[發明專利]一種檢測乙二胺四乙酸及其螯合物的膠體金試紙及其制備和檢測方法

有效

• 申請號: 201710542323.7
• 申請日: 2017-07-05
• 公開（公告）號: CN107247142B
• 公開（公告）日: 2019-05-10
• 發明（設計）人: 孔濤;王國永;張淑慧;楊自軍;楊帆;張才;張夢雨;李芳源;敬夢瑤;張柏豪;王杰;張倩文
• 申請（專利權）人: 河南科技大學
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/531;G01N33/543
• 代理公司: 洛陽公信知識產權事務所(普通合伙) 41120
• 代理人: 程茗

本發明涉及一種檢測乙二胺四乙酸及其螯合物的膠體金試紙及其制備和檢測方法，膠體金試紙，包括反應膜、樣本墊、結合物釋放墊、吸水墊和背襯，其特征在于，所述反應膜上具有包被乙二胺四乙酸?載體蛋白偶聯物的測試區和包被羊抗鼠IgG的質控區，所述結合物釋放墊包被乙二胺四乙酸單克隆抗體?膠體金標記物；將待測樣品滴入試劑卡孔內，當乙二胺四乙酸及其螯合物在樣品中濃度低時，膠體金抗體在層析過程中會被固定在反應膜上的乙二胺四乙酸偶聯物結合，在測試區質控區內會出現各一條紅色條帶；濃度高時，則反之；本發明能準確且靈敏的檢測乙二胺四乙酸及其螯合物。

技術領域

本發明涉及一種膠體金試紙，具體的說是一種檢測乙二胺四乙酸及其螯合物的膠體金試紙及其制備和檢測方法。

背景技術

乙二胺四乙酸(EDTA)是個含有羧基和氨基的螯合劑，它具有廣泛的配位能力，幾乎能與所有過渡重金屬離子生成穩定的水溶性螯合物。由于EDTA的結構特點，現已廣泛地應用在化學分析和工業生產中。由于EDTA的結構特點，它能與50多種金屬離子形成可溶性的螯合物，是一種高效螯合劑，尤其與一些有害金屬離子形成的螯合物的穩定性極好。

EDTA 的生物降解性能較差，另外，EDTA 會長時間吸附于土壤顆粒上，EDTA 在土壤中殘留期可能較長。EDTA 使用可能帶來的環境風險主要表在以下幾個方面：第一，EDTA可能導致土壤養分及礦質元素（K、Fe、Ca、Mn）的流失；第二，EDTA 的加入導致重金屬活化，致使重金屬更容易遷移，引起地表水、深層土壤、地下水等的二次污染；第三，EDTA 對土壤微生物、植物可能存在生物毒害；第四，EDTA 在土壤中的殘留及其潛在風險。

隨著EDTA的廣泛應用，含有微量EDTA的工業廢水流入江河湖泊，在環境中主要以重金屬螯合物形式存在，這些重金屬螯合物為有害和難解離物質，造成重金屬的擴散，嚴重地污染了環境。近年來被發現明顯富集在瑞士、德國、美國的河流和湖泊中。這些自然水中的EDTA來源于一些工業洗滌制品、攝影業制品等工廠。由于在自然水中EDTA和金屬離子是絡合存在的，所以河水中EDTA與重金屬的富集程度是相一致的。由于EDTA的性質，使它成為重金屬的保護傘，使得在自然水中重金屬的富集對環境造成污染，這些已引起國內外環保部門的重視。瑞士的洗滌品協會已通過一項決議，即洗滌品中將不允許含有EDTA。它對水環境造成的污染，越來越引起人們的重視，已成為一個世界性的問題。并且EDTA隨工業廢水的排放和許多有害重金屬形成配合物，增大了重金屬的可溶性，造成重金屬的擴散，危害較大，已引起國內外環境監測人員的重視。

另外，在人體內不能被分解而排出體外，可引起人體缺鈣，也可引起暫時性血壓下降，腎臟功能障礙，所以EDTA在人體內的蓄積會危害健康。我國規定罐頭食品中EDTA二鈉鹽的最大使用量為0.25 g/kg。

目前，乙二胺四乙酸及其螯合物的檢測方法有滴定法、高效液相色譜法(HPLC)。但這些方法檢測費時費力且成本高，與其它檢測系統相比，一次檢測樣品量少，檢測時間長，不適合現場快速檢測，僅作為少數實驗室的確證方法，滿足不了環境和農產品檢測快速簡便的需要。

而基于乙二胺四乙酸特異性抗體的免疫檢測方法為其檢測提供了一種新的策略。免疫法目前越來越受到重視，因其檢測限低，單個樣品檢測成本低（如ELISA法），尤其適合應用于大批樣品的檢測，尤其是免疫層析法，檢測速度快，靈敏度高，與HPLC、GC-MS檢測有較高一致性，而且非常適合活體動物的檢測。而且成本低，無需大型儀器，而且可以直接對尿液、飼料、洗滌劑、水樣等樣品進行檢測，適用于現場檢測。但是，目前還沒有檢測乙二胺四乙酸及其螯合物的商品化的試劑盒和試紙條。因此，研究和建立具有我國自主知識產權的乙二胺四乙酸及其螯合物免疫學檢測方法，對提高我國環境和農產品乙二胺四乙酸及其螯合物控制和監測水平，保障環境及農產品質量安全和消費者的健康具有重要意義。

發明內容

本發明目的是為解決上述技術問題的不足，提供一種檢測乙二胺四乙酸及其螯合物的膠體金試紙及其制備和檢測方法，能準確且靈敏的檢測乙二胺四乙酸及其螯合物。