[發明專利]FXR拮抗劑在在制備抗HBV藥物中的應用

在審

• 申請號: 201710507209.0
• 申請日: 2017-06-28
• 公開（公告）號: CN107441098A
• 公開（公告）日: 2017-12-08
• 發明（設計）人: 陳衛東;周云;王艷東;聶小博;葉文凌;周靜宜
• 申請（專利權）人: 河南大學
• 主分類號: A61K31/57
• 分類號: A61K31/57;A61K45/06;A61P31/20;A61P1/16
• 代理公司: 新鄉市平原智匯知識產權代理事務所(普通合伙)41139
• 代理人: 周闖

技術領域

本發明涉及新藥研發領域，具體內容為法尼酯衍生物X受體(farnesoid X receptor，FXR)拮抗劑用于治療HBV感染，抑制HBV復制表達，促進HBV清除，改善肝功能，降低肝癌轉化風險等方面的應用。

背景技術

乙型肝炎病毒感染仍是一個全球公共衛生問題，它與人類的慢性肝炎、肝纖維化、肝硬化、肝毛玻璃病變和肝癌的發生有著密切的關系。目前，世界上有20億人口曾被HBV感染，約3.5億人變成慢性感染者，每年死于慢性肝炎、肝硬化及肝癌人數在50萬至120萬，占死因的第10位。HBV是一個3.2kb部分雙鏈DNA包膜病毒。HBV轉錄受4個啟動子和2個增強子調控。HBV由聚合酶、表面抗原、e抗原、核心抗原和X蛋白組成。表面蛋白主要由大蛋白、中蛋白和小蛋白組成，鑲嵌在宿主細胞膜的雙層脂質結構。這些表面蛋白具有相同的C端結構域，但是N端結構不同，如pre-S1是大蛋白結構成分，也是HBV進入肝細胞結構域。HBV感染分為急性感染和慢性感染，由于HBV細胞免疫的不足可造成HBV持續感染，造成慢性肝炎、肝細胞玻璃樣變、纖維化、肝衰竭及肝癌。

HBV治療目標是抑制病毒的復制表達，降低肝損傷促進肝功能恢復。目前藥物主要有兩類，一類是普通IFNα及長效IFNα，另一類為核苷(酸)類似物。IFNα具有很多副作用，并且只有30％病人有效。核苷(酸)類似物雖然能夠快速抑制病毒，但是經常形成HBV耐藥，停藥后HBV復制反彈。因此，急迫需要開發新的抗病毒藥物。

發明內容

本發明的目的是提供一種FXR拮抗劑在在制備抗HBV藥物中的應用。

膽汁酸在HBV急慢性感染中發揮重要作用。急性HBV感染，患者體內膽汁酸濃度急劇升高，而HBV清除后血清膽汁酸水平恢復正常。在急性轉為慢性HBV感染過程中，膽汁酸水平持續升高，這也說明HBV和膽汁酸之間存在著相互關系。最近研究發現，NTCP作為肝細胞攝取膽汁酸轉運蛋白，又作為HBV感染肝細胞功能受體。HBV感染過程中，preS1蛋白與肝細胞膜NTCP結合，導致CYP7A1表達升高，膽汁酸水平增高及膽固醇和脂質代謝紊亂，從而形成膽汁淤積和肝損傷。升高的膽汁酸通過核受體FXR而促進HBV復制表達。核受體FXR和RXR形成異二聚體，與HBV核心啟動子和增強子結合，促進HBV前基因組RNA和DNA復制中間體的合成。因此，我們認為膽汁酸促進HBV復制表達，不利于病毒清除。而我們在FXR KO小鼠證明，FXR敲除顯著抑制HBV復制表達，并促進HBV清除。采用FXR拮抗劑同時可以顯著抑制HBeAg表達。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案是：FXR拮抗劑在在制備抗HBV藥物中的應用。

優選的，所述FXR拮抗劑為(Z)-Guggulsterone(CAS號39025-23-5,Sigma)。

優選的，所述藥物為FXR拮抗劑或者為FXR拮抗劑和其它抗病毒藥物組成的復方藥物。

優選的，所述其它抗病毒藥物為IFNα和/或核苷(酸)類似物等抗病毒藥物。

優選的，所述藥物包括FXR拮抗劑和藥學上可接受的載體。

優選的，所述藥物的劑型為任意一種臨床可接受的劑型，如片劑、膠囊、粉末或液體制劑等劑型。

本發明提供新的藥物治療HBV感染病人，FXR受體拮抗劑抑制HBV復制表達、促進HBV清除，改善肝功能，抑制肝纖維化和肝硬化，降低向肝癌轉化風險，因此，提高病人生存質量，降低社會家庭經濟負擔，具有廣闊的應用前景。

附圖說明

圖1：在HepG2細胞系，轉染pHBV1.3，轉染后24小時加CDCA，加藥后24和48小時，取上清液，ELISA檢測HBeAg表達；

圖2：在HepG2細胞系，轉染pHBV1.3和FXR siRNA，轉染后24小時加CDCA，加藥后48小時，取上清液，ELISA檢測HBeAg表達；

圖3：在WT小鼠(C57BL/6J小鼠)和FXR^-/-小鼠，高壓尾靜脈注射pHBV1.3，注射后D1、D7、D14天靜脈采血，ELISA檢測HBeAg表達；

圖4：在HepG2細胞系，轉染pGL3-EN2/Cp和pRL-TK或pFXR表達質粒，轉染后24小時加CDCA，轉染72小時后進行雙熒光素酶報告分析；

圖5：在HepG2細胞中，轉染pHBV1.3，24小時后加(Z)-Guggulsterone(10μM)或DMSO對照，作用48小時，收集上清液，ELISA檢測HBeAg表達。

具體實施方式

實施例1