[發(fā)明專利]一株亞羅解脂酵母及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710540443.3
• 申請日: 2017-07-05
• 公開（公告）號: CN107164249B
• 公開（公告）日: 2019-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李江華;張娟;陳堅;邱學(xué)良;堵國成;朱政明
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12P7/18;C12R1/645
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 張勇

本發(fā)明公開了一株亞羅解脂酵母及其應(yīng)用，屬于工業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明分離得到的菌株命名為亞羅解脂酵母BBE?17(Yarrowia Lipolytica BBE?17)，以葡萄糖為碳源發(fā)酵生產(chǎn)赤蘚糖醇，無需補料或連續(xù)發(fā)酵即可實現(xiàn)高轉(zhuǎn)化率，發(fā)酵全程無需調(diào)節(jié)pH，簡化了工藝操作，具有一定的產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用潛力。該菌還能以D?木糖母液為碳源發(fā)酵生產(chǎn)木糖醇，為利用非糧原料生物法制備多元醇產(chǎn)品提供了新的潛力途徑。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一株亞羅解脂酵母及其應(yīng)用，屬于工業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

亞羅解脂酵母(英文：Yarrowia Lipolytia其它中文名稱：解脂亞羅酵母、耶羅維亞解脂酵母、解脂亞洛酵母等)在生物制造領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用。例如：CN03817060.4公開了一種采用亞羅解脂酵母制造檸檬酸的技術(shù)；CN200910199533.6和CN201511019785.8公開了一種利用亞羅解脂酵母生產(chǎn)γ-癸內(nèi)酯的技術(shù)；CN201210463413.4和CN201310282059.X公開了一種用亞羅解脂酵母生產(chǎn)赤蘚糖醇的技術(shù)；CN201610304562.4公開了一種利用亞羅解脂酵母生產(chǎn)環(huán)氧油酸的技術(shù)；CN201010578594.6和CN201310481832.5公開了一種利用亞羅解脂酵母生產(chǎn)α–酮戊二酸的技術(shù)；CN201410243227.9公開了一種利用亞羅解脂酵母生產(chǎn)β-胡蘿卜素的技術(shù)；CN201510599954.3公開了一種利用亞羅解脂酵母生產(chǎn)低聚果糖的技術(shù)；CN201510600511.1公開了一種利用亞羅解脂酵母生產(chǎn)低聚半乳糖的技術(shù)；CN200510112638.5和CN200810172116.8公開了一種利用亞羅解脂酵母生產(chǎn)脂肪酶的技術(shù)；CN201180041064.0公開了一種利用亞羅解脂酵母生產(chǎn)二十碳五烯酸的技術(shù)。以上已公開的資料說明，亞羅解脂酵母在生物制造領(lǐng)域應(yīng)用很廣泛，具有重要的應(yīng)用價值。

多元醇在食品、化工領(lǐng)域的應(yīng)用很廣，木糖醇和赤蘚糖醇分別屬于五碳多元醇和四碳多元醇，它們主要應(yīng)用于食品、保健品、日化等領(lǐng)域。在世衛(wèi)組織呼吁全球減糖的大背景下，木糖醇、赤蘚糖醇這些熱量低、糖尿病人適用、口感舒適且具有一定健康功能特性的產(chǎn)品受到人們的青睞。CN201310282059.X詳細(xì)公開了一種以葡萄糖為原料利用亞羅解脂酵母發(fā)酵生產(chǎn)赤蘚糖醇的亞羅解脂酵母及工藝。雖然其質(zhì)量轉(zhuǎn)化率較之前的技術(shù)有了較大提高，最高達到63.2％，但是需要在補料或連續(xù)發(fā)酵的條件下才能實現(xiàn)；而且發(fā)酵至細(xì)胞密度OD₆₀₀值為20或以上時，還需要用酸調(diào)節(jié)pH值為3.1～4.0，步驟較為繁瑣。另外，CN201310282059.X中提到的亞羅解脂酵母不能同化利用木糖。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一株乳亞羅解脂酵母BBE-17(Yarrowia Lipolytica BBE-17)，其于2017年1月11日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO:M 2017027，地址：中國，武漢，武漢大學(xué)。可用于高轉(zhuǎn)化率發(fā)酵生產(chǎn)赤蘚糖醇，全程無需調(diào)節(jié)pH，操作簡便，并具有發(fā)酵D-木糖生產(chǎn)木糖醇的潛在可能。

所述亞羅解脂酵母BBE-17rRNA基因序列如SEQ ID NO:1所示，是從土壤中通過高葡萄糖濃度培養(yǎng)基自然篩選得到的。能同化利用木糖，可以葡萄糖為原料發(fā)酵生產(chǎn)赤蘚糖醇，與現(xiàn)有技術(shù)相比轉(zhuǎn)化率高，無需調(diào)節(jié)pH，操作簡便。

本發(fā)明還提供應(yīng)用所述亞羅解脂酵母BBE-17發(fā)酵生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法，將亞羅解脂酵母BBE-17活化后，接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，于28-31℃，通風(fēng)發(fā)酵。

在本發(fā)明的一種實施方式中，發(fā)酵培養(yǎng)基組成為：葡萄糖80-120g/l，酵母粉10-15g/l，檸檬酸銨3-7g/l，硫酸鎂0.3-0.6g/l，磷酸二氫鉀0.25-0.34g/l。

在本發(fā)明的一種實施方式中，活化培養(yǎng)基組成為：葡萄糖80-100g/l、酵母粉8-12g/l。