[發明專利]一種羊棲菜水溶性多糖的制備方法

在審

• 申請號: 201710544846.5
• 申請日: 2017-07-06
• 公開（公告）號: CN107266607A
• 公開（公告）日: 2017-10-20
• 發明（設計）人: 李冰
• 申請（專利權）人: 浦江縣歐立生物技術有限公司
• 主分類號: C08B37/04
• 分類號: C08B37/04
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙)11548
• 代理人: 李靜

技術領域

本發明涉及多糖提取技術領域，特別是涉及一種羊棲菜水溶性多糖的制備方法。

背景技術

羊棲菜多糖((sargassum fusiforme polysaccharides, SFPS)是從全藻中提取到的一種水溶性多糖，包括褐藻酸(alginic acid)、褐藻多糖硫酸（fucoidan, FCD)及褐藻淀粉(laminaran)。褐藻酸主要是以β-1，4鍵相結合的D-甘露糖醛酸聚合物，在羊棲菜中含量較高，占20.8%，褐藻多糖硫酸酷主要由L-巖藻糖和硫酸根組成，其含量較少，一般在0.5~10%之間。根據組成單糖的是否一致性，多糖可分為均多糖和雜多糖兩種，近年來，許多研究表明羊棲菜中含有較多的水溶性褐藻硫酸化多糖，又有不同種 屬的褐藻硫酸化多糖的生物活性相繼被報道多個方面的生物活性，包括抗氧化、抗凝血、抗 炎、抗癌、抗腫瘤、免疫調節等生物學功能。

目前，褐藻多糖提取技術主要有酶解法、堿解法、酸解法、水提取法、超聲波輔助， 但現有羊棲菜多糖的提取方法中，都存有不足，包括成本太高，操作復雜，耗能耗材較多，多 糖含量和純度不高等。

現有技術，如中國發明授權專利文獻，授權公告號：CN 101250232 B，該發明設計一種羊棲菜活性多糖提取工藝，采取四步提取法，即結合了超聲波提取、水提、堿提、熱水提、超聲波技術，不僅提高了羊棲菜多糖提取率，而且防止多糖提取過程中對羊棲菜生物活性的破壞，除了賦予提取物多糖的特性外，該工藝所制備的羊棲菜活性多糖還具有高抗氧化性，特別適合應用于化妝品領域。另外，該工藝所生產的羊棲菜多糖采用活性炭吸附及AB-8 大孔吸附樹脂進行脫色、去腥相結合方法，解決了羊棲菜等海洋褐藻類多糖去腥及脫色關鍵技術，有效提高多糖純度、外觀品質，并保證脫腥脫色后多糖的高抗氧化性，但是細胞破壁方面還不太理想，不利于多糖的提取率。

發明內容

本發明的目的在于提供一種羊棲菜水溶性多糖的制備方法，細胞破壁率高，多糖的得率高，對多糖活性的影響低，活性成分不易被破壞。

本發明為實現上述目的，所采取的技術方案為：一種羊棲菜水溶性多糖的制備方法，包括：多糖的超聲浸取、去蛋白、醇沉干燥，具體操作步驟為：

（1）多糖的超聲浸取的步驟為：將羊棲菜粗粉加入0.7-1%NaCl溶液、為粗粉重量的0.03~0.07%活性多肽， 活性多肽的氨基酸序列為：MKGLSFVLLVLLLMMPDGEGTDPEMQYWTCGYRGLCRFCAQYFVGHHGCPRRYRCCAIRA。混勻后超聲波處理，超聲波處理溫度為3-5℃，時間為2-3h，置于3-5℃抽濾6-8h，抽濾液在3-5℃，以4500~8000rpm下離心20-25min，取上清液，得粗蛋白液，該活性肽具有親水性和親脂性，親水性使其溶于蒸餾水中，親脂性使其與螺旋藻細胞膜結合，使細胞膜下形成小孔，致使細胞內的物質泄漏，提高粗蛋白提取的工作效率，也提高活性蛋白的得率，該步驟利用活性肽和低鹽溶液，結合溶脹法和超聲波法進行細胞破碎，大大縮短了提取時間，提取效果好，粗蛋白液中蛋白含量高，避免了破碎處理過程中需避免因升溫及機械力引起的蛋白質變性；

（2）去蛋白步驟為：將提取液調pH值到7.0，減壓真空濃縮，用Sevage法去蛋白2-4次，上清液用5-10:1顆粒活性炭吸附后，離心，取上清液，過濾，收集濾液，采用Sevage法去蛋白，條件溫和，不會引起多糖的變性，

（3）醇沉干燥過程為：向去除蛋白的液體內加入86%~92%的乙醇溶液，攪拌10-25min，過濾，將濾液真空干燥得多糖提取物，醇沉干燥過程中真空干燥的條件為：真空度為3000-5000Pa，溫度為60-70℃，時間為25-35min，多糖溶于熱水而不溶于高濃度的乙醇，在加入乙醇溶液后，羊棲菜多糖以沉淀的形式從水相中析出，所得的羊棲菜多糖純度高，品質好，提高了產品的經濟價值。

與現有技術相比，本發明的有益效果為：1）本發明首先對羊棲菜進行超聲浸取，利用活性肽和低鹽溶液，結合溶脹法和超聲波法進行細胞破碎，大大縮短了提取時間，提取效果好，粗蛋白液中蛋白含量高，有利于提高多糖的得率和活性；2）符合綠色環保的要求，且提取方法合理，操作簡單，不需要特殊的儀器設備，降低了生產成本，為工業化應用提供了有利條件；3）本提取方法獲得的羊棲菜水溶性多糖具有優異的抗氧化、抗凝血、抗 炎、抗癌、抗腫瘤、免疫調節等生物學功能。

具體實施方式

以下結合實施例作進一步詳細描述：

實施例1：