[發明專利]一種化學與生物聯合催化合成磷酸吡哆醛的方法

在審

• 申請號: 201710509983.5
• 申請日: 2017-06-28
• 公開（公告）號: CN107236770A
• 公開（公告）日: 2017-10-10
• 發明（設計）人: 曹一丁;楊忠華;阮濤;楊睿;張士堯;馬龍;展寶睿
• 申請（專利權）人: 武漢科技大學
• 主分類號: C12P17/12
• 分類號: C12P17/12;C07D213/67
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙)42222
• 代理人: 彭勁松

1.一種化學與生物聯合催化合成磷酸吡哆醛的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）化學合成鹽酸吡哆醛

取鹽酸吡哆醇1g溶于10mL 5%鹽酸溶液中，加入摩爾比為1:1~8的選擇性氧化劑，在磁力攪拌20~40℃水浴加熱反應，反應3h直到氧化劑完全溶解，并進行2~3抽濾除去機械雜質；將所得清亮濾液在旋轉蒸發儀上減壓濃縮蒸干，溫度應低于其分解溫度；向蒸干后的固體加入5ml蒸餾水，加熱溶解，置冰箱中于0℃下冷卻，直至析出白色晶體；抽濾，醇洗，風干，得白色晶體；將粗產品在稀鹽酸溶液中重結晶2次，得到鹽酸吡哆醛白色晶體；

（2）高效酶法轉化鹽酸吡哆醛為磷酸吡哆醛

取上一步反應所獲得的產物鹽酸吡哆醛0.1g于離心管中，添加磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀0.05g，用pH=6.0的Tris緩沖液溶解磷酸吡哆醛轉移酶，配置成0.1mg/ml的酶反應液，取1ml加入離心管中，將離心管放入溫度為20~30℃恒溫水浴搖床中反應3h，將反應后的溶液進行離心處理8000r/min，10min，收集上清液，即為磷酸吡哆醛；

步驟（1）的操作需在黑暗條件下進行。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）所述氧化劑是雙氧水、二氧化錳、硝酸銅、二乙胺中的一種或幾種的混合物。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）所述氧源為空氣時，空氣壓力為1-5個大氣壓。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟（1）所述氧源為空氣時，空氣壓力為1-2個大氣壓。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）所述氧化劑是雙氧水，其用量以鹽酸吡哆醇摩爾數計的0.5-8倍。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟（1）所述氧化劑是雙氧水，其用量以鹽酸吡哆醇摩爾數計的1-2倍。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）所述氧化劑是二氧化錳，其用量以摩爾數計為鹽酸吡哆醇的摩爾數的0.01-5倍。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，步驟（1）所述氧化劑是二氧化錳，其用量以摩爾數計為鹽酸吡哆醇的摩爾數的0.01-1倍。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）所述氧化劑是雙氧水、硝酸銅、二乙胺按照物質的量之比約為1:1:1進行配比，其用量以摩爾數計為鹽酸吡哆醇的摩爾數的0.1-5倍。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，步驟（1）所述氧化劑是雙氧水、硝酸銅、二乙胺按照物質的量之比約為1:1:1進行配比，其用量以摩爾數計為鹽酸吡哆醇的摩爾數的0.8-2倍。