信號肽；

A是抗體結合區；

L是任選的接頭部分；

B是內吞功能區。

13.一種融合蛋白，所述融合蛋白包含抗體結合區和內吞功能區。