[發明專利]一種植物內生真菌及其應用

有效

• 申請號: 201710532097.4
• 申請日: 2017-07-03
• 公開（公告）號: CN107868757B
• 公開（公告）日: 2020-10-20
• 發明（設計）人: 占扎君;張才學;應優敏;單偉光
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P17/18;C12R1/645
• 代理公司: 杭州賽科專利代理事務所(普通合伙) 33230
• 代理人: 馮年群

1.一種植物內生真菌，其特征在于：分類學命名為煙管菌（Bjerkandera adusta）ZJUT-HS8，該菌株已保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO：M 2017159，保藏日期為 2017年3月31日，保藏單位地址：中國，武漢，武漢大學。

2.一種權利要求1所述的植物內生真菌的應用，其特征在于，所述煙管菌（Bjerkanderaadusta）ZJUT-HS8在制備8α,15α-環氧化石杉堿甲中的應用。

3.權利要求2所述的植物內生真菌的應用，其特征在于，應用具體步驟如下：

1)挑取煙管菌（Bjerkandera adusta）ZJUT-HS8菌絲體接種于沙保氏瓊脂培養基，28℃培養，使菌株活化；

2)將活化好的菌株接種于沙保氏液體培養基，投入底物石杉堿甲，28℃發酵培養，得轉化產物；

3)發酵結束，過濾除去菌絲，調節發酵液pH至9-11，在發酵液中加入大孔吸附樹脂，攪拌后放置過夜；然后過濾回收樹脂，將樹脂裝入開放色譜柱，以甲醇洗脫，得甲醇洗脫液，減壓蒸餾回收溶劑，得轉化產物粗提物；

4)將轉化產物粗提物用ODS C18填料進行柱層析，再經半制備HPLC分離，即得轉化產物8α,15α-環氧化石杉堿甲。

4.根據權利要求3所述的植物內生真菌的應用，其特征在于，步驟(2)中的發酵條件為：轉速為160-200轉/分鐘，培養時間6-14天，底物石杉堿甲的終濃度為0.01-0.1mg/ mL；步驟(3)中的發酵液pH調節劑為低濃度碳酸鈉或氨水，所用大孔吸附樹脂為弱極性或非 極性吸附樹脂，樹脂加入量為20-40克每升發酵液。