[發(fā)明專利]一株嘔吐毒素降解菌及其應用

有效

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• 申請日: 2017-06-30
• 公開（公告）號: CN107164280B
• 公開（公告）日: 2020-02-18
• 發(fā)明（設計）人: 唐語謙;朋賢;李靖;吳暉
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23L5/20;A23K10/18;C12R1/01
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 崔紅麗

本發(fā)明公開一株嘔吐毒素降解菌及其應用。該降解菌是選自廣東省陽江市的水稻種植農田DON污染的土壤，經過含DON的富集培養(yǎng)基培養(yǎng)，再以DON為唯一碳源的無機鹽培養(yǎng)基馴化培養(yǎng)、壓力篩選、分離、純化獲得。名稱為陰溝腸桿菌(Enterobacter cloacae)WD601，于2017年06月02日保藏于廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓廣東省微生物研究所的廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號：GDMCC No：60194。該菌在好氧條件下以DON作為唯一碳源和能源進行生長繁殖，同時將其快速降解，降解DON的穩(wěn)定性良好，在優(yōu)化培養(yǎng)基中傳代5～8代，DON降解率均能達到50％以上。

技術領域

本發(fā)明涉及生物降解技術領域，具體涉及一株嘔吐毒素降解菌及其應用。

背景技術

嘔吐毒素(deoxynivalenol，DON)，又名脫氧雪腐鐮刀菌烯醇，主要是由禾谷鐮刀菌和黃色鐮刀菌產生的B類單端孢霉烯毒素，對谷物污染非常嚴重。已知DON在人類和動物中引起一系列疾病，如嘔吐、拒食、腹瀉、食管穿孔以及營養(yǎng)吸收不良等癥狀，其中豬對嘔吐毒素最為敏感；同時，DON能使增長迅速、處于分裂狀態(tài)的細胞凋亡，高濃度DON不僅能抑制動物免疫細胞增殖，還易造成妊娠期動物流產或對胚胎有致畸作用。

DON在谷物真菌毒素中檢出率最高，不同地區(qū)制定了相應標準，如FDA規(guī)定食品中DON的安全標準是1mg/kg，我國在GB2715-2005和GB2761-2011中規(guī)定小麥等制品DON的允許限量不超過1mg/kg。目前，此類真菌毒素污染已對我國食品安全和農產品出口構成實際、嚴重負面影響，如何有效脫毒成為了亟待解決的重大社會問題。

目前，國內外谷物和飼料霉變脫毒方法主要有物理吸附法、化學脫毒法以及生物脫毒法等。物理吸附法對DON吸附可逆且效率差，還易吸附微量營養(yǎng)元素，造成谷類和飼料中營養(yǎng)物質流失；化學脫毒易殘留一些潛在有毒物質，對谷物和飼料造成二次污染，因此DON傳統(tǒng)脫毒方法在實際應用中具有一定局限性；生物脫毒法是通過微生物釋放的酶作用于DON，并將其轉化為更低毒性的代謝產物，由于微生物降解具有成本低、效率高、營養(yǎng)物質損失少，無二次污染和生態(tài)恢復性良好等優(yōu)點而受到廣大關注。

早期報道的DON降解菌大部分來源于動物腸道內容物，以腸道和牛瘤胃中分離出來的厭氧菌種居多。厭氧菌群雖然可以作用于DON并具有較好的降解效果，但是菌種分離純化極其困難，且嚴謹與苛刻的反應條件并不適合大規(guī)模的DON生物脫毒；且所報道的幾株兼性厭氧菌大部分為混合菌群，并沒有將分解DON的微生物菌種進行純種分離和鑒定。因此，亟需一種能高效降解DON的好養(yǎng)或兼性厭氧純種菌，從而帶動谷物和飼料中DON生物降解技術的進一步發(fā)展和應用。

發(fā)明內容

為了克服現有DON微生物降解中的缺點與不足，本發(fā)明的目的在于提供一株嘔吐毒素降解菌。該菌是從受DON污染的土壤中篩選分離的、在好氧條件下能以DON為唯一碳源在無機鹽培養(yǎng)基中生長、并可高效降解DON的嘔吐毒素降解菌。

本發(fā)明的另一目的在于提供上述嘔吐毒素降解菌的應用。

本發(fā)明的目的通過下述技術方案實現：

本發(fā)明提供一株嘔吐毒素降解菌，菌種命名為陰溝腸桿菌(Enterobactercloacae)WD601，是選自廣東省陽江市的水稻種植農田DON污染的土壤，經過含DON的富集培養(yǎng)基培養(yǎng)，再以DON為唯一碳源的無機鹽培養(yǎng)基馴化培養(yǎng)、壓力篩選、分離、純化獲得。

所述的陰溝腸桿菌(Enterobacter cloacae)WD601的保藏信息：保藏單位：廣東省微生物菌種保藏中心(GDMCC)，保藏日期：2017年06月02日，保藏地址：廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓廣東省微生物研究所，保藏編號：GDMCC No：60194。

所述的WD601的16S rDNA與陰溝腸桿菌Enterobacter cloacae的同源性為99％。該菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO：1所示。