[發明專利]一種核糖體rRNA雙光子熒光探針-季銨鹽三聯吡啶衍生物及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201710530309.5
• 申請日: 2017-06-29
• 公開（公告）號: CN107311916B
• 公開（公告）日: 2020-01-31
• 發明（設計）人: 吳杰穎;杜威;李興宇;祝英忠;田肖和;王慧;張瓊;周虹屏;田玉鵬
• 申請（專利權）人: 安徽大學
• 主分類號: C07D213/38
• 分類號: C07D213/38;C09K11/06;C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 34101 安徽省合肥新安專利代理有限責任公司
• 代理人: 喬恒婷

本發明公開了一種核糖體rRNA雙光子熒光探針?季銨鹽三聯吡啶衍生物及其制備方法和用途，其中核糖體rRNA雙光子熒光探針?季銨鹽三聯吡啶衍生物的結構式為：本發明目標產物可以通過雙光子熒光增強對RNA進行識別，是一種雙光子熒光增強的識別效應，低能量的長波(710nm)激發對生物體損傷小。特異性識別細胞核仁內的rRNA，本發明目標產物與核仁商染Syto 9在細胞核仁處的共定位效果很好，皮爾森系數可達到90％。

一、技術領域

本發明涉及一種核糖體rRNA熒光探針，具體地說是一種核糖體rRNA雙光子熒光探針-季銨鹽三聯吡啶衍生物及其制備方法和用途。

二、背景技術

最近德國生物化學家Thomas Carell在《科學》雜志上提出，RNA是形成所有生命的首個自復制分子，可以作為生命的起源物質。RNA分子包括轉運RNA(tRNA)，信使RNA(mRNA)和核糖體RNA(rRNA)，具有很多功能，如體內運輸、遺傳信息的解讀、基因表達的調控以及一些必要的生物催化作用。其中rRNA是細胞內含量最多的RNA，它可以在核仁內與蛋白結合，產生核糖體。借助rRNA熒光探針，可以在共聚焦顯微鏡下觀察rRNA在體內的存在狀態和活動行為。但是很多分子對細胞核膜穿透性差，難以進入細胞核內，所以有關rRNA探針的報道不多。目前，市場上唯一可利用的是SYTO系列RNA探針，由于SYTO探針的分子結構至今沒有公開，大大限制了對SYTO探針進一步的研究。

2006年，紐約大學的Qian Li和Young-Tae Chang用三種吡啶鹽來識別活細胞中的RNA，同年，杜倫大學的David Parker課題組用Eu配合物來特異性識別核仁，但是以上的RNA探針都是單光子熒光探針。相對于單光子探針，雙光子熒光探針具有高穿透性，低的細胞損傷，長波長可避免生物體內自發熒光干擾等特點。發明人課題組在2016年的ChemicalScience上報道了雙光子比率熒光探針對DNA和RNA的識別。以上提到的探針都是同時識別細胞核仁和細胞質中的RNA，不能特異性識別rRNA、mRNA或tRNA。合成特異性識別rRNA的探針，對檢測細胞內rRNA的狀態和活動具有重要意義。

申請人對本申請的主題進行了如下的文獻檢索：

1、http://scholar.glgoo.org/網檢索結果：(2017/6/19)

2、中國知網檢索結果：

檢索方式一：

篇名-一種水溶性雙光子熒光核糖體RNA探針-季銨鹽三聯吡啶衍生物及制備方法：無相關文獻。

篇名-一種水溶性雙光子熒光RNA探針-季銨鹽三聯吡啶衍生物及制備方法：無相關文獻。

篇名-一種水溶性熒光RNA探針-季銨鹽三聯吡啶衍生物及制備方法：無相關文獻。

檢索方式二：

全文-一種水溶性雙光子熒光核糖體RNA探針-季銨鹽三聯吡啶衍生物及制備方法：45篇相關文獻，均與水溶性雙光子熒光核糖體RNA探針無關。

全文-一種水溶性雙光子熒光核糖體RNA探針-季銨鹽三聯吡啶衍生物及制備方法：331篇相關文獻，均與水溶性雙光子熒光核糖體RNA探針無關。

三、發明內容

本發明旨在提供一種核糖體rRNA雙光子熒光探針-季銨鹽三聯吡啶衍生物及其制備方法和用途。所要解決的技術問題是通過分子設計合成特異性識別rRNA的雙光子熒光探針。