[發明專利]一種可大幅提高包涵體蛋白復性效率的高分子復合膠束及其復性工藝

在審

• 申請號: 201710491472.5
• 申請日: 2017-06-26
• 公開（公告）號: CN107141741A
• 公開（公告）日: 2017-09-08
• 發明（設計）人: 史林啟;馬飛賀;安英麗
• 申請（專利權）人: 南開大學
• 主分類號: C08L67/04
• 分類號: C08L67/04;C08L53/00;C08J3/02;C07K1/113
• 代理公司: 天津耀達律師事務所12223
• 代理人: 張耀

1.一種可大幅提高包涵體蛋白復性效率的高分子復合膠束，其特征在于：由粒徑為30-500nm且均勻分布的顆粒構成，所述高分子復合膠束由兩種雙親性嵌段共聚物組成，兩種雙親性嵌段共聚物中包括一種親水端具有環境響應性的雙親性嵌段共聚物和一種親水端不帶環境響應性的雙親性嵌段共聚物，該復合膠束在一定條件下為核-殼結構，核層和殼層分別由兩種雙親性嵌段共聚物的疏水端和親水端混合組成。

2.根據權利要求1所述可大幅提高包涵體蛋白復性效率的高分子復合膠束，其特征在于：所述兩種雙親性嵌段共聚物的疏水端為5-20kDa(千道爾頓)，且兩種疏水端的分子量相差不超過10kDa。

3.根據權利要求1所述可大幅提高包涵體蛋白復性效率的高分子復合膠束，其特征在于：所述親水端具有環境響應性的雙親性嵌段共聚物，其親水環境響應性鏈段為具有溫度響應性的聚N-異丙基丙烯酰胺(poly(N-isopropylacrylamide),PNIPAM)、聚2-甲基-2-丙烯酸-2-(2-甲氧基乙氧基)乙酯(poly(2-(2-methoxyethoxy)ethyl methacrylate),PMEO₂MA)，或者具有pH響應性的聚β氨酯(poly(β-amino ester),PAE)，或者具有溫度和pH雙重響應性的聚甲基丙烯酸N,N-二甲氨基乙酯(poly(2-(Dimethylamino)ethyl methacrylate),PDMAEMA)、聚N-2-乙氨基乙基丙烯酰胺(poly(N-[2-(Diethylamino)ethyl]acrylamide),PDEAEAM)；其疏水鏈段為聚已內酯(poly(ε-caprolactone),PCL)、聚乳酸(polylactide,PLA)或者聚苯乙烯(polystyrene,PS)。

4.根據權利要求1所述可大幅提高包涵體蛋白復性效率的高分子復合膠束，其特征在于：針對帶正電荷的包涵體蛋白(等電點pI>7.0)的復性，所述親水端具有環境響應性的雙親性嵌段共聚物，其親水環境響應性鏈段混聚了疏水類單體：包括但不限于N-叔丁基丙烯酰胺(N-tert-butylacrylamide)、N-苯基丙烯酰胺(N-phenylacrylamide)；和帶正電荷類的單體：如帶氨基類(-NH₂)單體、帶叔胺類單體(-NR₁R₂，R₁、R₂可相同也可不同)、帶季銨鹽類單體(-N⁺R₁R₂R₃)、帶胍基類單體、帶咪唑基類單體。針對帶負電荷的包涵體蛋白(等電點pI<7.0)的復性，所述親水端具有環境響應性的雙親性嵌段共聚物，其親水環境響應性鏈段混聚了疏水性單體：包括但不限于N-叔丁基丙烯酰胺(N-tert-butylacrylamide)、N-苯基丙烯酰胺(N-phenylacrylamide)；和帶負電荷的單體：如帶羧基(-COOH)類單體、帶磷酸基團類單體、帶磺酸基類單體。

5.根據權利要求1所述可大幅提高包涵體蛋白復性效率的高分子復合膠束，其特征在于：所述親水端不具有環境響應性的雙親性嵌段共聚物，其親水鏈段為聚乙二醇(poly(ethylene glycol),PEG)、聚2一甲基丙烯酰氧乙基磷酰膽堿(poly(2-methacryloyl-oxyethyl phosphorylcholine),PMPC)，其疏水鏈段為聚已內酯(poly(ε-caprolactone),PCL)、聚乳酸(polylactide,PLA)或者聚苯乙烯(polystyrene,PS)。