[發明專利]一種從轉化液中提取左旋多巴的方法在審

申請號：	201710520264.3	申請日：	2017-06-30
公開（公告）號：	CN107141229A	公開（公告）日：	2017-09-08
發明（設計）人：	張興燦;朱維忠;鄭長春;王博;金偉;孫明純;張勇	申請（專利權）人：	山東魯抗醫藥股份有限公司
主分類號：	C07C229/36	分類號：	C07C229/36;C07C227/40;C07C227/42;C07C39/08;C07C37/72;C07C37/84;C12P13/04
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種轉化提取左旋多巴方法
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【說明書】：

技術領域

本發明屬于發酵后提取領域，具體涉及一種從轉化液中提取左旋多巴的方法。

背景技術

左旋多巴又名3,4-二羥基苯丙氨酸，為白色結晶性粉末，無臭無味，在乙醇、氯仿和丙酮中不溶，在稀酸中易溶，作為一種重要的生物活性物質，左旋多巴是神經遞質多巴胺的前體，可以通過血腦屏障，進入腦循環而到達中樞神經系統，在中樞神經脫羧酶的作用下，轉化為多巴胺，從而使腦組織中多巴胺含量增加達到治療帕金森疾病。

左旋多巴是治療老年帕金森病的首選和最有效藥物，除此之外，左旋多巴還具有治療弱視和心力衰竭的作用，雖然在長時間的使用以后會有一些副作用，但是四十余年過去了，目前仍然沒有更好的替代藥物出現。目前市面上的藥物或者是植物提取，或者是化學合成，但是均無法保證原料來源，產量遠遠滿足不了市場需求，據統計，2015年左旋多巴的全球銷售總額達到了3.3億美元，在世界暢銷藥中排名第97位，其總產量達到了2000噸以上，預計未來5-10年全球銷售總額有望達到10億美元，隨著分子生物學及生物技術的迅速發展，利用生物合成左旋多巴已經成為一種很有競爭力、前途光明的方法。

左旋多巴的生產方法有天然植物提取法、化學合成本法和微生物酶轉化法。傳統的制取方法是主要是從植物貓豆中提取的，中國專利CN 104311440A發明公開了一種從貓豆中提取左旋多巴的方法，通過原料處理、高壓提取、雙水相萃取、脫鹽、靜置，析晶，干燥幾個步驟得到左旋多巴。植物提取由于受到原料來源的限制，產量小，遠不能滿足當前市場的需求。左旋多巴的化學合成法較多，但合成法目前主要的困難就是合成出來的產品是D-型和L-型的混合物，將二者分開的過程控制難度大，同時存在生產成本高、污染環境嚴重等問題。微生物酶轉化法就是利用代謝途徑中的某些酶，如酪氨酸酶、酪氨酸酚裂解酶、轉移酶將不同的底物轉變成左旋多巴，可獲得大量的左旋多巴，許多國家對其進行了大量的研究，采取了許多不同的方法。

微生物酶轉化法是一種反應條件溫和，對環境友好的左旋多巴制備方法，然而，目前利用微生物酶法制備左旋多巴實現工業化的報道并不多見，主要是因為轉化液提純方法產生的廢水較難處理。中國專利CN 106117071A和CN106117072A公布了兩種轉化液中提純左旋多巴的方法，但是這兩個辦法均沒有給出提純廢水的處理方法，而這兩個提取工藝的母液廢水或離心廢水均是含有鄰苯二酚，后續處理成本較高。含酚廢水危害身體健康，并造成嚴重的環境污染，同時廢水中左旋多巴也得不到回收。因此，目前廢水中含有高濃度鄰苯二酚限制了左旋多巴微生物酶轉化法的工業化進程。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種從轉化液中提取左旋多巴的方法，包括以下步驟：

a.利用酪氨酸酚裂解酶生物轉化，反應結束后，加入抗氧化劑；

b.向轉化液中流加無機酸，至將反應液中析出的左旋多巴顆粒完全溶解；

c.高速離心機離心收集清液；

d.加入活性炭攪拌脫色，過濾收集清液；

e.使用吸附樹脂將所述清液上樣吸附，稀酸溶液洗脫后，再用有機溶劑洗脫，獲得左旋多巴洗脫液，再用有機溶劑洗脫，用純化水洗脫，獲得鄰苯二酚洗脫液；

f.左旋多巴精制：

所述左旋多巴洗脫液濃縮后調堿結晶，過濾收集左旋多巴晶體，真空干燥獲得左旋多巴成品；

g.鄰苯二酚回收：

所述鄰苯二酚洗脫液利用有機溶劑進行萃取轉相，轉相后氯化鈉溶液洗滌，洗滌后濃縮結晶，干燥得鄰苯二酚粉末。

優選地，在本發明從轉化液中提取左旋多巴的方法中，所述轉化液的左旋多巴的起始含量為35～60g/L，鄰苯二酚的起始含量為4～7g/L。