[發明專利]抗菌水通道蛋白囊泡及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710509715.3
• 申請日: 2017-06-28
• 公開（公告）號: CN107474119B
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 寧波日新恒力科技有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K1/107;B01D69/02;B01D61/02
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司 31236
• 代理人: 封喜彥;胡晶

1.一種抗菌水通道蛋白囊泡的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

第一步. ABA或AB兩親性嵌段共聚物的氯甲基化：

將ABA或AB兩親性嵌段共聚物室溫下溶解，加入催化量的Lewis酸催化劑，緩慢滴加氯甲基化試劑，室溫下攪拌反應3-12h，之后用沉淀劑析出共聚物，反復沖洗直至共聚物中沒有氯離子，干燥后得到氯甲基化的ABA或AB兩親性嵌段共聚物；

第二步. 水通道蛋白囊泡的制備：

采用所述氯甲基化的ABA或AB兩親性嵌段共聚物對水通道蛋白進行包埋，將所述氯甲基化的ABA或AB兩親性嵌段共聚物溶解于共溶劑中形成單分子鏈的溶液，緩慢加入選擇性溶劑，通過分子自組裝得到球形微米囊泡膠束，并將膠束淬火固定其形態；旋蒸除去有機小分子，采用滲析法包埋水通道蛋白，得到含水通道蛋白的ABA或AB兩親性嵌段共聚物囊泡膠束溶液；

第三步. 氯甲基化水通道蛋白囊泡的季銨化：

取所述含水通道蛋白的ABA或AB兩親性嵌段共聚物囊泡膠束溶液，加入叔胺溶液，在25-60℃下攪拌反應5-12h；將反應完成的囊泡膠束溶液移入透析袋中透析2-3天去除未反應的有機小分子，得到季銨化的水通道蛋白囊泡溶液，即為抗菌水通道蛋白囊泡溶液。

2.根據權利要求1所述的抗菌水通道蛋白囊泡的制備方法，其特征在于，所述ABA或AB兩親性嵌段共聚物為PS(m)-b-PEG(n)-b-PS(m)或PS(m)-b-PEG(n)，其中m、n為兩親性嵌段共聚物的聚合度，100≤m≤500，35≤n≤50。

3.根據權利要求1所述的抗菌水通道蛋白囊泡的制備方法，其特征在于，所述Lewis酸催化劑選自SnCl₄、ZnCl₂、TiCl₄中的一種。

4.根據權利要求1所述的抗菌水通道蛋白囊泡的制備方法，其特征在于，所述氯甲基化試劑選自1,4-二氯甲氧基丁烷、氯甲基烷基醚、甲醛/氯化氫中的一種，用量為0.05-3mol，相應地，所述ABA或AB兩親性嵌段共聚物的用量是0.01-1g。

5.根據權利要求1所述的抗菌水通道蛋白囊泡的制備方法，其特征在于，在所述第二步的水通道蛋白囊泡的制備過程中，所述選擇性溶劑選自去離子水、甲醇中的一種或兩種，所述共溶劑為四氫呋喃共溶劑。

6.根據權利要求5所述的抗菌水通道蛋白囊泡的制備方法，其特征在于，所述選擇性溶劑為去離子水/甲醇混合液時，所述去離子水/甲醇體積比例為1/9、2/8、3/7、4/6、5/5、6/4、7/3、8/2、9/1中的一種。

7.根據權利要求1所述的抗菌水通道蛋白囊泡的制備方法，其特征在于，在所述第二步中所制備得到的水通道蛋白囊泡溶液中，水通道蛋白囊泡的濃度為0.01-0.5mg/mL，水通道蛋白囊泡中水通道蛋白與兩親性嵌段共聚物的摩爾比為1:10-1:500。

8. 根據權利要求1所述的抗菌水通道蛋白囊泡的制備方法，其特征在于，在所述第三步的氯甲基化水通道蛋白囊泡的季銨化過程中，所述叔胺溶液中的叔胺選自三乙醇胺、三正丁基胺、三正丙胺、十二烷基二甲基叔胺、N,N-二甲基苯胺中的一種，所述叔胺溶液中叔銨的體積分數為1-35%，用量為5-20mL，相應地，所述水通道蛋白囊泡的濃度為0.01-0.5mg/mL，用量為0.5-10mL，所述叔銨溶液的溶劑為去離子水、甲醇、乙醇中的一種。

9.一種抗菌水通道蛋白囊泡，其特征在于，是通過權利要求1-8中任一所述的抗菌水通道蛋白囊泡的制備方法制備得到的。

10.一種權利要求9所述的抗菌水通道蛋白囊泡在反滲透膜中的應用，其特征在于，采用涂覆法在聚酰胺層界面聚合的過程中封裝所述抗菌水通道蛋白囊泡，得到具有抗菌功能的水通道蛋白反滲透膜。