[發(fā)明專利]一種降解石油的生物質(zhì)微生物菌劑及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710528958.1
• 申請(qǐng)日: 2017-06-26
• 公開（公告）號(hào): CN107964402A
• 公開（公告）日: 2018-04-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 申圓圓;李春榮;姬雨;張帆;于博;劉健;謝金艷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西安文理學(xué)院
• 主分類號(hào): C09K17/14
• 分類號(hào): C09K17/14;A01N63/00;A01P21/00;C09K101/00
• 代理公司: 北京君華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11515
• 代理人: 朱慶華

1.一種降解石油的生物質(zhì)微生物菌劑，其特征在于：由以下重量份的成分組成：

微生物菌肥80～85份；藤黃微球菌(Micrococcus luteus)、蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)、蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)和彎曲假單胞菌(Pseudomonas geniculata)的混合發(fā)酵液10-15份；

所述微生物菌劑的含水量為5wt％～15wt％；

所述藤黃微球菌為Micrococcus luteus SL-3，保藏號(hào)為CGMCC No.6072；所述蠟狀芽孢桿菌為Bacillus cereus SL-7，保藏號(hào)為CGMCC No.6074；所述短小芽孢桿菌為Bacillus pumilus SL-9，保藏號(hào)為CGMCC No.6073；所述蘇云金芽孢桿菌為Bacillus thuringiensis 3-1，保藏編號(hào)CGMCC No.13005；所述彎曲假單胞菌為Pseudomonas geniculata 3，保藏編號(hào)CGMCC No.13004。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的降解石油的生物質(zhì)微生物菌劑，其特征在于：由以下重量份的成分組成：微生物菌肥89份，藤黃微球菌、蠟狀芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、蘇云金芽孢桿菌和彎曲假單胞菌的混合發(fā)酵液11份；所述微生物菌劑的含水量為9.5wt％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的降解石油的生物質(zhì)微生物菌劑，其特征在于：還包括生物質(zhì)炭，所述生物質(zhì)炭的重量份為2-5份。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的降解石油的生物質(zhì)微生物菌劑，其特征在于：所述微生物菌肥中有效活菌數(shù)不低于0.8億個(gè)/g，有機(jī)質(zhì)質(zhì)量含量不低于25％，腐殖酸質(zhì)量含量不低于20％，氮、磷和鉀的總質(zhì)量含量不低于5％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的降解石油的生物質(zhì)微生物菌劑，其特征在于：混合發(fā)酵液中的藤黃微球菌含量為1.0×10⁸個(gè)/mL～1.0×10⁹個(gè)/mL，蠟狀芽孢桿菌含量為1.0×10⁷個(gè)/mL～1.0×10¹⁰個(gè)/mL，短小芽孢桿菌含量為1.0×10⁹個(gè)/mL～1.0×10¹¹個(gè)/mL；蘇云金芽孢桿菌含量為1.0×10⁷個(gè)/mL～1.0×10⁸個(gè)/mL；彎曲假單胞菌含量為1.0×10⁸個(gè)/mL～1.0×10⁹個(gè)/mL。

6.一種如權(quán)利要求1-5所述的降解石油的生物質(zhì)微生物菌劑的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：

步驟(1)：將藤黃微球菌、蠟狀芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、蘇云金芽孢桿菌和彎曲假單胞菌分別接種于固體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，得到藤黃微球菌一級(jí)菌種、蠟狀芽孢桿菌一級(jí)菌種、短小芽孢桿菌一級(jí)菌種、蘇云金芽孢桿菌一級(jí)菌種和彎曲假單胞菌一級(jí)菌種；

步驟(2)：將步驟(1)中得到的一級(jí)菌種分別接種于液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，得到藤黃微球菌二級(jí)菌種、蠟狀芽孢桿菌二級(jí)菌種、短小芽孢桿菌二級(jí)菌種、蘇云金芽孢桿菌二級(jí)菌種和彎曲假單胞菌二級(jí)菌種；

步驟(3)：將步驟(2)中得到的藤黃微球菌二級(jí)菌種、蠟狀芽孢桿菌二級(jí)菌種、短小芽孢桿菌二級(jí)菌種、蘇云金芽孢桿菌二級(jí)菌種和彎曲假單胞菌二級(jí)菌種按照2～4∶3～5∶2～4∶2～4∶2～4的體積比混合后接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行混合發(fā)酵培養(yǎng)，得到藤黃微球菌、蠟狀芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、蘇云金芽孢桿菌和彎曲假單胞菌的混合發(fā)酵液；

步驟(4)：將微生物菌肥或微生物菌肥與生物質(zhì)炭與步驟(3)中得到的混合發(fā)酵液按重量份配比混合均勻，得到可降解石油的微生物菌劑。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的降解石油的生物質(zhì)微生物菌劑的制備方法，其特征在于：在步驟(1)中，所述固體培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)的溫度是37±1℃，培養(yǎng)時(shí)間為24h～36h。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的降解石油的生物質(zhì)微生物菌劑的制備方法，其特征在于：在步驟(2)中，所述液體培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)的溫度為28±1℃，培養(yǎng)時(shí)間為24h～36h。