[發明專利]一種雞毒支原體疫苗效力測定方法

有效

• 申請號: 201710516106.0
• 申請日: 2017-06-29
• 公開（公告）號: CN107290530B
• 公開（公告）日: 2020-03-10
• 發明（設計）人: 張德寶;鄭朝朝;柳珊;郁宏偉;朱秀同;劉濤;高曉磊;張新新
• 申請（專利權）人: 瑞普（保定）生物藥業有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 北京匯信合知識產權代理有限公司 11335
• 代理人: 趙倩

1.一種雞毒支原體疫苗效力測定方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)免疫動物

選用SPF雞作為實驗動物，用所述雞毒支原體疫苗對實驗動物進行免疫；

(2)血清采集、稀釋

免疫程序結束后，無菌采集動物血清，滅活，對血清做2～5倍系列倍比稀釋，得到不同稀釋度的血清，作為待檢樣品；

(3)支原體-血清結合、培養

取待檢樣品與活菌滴度為1000CCU/ml的雞毒支原體檢測用抗原等體積混合，每個樣品設置復孔，同時設陰、陽性對照，將培養板密閉，恒溫培養，定期觀察，其中，所述雞毒支原體檢測用抗原為雞毒支原體培養物用液體培養基稀釋所得，所述陰性對照孔僅含液體培養基，但不添加雞毒支原體和待檢血清，所述陽性對照孔僅含雞毒支原體檢測用抗原，但不添加待檢血清；

(4)結果判定

試驗成立條件：陽性對照孔均變為黃色，陰性對照孔均不變色，

判定時間：當陽性對照孔全部變為黃色時進行結果判定，

判定標準：將不變色孔的待檢樣品最高稀釋倍數判定為所述待檢樣品的效價，其中，所述不變色孔是指其中的培養物顏色與陽性對照孔的顏色不同的孔。

2.如權利要求1所述的測定方法，其特征在于，步驟(4)中所述判定時間為培養開始后第3天。

3.如權利要求1所述的測定方法，其特征在于，步驟(4)中所述判定時間是孔內培養物pH低于7.0時的時間。