[發明專利]一種具有樣本保存和滅活功能的拭子洗脫液

有效

• 申請號: 201710493469.7
• 申請日: 2017-06-26
• 公開（公告）號: CN107227306B
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 高利飛;秦明明;高歌;肖李亞;李振紅;李桂林;付光宇;吳學煒;苗擁軍
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 鄭州異開專利事務所(普通合伙) 41114
• 代理人: 王霞

本發明公開了一種具有樣本保存和滅活功能的拭子洗脫液，是由異硫氰酸胍、乙二胺四乙酸、緩沖液、二硫蘇糖醇、表面活性劑、玻璃珠或聚丙烯塑料珠以及去離子水組成，其中洗脫液中各組分的含量為20%～55%[w/v]異硫氰酸胍，1mM?25mM乙二胺四乙酸，20?100mM緩沖液，二硫蘇糖醇1%?5%[w/v]，1%?5%表面活性劑，玻璃珠或聚丙烯塑料珠3?10粒。本發明配制的洗脫液具有成本低，性能穩定，配制的洗脫液可以保存DNA/RNA,實現拭子樣本洗脫和常溫保存運輸：并且可以滅活病原體，具有樣本的滅活作用，可大大降低實驗室暴露感染的風險，由于洗脫液中用到的異硫氰酸胍是常見的核酸提取用化學組分，所以還不影響后續核酸提取。

技術領域

本發明涉及生物樣本處理液，尤其是涉及一種具有樣本保存和滅活功能的拭子洗脫液。

背景技術

為準確診斷疾病，采用拭子采集標本（微生物、脫落的細胞或分泌物等），并對標本進行保存、培養、分離等進一步處理，是臨床醫學檢查常用的方法。

核酸樣本DNA/RNA降解是PCR檢測中常見問題。目前常見的樣品處理液一般為生理鹽水或PBS洗脫液，經過這些洗脫液處理后的核酸樣本保存過程中，病原體會破裂，釋放出核酸，但生理鹽水和PBS洗脫液無法抑制DNase/RNase 活性，核酸很容易被降解，從而影響檢測結果的準確性。實際臨床核酸檢測中，部分標本還需要寄送到第三方檢驗中心進行檢測，運輸過程中需要維持低溫保存冷鏈運輸，代價比較高。因此標本的常溫運輸保存也是需要解決的問題。

檢測過程中還會遇到一些有生物危害性的樣本，比如呼吸道傳播疾病或接觸傳播疾病，這些樣品采集后，醫護人員在檢驗操作過程中容易帶來實驗室暴露感染。所以如何實現這些有生物危害性的樣本采集后就被滅活，以減少實驗室檢驗人員感染的風險，也是需要解決的問題。

中國發明專利《一種宮頸脫落細胞保存液》（CN200810200008.7）公開了一種保存液，包括以下組分及含量(重量)：醇類20％-50％；抗聚集試劑15％-50％；緩沖液5％-10％；離子強度維持試劑1％-20％；抗微生物試劑0.01％-0.5％；粘液溶解試劑0.1-5％；清潔劑0-0.5％。該專利的主要功能可使細胞在體外液體懸浮液環境中保持細胞形態。但是，該保存液對樣本中的RNA樣本無保存效果；同時，由于細胞未被滅活，細胞中的病毒有可能在操作中傳染給檢驗操作人員。

在該技術領域，還有采用Trizol 保存液的，該保存液可以較好的保存RNA樣本，也可通過加熱滅活病毒，但由于存在有毒揮發氣體，對操作者有危害。

除此之外，還有采用RNase inhibitor 酶類來保存RNA樣本，但是成本較貴，其應用受限。

綜上所述，開發一種能夠有效實現拭子樣本的常溫保存運輸，阻止Dnase/RNase降解核酸，滅活病原體，并且不影響后續檢測的拭子洗脫液，對拭子樣本的分子生物學研究和臨床上的應用非常重要，也是目前迫切需要解決的重要技術難題。

發明內容

本發明的目的在于針對上述現有技術存在的缺陷而提供一種具有樣本保存和滅活功能的拭子洗脫液。

為實現上述目的，本發明可采取下述技術方案：

本發明所述的具有樣本保存和滅活功能的拭子洗脫液，是由異硫氰酸胍、乙二胺四乙酸、緩沖液、二硫蘇糖醇、表面活性劑、玻璃珠或聚丙烯塑料珠以及去離子水組成，其各組分的含量為：

20%～55%[w/v]異硫氰酸胍，1mM-25mM乙二胺四乙酸，20-100mM緩沖液，二硫蘇糖醇1%-5%[w/v]，1%-5%表面活性劑，玻璃珠或聚丙烯塑料珠3-10粒。

所述緩沖液可以為Tris緩沖液，也可以為磷酸鹽緩沖系統。