[發明專利]一種干細胞培養基及培養方法在審
| 申請號： | 201710538712.2 | 申請日： | 2017-07-04 |
| 公開（公告）號： | CN107164313A | 公開（公告）日： | 2017-09-15 |
| 發明（設計）人： | 劉靖 | 申請（專利權）人： | 北京軍秀咨詢有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0735 | 分類號： | C12N5/0735 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 100000 北京市朝陽區天*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 干細胞 培養基 培養 方法 | ||
1.一種干細胞培養基,包括培養皿本體(1)和MEF培養基(4)，其特征在于：所述培養皿本體(1)上設有器皿槽(3)，所述器皿槽(3)的上方設有上蓋(2)，所述器皿槽(3)的內部設有MEF培養基(4)。
2.根據權利要求1所述的一種干細胞培養基及培養方法，其特征在于：所述MEF培養基(4)內包含10％的FBS、1000μ/ml青霉素1000g/ml鏈霉素，所述MEF培養基(4)內還包含維生素和營養元素、含有脂肪酸負載量降低的白蛋白以及各種氨基酸。
3.根據權利要求2所述的一種干細胞培養基及培養方法，其特征在于：所述維生素包括維生素B7 0.000005-0.000025g/L，維生素C 0.002-0.004g/L，維生素B5 0.002-0.006g/L。
4.根據權利要求1所述的一種干細胞培養基及培養方法，其特征在于：所述MEF培養基(4)中的氨基酸包括非必須氨基酸0.1ml、谷氨酰胺2ml、丙酮酸鈉1mL。
5.實現權利要求1所述的一種干細胞培養基的培養方法，其特征在于：其培養方法包括以下步驟：
A、在37℃的水浴鍋里快速融化一管氮凍存的胚胎成纖維細胞；
B、把融化好的細胞懸浮液加到裝有幾毫升預熱好的MEF培養基的無菌離心管中，輕輕混勻后，1000g，5min離心收集細胞；
C、洗掉上清液中的DMSO，用10ml預熱的MEF培養基重懸細胞后，把融加到一個10cm的細胞培養皿中，放入37℃，含有CO2的加濕培養箱中培養；
D、大約每4天進行一次的培養液的更換，細胞就可以基本長滿整個培養皿。
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