[發明專利]封閉式畜禽舍內環境微生物氣溶膠監測方法

有效

• 申請號: 201710516286.2
• 申請日: 2017-06-29
• 公開（公告）號: CN107227339B
• 公開（公告）日: 2020-09-15
• 發明（設計）人: 劉靜波;余馬;劉林娜;郭振東;歐洋;謝強
• 申請（專利權）人: 西南科技大學;中國人民解放軍軍事醫學科學院軍事獸醫研究所;四川恒力通農牧科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/24
• 分類號: C12Q1/24;G06Q50/02
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 鄭健

1.一種封閉式畜禽舍內環境微生物氣溶膠監測方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一、采樣點布設：畜禽舍內按照四等分對角線選點法進行布點，取樣點設置至少5個點；

步驟二、在畜禽舍內通過空氣微生物氣溶膠采樣裝置對采樣點進行連續采樣，利用宏基因組技術分析微生物種類及含量，結合生物信息學，獲取優勢菌、致病菌及潛在致病菌信息；其中連續采樣過程包括對進行飼料投放、吃料高峰期、畜禽休息、畜禽自由活動、畜禽舍清掃、墊料更換行為時的采樣；

所述四等分對角線選點法是指以畜禽舍中心為起點，從起點到畜禽舍四個拐角的方向選擇等分采樣點，并以等分采樣點和畜禽舍中心點組成5個采樣點；

所述取樣點的高度的選擇為：對于網床或籠養雞舍中的畜禽為豬和肉雞時，取樣選擇三層取樣，高度分別為0.2m、0.4m和0.6m，畜禽為籠養蛋雞時，取樣選擇三層取樣，高度分別為0.8m、1m和1.2m；對于地面養殖舍中的畜禽為雞鴨時，取樣選擇三層取樣，高度分別為0.1m、0.3m和0.4m，畜禽為牛羊時，取樣選擇五層取樣，高度分別為0.8m、1m、1.2m、1.4m和1.6m；

所述空氣微生物氣溶膠采樣裝置為電磁激勵磁珠旋轉型微生物氣溶膠采集富集儀或液體撞擊式空氣微生物采樣器；

在空氣微生物氣溶膠采樣裝置中注入采樣液，連接抽氣裝置，收集空氣中的微生物氣溶膠，采樣液因氣流沖擊而攪動形成漩渦，從而將微生物粒子釋放并均勻分布于采樣液中，并能夠進一步檢測出空氣中活性微生物的數量；

所述采樣液包括以下成分：0.02～0.04mol/L的磷酸鹽緩沖液100～120體積份、十二烷基二乙醇酰胺10～20重量份、改性菊粉5～10重量份、卡拉膠1～5份、椰油酰胺丙基甜菜堿1～5體積份、十二水合磷酸氫二鈉1～5份、丙酮酸鈉1～3份、乙二胺四乙酸二鈉5～10重量份、二甲基亞砜20～30體積份、去離子水200～250體積份；

所述采樣液的制備方法為：取磷酸鹽緩沖液、十二烷基二乙醇酰胺、改性菊粉、卡拉膠、椰油酰胺丙基甜菜堿、十二水合磷酸氫二鈉、丙酮酸鈉、乙二胺四乙酸二鈉、二甲基亞砜、去離子水，攪拌混合，得到混合液，將混合液加入恒溫槽中，選用探頭式脈沖超聲波儀器對混合液進行超聲處理，得到采樣液；所述探頭式脈沖超聲波儀器的探頭插入混合液下5～10cm，混合液的液面高度保持12～15cm，脈沖時間為15～20s，占空比為60％～85％，恒溫槽中控制溫度為25℃，聲強為100～500W/cm²，超聲頻率25～45kHz，處理時間為1～3h；所述探頭的直徑為20mm；

在超聲處理過程中，向混合液中通入氣體氮氣；所述氮氣的流速為80-120mL/min；

所述改性菊粉的制備方法為：按重量份，取10～20份菊粉和50～80份堿性溶液置于帶攪拌的密封容器中，向其中通入氮氣使料液中氮氣飽和，然后將該密封容器置于1.5MeV、30mA的電子加速器中進行輻照攪拌處理，然后過濾，制得改性菊粉；所述輻照采用的輻照劑量率為200～500kGy/h，輻照劑量為500～2000kGy，攪拌速度為100～200r/min；所述堿性溶液的配制方法為：按重量份，100份水中加入10～20份重量比為2:1的尿素和氫氧化鈉。