[發明專利]一種發酵乳桿菌HY01及其用途

在審

• 申請號: 201710545674.3
• 申請日: 2017-07-06
• 公開（公告）號: CN107227275A
• 公開（公告）日: 2017-10-03
• 發明（設計）人: 索化夷;陳孝勇;李鍵;趙欣;騫宇;李洋
• 申請（專利權）人: 西南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23L33/135;A23C9/123;A23C9/16;C12R1/225
• 代理公司: 北京匯澤知識產權代理有限公司11228
• 代理人: 武君

1.一種發酵乳桿菌(Lactobacillus fermentum)HY01，其特征在于，所述發酵乳桿菌于2015年12月29日保藏于中國典型培養物保藏中心(CCTCC)，保藏編號為CCTCCM2015792。

2.如權利要求1所述的發酵乳桿菌HY01，其特征在于，所述發酵乳桿菌的生物學特性如下：

1）形態學特征：菌體特征，呈革蘭氏染色陽性，細胞桿狀，無芽孢，兩端圓形；菌落特征，在MRS固體培養基上形成明顯的菌落，圓形，邊緣整齊，乳白色，菌落凸起，表面濕潤光滑，不產生色素；

2）體內耐受特征:在pH 3.0的人工胃液中處理3 h后的存活率為104.60±6.50%；在0.3%膽鹽濃度下的生長效率為無膽鹽培養的21.10±0.24。

3.如權利要求1或2所述發酵乳桿菌HY01在用于制備調節腸道功能或/和預防便秘的發酵食品中的用途。

4.如權利要求3所述的發酵乳桿菌HY01的用途，其特征在于，所述發酵食品為含有發酵乳桿菌的乳酸菌奶飲料、乳粉、膠囊制品和發酵乳中的一種或多種。

5.如權利要求4所述的發酵乳桿菌HY01的用途，其特征在于，所述乳酸菌奶飲料是按照下述步驟制備得到的：

原料乳在95~100 ℃下加熱殺菌15~30 min或在125~140℃下高溫熱殺菌2~5 s，冷卻到4 ℃，加入含所述發酵乳桿菌的工作發酵劑，使其濃度達到10⁶ cfu/mL以上，在2~8℃冷藏保存。

6.如權利要求4所述的發酵乳桿菌HY01的用途，其特征在于，所述乳粉是按照下述步驟制備得到的：

原料乳在95~100℃下加熱殺菌15~30 min或在125~140℃下高溫熱殺菌2~5 s ，然后冷卻到37 ℃，再以原料乳體積的4%接菌量接種含所述發酵乳桿菌的工作發酵劑，35~40℃下發酵16 h，得到發酵乳桿菌發酵乳；所述發酵乳桿菌發酵乳和滅菌后的原料乳按照1:3（V:V）配比加入，進行均質，真空濃縮、噴霧干燥得到含發酵乳桿菌的乳粉。

7.如權利要求4所述的發酵乳桿菌HY01的用途，其特征在于，所述膠囊制品是按照下述步驟制備得到的：

將原料乳在125~140 ℃高溫熱殺菌2~5 s，然后冷卻至35~40 ℃，以原料乳體積的4%接菌量接種含所述發酵乳桿菌的工作發酵劑，在35~40℃下發酵15~20 h，得到發酵乳桿菌發酵乳；將所述發酵乳桿菌發酵乳和滅菌后的原料乳按照以1:3~1:5（V:V））配比加入，均質，真空濃縮、噴霧干燥處理后得到乳粉，將得到含有發酵乳桿菌的膠囊制品。

8.如權利要求4所述的發酵乳桿菌HY01的用途，其特征在于，所述發酵乳是按照下述步驟制備得到的：

原料乳在95~100℃下加熱殺菌15~30 min或在125~140℃下高溫熱殺菌2~5 s，然后冷卻到35~40 ℃，再按照3~5%（體積）加入含發酵乳桿菌的工作發酵劑，再加入3~5%（體積）可共生的用于制備發酵乳制品的發酵劑，混勻后在35~40 ℃下混菌發酵至滴定酸度以乳酸計0.6~0.7%，然后冷卻至2~8 ℃，再進行冷藏保存得到含有發酵乳桿菌的發酵乳。

9.如權利要求5～8中任一項所述的發酵乳桿菌HY01的用途，其特征在于，所述的原料乳選自脫脂奶、鮮奶和復原奶中的一種或多種。

10.如權利要求5～8中任一項所述的發酵乳桿菌HY01的用途，其特征在于，所述含發酵乳桿菌的工作發酵劑的制備方法包括如下步驟：

發酵乳桿菌的原始菌種在溫度-80 ℃下以磁珠形式保存，或者在溫度2~8 ℃下以冷凍干燥菌粉的形式保存備用;

將所述發酵乳桿菌的原始菌種接種于12%（重量）的脫脂乳中，110 ℃滅菌10 min，在37 ℃條件下培養14~16 h至凝乳，連續培養活化兩代，用作母發酵劑；將所述母發酵劑按3~5%（體積）接種于滅菌乳中，培養14~16 h至凝乳，至該凝乳中的活菌數約10⁹ cfu/mL，得到工作發酵劑；

或將所述發酵乳桿菌的原始菌種接種于MRS液體培養基中，在37℃條件下培養12~16h進行活化，連續活化兩代，然后將活化培養物按2~4%（體積）接種于MRS培養基中，培養16~18 h，在4 ℃條件下3000 r/min離心15 min，去除上清夜，得到細胞沉淀，將沉淀用無菌脫脂乳制成懸浮液，得到工作發酵劑。